Bolilla 6:

Metabolismo de las protenas

Digestin y absorcin de protenas. Biosntesis de aminocidos no esenciales.

Degradacin de protenas y eliminacin de nitrgeno.

Degradacin de los aminocidos a glucosa y lpidos. Metabolismo de los aminocidos a nivel tisular. Enfermedad metablica y manejo dietario.

METABOLISMO DE AMINOCIDOS
Los aminocidos desempean muchas funciones importantes en los seres vivos ya que participan en la biosntesis de compuestos nitrogenados tales como: nucletidos (pricos y pirimidnicos) hormonas (tiroxina y adrenalina) coenzimas Porfirinas Adems los aminocidos son las unidades estructurales de las protenas. Estas molculas extraordinarias cumplen diferentes funciones dependiendo del tejido y de la ubicacin celular, por ejemplo: estructurales (colgeno o elastina) funcionales (Miosina del msculo, hemoglobina) protectoras (queratina del pelo y uas) catalticas (enzimas) Defensa (anticuerpos)

El recambio de las protenas puede ocurrir por varias causas: a) porque la protena ha cumplido su ciclo vital, b) porque ha sufrido un efecto deletreo que provoca la destruccin de la misma c) en caso de ciertas enfermedades en las cuales la clula debe utilizar protenas para cumplir funciones energticas. Toda protena tiene una VIDA MEDIA determinada tras la cual se destruye por diferentes tipos de mecanismos en los cuales intervienen enzimas proteolticas. Por ejemplo las protenas que forman parte de membranas tiene una vida media de meses Mientras que aquellas que cumplen funciones de regulacin sealizacin tienen una vida media corta, de minutos u horas.

Fuentes exgenas (aprox.70 g/ da) Protenas de la dieta

Fuentes endgenas (aprox. 140 g/ da) Protenas tisulares

Digestin y absorcin AMINOACIDOS

Degradacin

Transaminacin y/ Desaminacin

Degradacin

Biosntesis
Protenas Aminocidos No esenciales Constituyentes nitrogenados no Proteicos: purinas, pirimidinas porfirinas, cidos biliares

- cetocidos

Amonaco

 - cetocidos

Amonaco

Oxidacin

Glucosa Urea

Acetil CoA

Cuerpos cetnicos

Excrecin renal
En los organismos, el 90% de las necesidades energticas son cubiertas por los hidratos de carbono y las grasas. El 10% al 15% restante es proporcionado por la oxidacin de los aminocidos.

Ciclo de Krebs

CO2 + H2O ATP

Digestin y absorcin de protenas A diferencia de los hidratos de carbono y lpidos una parte significativa de la digestin de protenas tiene lugar en el estmago.

TRANSPORTE MEDIADO ACTIVO

Digestin de Protenas I) En el estmago

Clulas Parietales

HCl

GASTRINA

Clulas Principales

Pepsingeno

Pepsingeno
Proenzima
-NH2

H Cl

Pepsina + resto de 42 Aa.

Enzima activa
NH2 -NH2

pH 1,5-2,5

Como acta la pepsina?

ES UNA ENDOPEPTIDASA HIDROLIZA UNIONES PEPTIDICAS
ACTUA SOBRE GRUPOS AMINOS DE Aac AROMATICOS (Triptofano, fenilalanina, tirosina)

FORMACION de HCL
ACCION DE LA ANHIDRASA CARBONICA

CO2 + H2O

H2CO3

H+ + HCO3Histamina

LUMEN

H+

Acetilcolina

Gastrina Membrana apical

ATP K+ ADP + Pi

(+)
Clula Parietal

CITOPLASMA

SECRECION PANCREATICA
Estmago Intestino Sangre Pncreas

H+

Secretina

HCO3-

pH

Aminocidos

Pancreozimina o Colecistoquinina

Enzimas

Digestin de Protenas II) En Duodeno

Tripsingeno
Enteroquinasa
INACTIVOS

Tripsina
T R I P S I N A

ACTIVOS

Quimotripsingeno Procarboxipeptidasas A y B
Proelastasa

Quimotripsina

Carboxipeptidasas A y B
Elastasa

QUE TIPO DE ENLACES PEPTIDICOS HIDROLIZAN?

Tripsina (endopeptidasa) : grupos carbonilo de lisina y arginina
Quimotripsina (endopeptidasa) grupos carboxilo de fenilalanina, tirosina, triptofano Las carboxipeptidasas (exopeptidasas) eliminan restos carboxilos terminales.

CLASIFICACIN de AMINOCIDOS
Alifticos: glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina. Hidroxiaminocidos: serina y treonina. Dicarboxlicos y sus aminas: cido asprtico y asparagina, cido glutmico y glutamina.

Bsicos : lisina, arginina, histidina.

Aromticos: fenilalanina, tirosina, triptfano Azufrados: cistena, metionina. Iminocidos: prolina, hidroxiprolina.

SISTEMAS DE TRANSPORTE DE LOS AMINOACIDOS

1- Aminocidos neutros pequeos: Alanina, serina

Transporte Mediado Activo CELULAS (intestinales, renales, hepticas, etc.) Difusin facilitada

Aa. neutros y aromticos grandes: isoleucina, tirosina 2- Aminocidos bsicos: Arginina 3- Aminocidos cidos: Glutamato 4- Iminocidos: Prolina

Los aminocidos absorbidos son transportados como aminocidos libres por la sangre principalmente hacia el hgado, que es el sitio primario del metabolismo de los aminocidos y a otros rganos o tejidos para su utilizacin

Distribucin de los aminocidos en el perodo postprandial

Glutamina y Asparagina: Intestino y rin
Aminocidos de cadena ramificada: Msculo y cerebro La mayor parte de los aminocidos: Hgado

Degradacin de protenas endgenas

Las protenas endgenas cuando han cumplido su ciclo vital o

sufren alteraciones por compuestos txicos, como radicales

libres, metales pesados, etc., se degradan. El Ciclo vital depende de la vida media de la protena; por

ejemplo existen protenas de vida media corta (hormonas,

antgenos, etc.) y otras de vida media larga (protenas estructurales). Una vez degradadas, sus aminocidos pasan a formar parte de la reserva de aminocidos del organismo.

FONDO COMUN DE AMINOACIDOS

Digestin de Protenas exgenas Degradacin de Protenas endgenas
Aminocidos sintetizados en la clula

DEGRADACION DE PROTEINAS ENDOGENAS

Proteasas lisosomales CATEPSINAS Degradan protenas extracelulares que ingresan por endocitosis. Degradan protenas de vida media larga Complejos multienzimticos. Degradan protenas de vida media corta. CALPANAS Proteasas citoslicas activadas por Ca++ Proteasas que participar en el proceso de muerte celular programada apoptosis

Proteasomas

CASPASAS

DESTINO DE LOS AMINOCIDOS EN LA CELULA

Biosntesis: Protenas, Compuestos no proteicos, etc. Gluconeognesis Obtencin de Energa
a

Los aminocidos deben degradarse

1) Prdida del Grupo Amino 2) Degradacin de la cadena carbonada

PERDIDA DEL GRUPO AMINO

Reacciones de Transaminacin Reacciones de Desaminacin Oxidativa Reacciones de Desaminacin no Oxidativa Son reacciones metablicas acopladas

Reaccin de Transaminacin: Esquema General

Transaminasas
Fosfato de piridoxal (Vitamina B6)

L-Glutamato

a- cetocido

a-cetoglutarato

L- Aminocido

Glutamato Aminotransferasa En las reacciones de transaminacin ocurre la transferencia de un grupo amino desde un aaminocido dador a un a-cetocido aceptor. Las enzimas que catalizan estas reacciones se denominan AMINOTRANSFERASAS o TRANSAMINASAS. Estas enzimas son de naturaleza ubicua, estn presentes tanto en el citosol como en las mitocondrias de las clulas de todos los seres vivos, animales y vegetales.

 Las reacciones de transaminacin son fcilmente reversibles y son muy importantes en el metabolismo proteico.

Todos los aminocidos (excepto lisina y treonina) participan en reacciones de transaminacin con los -cetocidos: piruvato alanina oxalacetato aspartato -cetoglutarato glutamato

TRANSAMINASAS DE INTERES CLINICO

Infarto de Miocardio Glutmico Oxalacetico Transaminasa (GOT) o Aspartato aminotransferasa (AST) Aumentada en afecciones cardacas y hepticas (principalmente hepatitis con necrosis)
Afecciones Hepticas Glutmico Pirvico Transaminasa (GPT) o Alanina aminotransferasa (ALT) Los mayores aumentos se producen como consecuencia de alteraciones hepticas: colestasis, hepatitis txicas o virales. Relacin Normal: GOT/GPT = 1 COCIENTE DE RITIS Hepatitis alcohlicas c/necrosis de tejido: GOT/GPT> 1

GPT (Glutmico Pirvico Transaminasa)

GOT (Glutmico Oxalacetico Transaminasa)

GPT Alanina Cetoglutarato

Piruvato

Glutamato

GOT Aspartato Cetoglutarato

Oxalacetato

Glutamato

Desaminacin Oxidativa

L-glutamato que contiene los grupos aminos provenientes de las reacciones anteriormente descriptas ingresa a la mitocondria a travs de transportadores y puede eliminar el grupo amino proveniente del aminocido inicial a travs de una reaccin de desaminacin oxidativa, que se considera como la principal va de salida del amonaco. + GDH Glutamato + H2O + NAD(P) a-Cetoglutarato + NH4+ + NAD(P)H + 2 H+

REGULACION DE LA GLUTAMATO DESHIDROGENASA

Regulacin alostrica ( + ) ADP Y GDP ( - ) ATP Y GTP
Cuando se acumula ATP y GTP en la mitocondria, como consecuencia de una actividad elevada del ciclo de Krebs, se inhibe la desaminacin del glutamato para no incorporar ms a-cetoglutarato al ciclo. Por el contrario, cuando aumentan los niveles de ADP y GDP se activa la enzima y de esa forma se produce NADH que es utilizado para la sntesis de ATP e ingresa el -cetoglutarato al Ciclo de Krebs.

Es una enzima mitocondrial (hgado y rin)

TRANSDESAMINACION
Es el mecanismo general de desaminacin de los aminocidos, resultante del acoplamiento de las dos enzimas: transaminasa y glutmico deshidrogenasa

TRANSAMINACION

DESAMINACION OXIDATIVA

Aminocido

a-cetoglutarato
GDH

NADH + H+ NAD+

NH4+

a-cetocido

Glutamato

ELIMACION DEL GRUPO AMINO

AMINOOXIDASAS
Flavoprotenas que producen desaminacin oxidativa de los ismeros D- de los aminocidos

Catalasa

Los D-Aminocidos utilizan enzimas cuya coenzima es el FAD Estas flavoprotenas se encuentran en los peroxisomas junto con las catalasas

REACCIONES DE DESAMINACION NO OXIDATIVA

Serina deshidratasa

L-Serina

Fosfato de Piridoxal

Piruvato + NH4+

Treonina deshidratasa
L-Treonina
Fosfato de Piridoxal

a- cetobutirato + NH4+

Origen del amonaco

Reacciones de desaminacin: oxidativa y no oxidativas Bacterias intestinales y posterior absorcin.

EL AMONIACO ION AMONIO ES TOXICO DEBE SER ELIMINADO

TOXICIDAD DEL AMONIACO

A NIVEL CEREBRAL [NH4+] : revierte la reaccin de la glutamato deshidrogenasa

[a-cetoglutarato]

[ATP]

Valores normales: 5-10 mM de NH3 en sangre

Transporte de los grupos aminos de los aminocidos

El amonaco producido permanentemente en los tejidos, es transportado hacia el hgado bajo la forma de un compuesto, no txico, la GLUTAMINA, que puede atravesar con facilidad las membranas celulares por ser una molcula neutra. La reaccin es catalizada por una enzima mitocondrial, muy abundante en tejido renal, denominada GLUTAMINA SINTETASA la cual requiere energa en forma de ATP.

TRANSPORTE Y DESTINO DEL AMONACO

La mayora de los tejidos Hgado Msculo

Glutamato

Glutamato

Aminocidos

Glutamina sintetasa

Glutaminasa

Glutamato deshidrogenasa

Glutamina

Glutamina

Piruvato

Alanina

Alanina

Piruvato

Ciclo de la Glucosa Alanina

Glucosa Glucosa

REACCION DE LA GLUTAMINA SINTETASA

ATP + NH4+

ADP + Pi

Glutamina sintetasa

Glutamato

Glutamina

REGULACION DE LA ACTIVIDAD DE LA ENZIMA GLUTAMINA SINTETASA

Regulacin alostrica
(+) a-cetoglutarato, ATP (-) Carbamilfosfato, Glutamina, Pi

(+) Desadenilacin

GS
ACTIVA

Regulacin Covalente
(-) Adenilacin

GS AMP
INACTIVA

REACCION DE LA GLUTAMINASA

H2O
Glutaminasa

NH4+

Glutamina

Glutamato

Enzima Mitocondrial
Muy activa en hgado y rin

ELIMINACION DEL AMONIACO

AMONIOTELICOS: Especies acuticas como peces seos. URICOTELICOS: Aves y reptiles UREOTELICOS: Animales terrestres
NH3

Acido rico

Urea

En el hombre: Urea compuesto no txico y muy soluble. A nivel renal parte del amonaco se excreta como in amonio siendo muy importante este mecanismo para el mantenimiento del equilibrio cido-base.

 Adems del amonaco formado en los tejidos, una cantidad considerable es producida por las bacterias intestinales a partir de las protenas de la dieta . Este amonaco se absorbe y pasa a la sangre portal.
Normalmente el hgado elimina el amonaco de la sangre portal, de tal manera que la sangre perifrica est exenta del mismo. Esto es esencial ya que cantidades muy pequeas de amonaco son txicas para el SNC, produciendo temblor, visin borrosa y en los casos mas graves, coma y muerte. Por un mecanismo cclico, el AMONACO resultante de la desaminacin oxidativa del glutamato (proceso que ocurre en casi todos los tejidos), se convierte en el hgado en UREA que luego por va sangunea llega a los riones y se excreta por orina.

Translocasas

El grupo amino proveniente de la desaminacin oxidativa del glutamato en la mitocondria, y el CO3H- de las oxidaciones biolgicas, forman un compuesto inestable, el Carbamil fosfato

El carbamilfosfato es utilizado en la sntesis de las bases pirimidnicas que intervienen en la formacin de los nucletidos pirimidnicos

REGULACION DEL CICLO DE LA UREA

Regulacin a corto plazo

Carbamil fosfato sintetasa I

(+) N-Acetil glutamato

Regulacin a largo plazo

Biosntesis de las enzimas del ciclo

(+) Aumento protenas de la dieta Aumento degradacin protenas endgenas (Inanicin )

GASTO ENERGETICO DEL CICLO DE LA UREA

Formacin de Carbamil fosfato: 2 ATP

Ingreso de Aspartato: 1 ATP

AMP + PPi

2 Pi

EN TOTAL: 3 ATP

PROPIEDADES DE LA UREA
Molcula pequea, sin carga. Difusible Soluble

Atxica
El 50% de su peso es nitrgeno. Permite la eliminacin de 2 productos de desecho: CO2 y NH3 Valores Normales: 25-30 gr de urea diarios

 Existen defectos genticos en diferentes enzimas del ciclo de

la Urea que lleva a una incapacidad para convertir amonaco

en urea Los pacientes que tienen esta patologa no pueden tolerar dietas ricas en protenas. En estos casos para suplementar los aminocidos esenciales se incluyen en la dieta los a-cetocidos anlogos que constituye la parte esencial de estos aminocidos.