UNIVERSIDAD VERACRUZANA

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS Y AGROPECUARIAS

CARRERA DE BIOLOGA
REGIN: POZA RICA TUXPAN PERIODO: AGOSTO 2010 / FEBRERO 2011

E.E.

PROBLEMAS REGIONALES DE LA BIOLOGA

GRUPO 101 - SECCIN UNO

Presenta

Biol. Moiss Chvez Aguiar

Tuxpan de R., Cano. Veracruz.

Sept. / 2010

GALILEO GALILEI (1564-1642)

ZACARIAS JANSSEN (1588-1628)

MARCELO MALPIGHI (1628-1694)

ANTONY VAN LEEUWENHOEK (1632-1723)

ROBERT HOOKE (1635 1703)

Micrographia (1665)
Acu la palabra clula

Se invent, hacia 1610, por Galileo, segn los italianos, o por Jansen, en opinin de los holandeses

CONCEPTO
El microscopio ha jugado un papel muy importante en los avances cientficos, se puede decir que seala el inicio de la biologa moderna, a partir de las observaciones de los microscopistas del siglo XVII: HOOOKE, LEEUWENHOECK, SWAMERDAN y otros.

La palabra microscopio fue utilizada por primera vez por los componentes de la "Accademia dei Lincei Micro=pequeo Scopein=ver

El microscopio es un instrumento ptico y mecnico que modula energa y amplifica el ngulo de visin humana para producir imgenes amplificadas de un objeto microscpico cualquiera.

GALILEO GALILEI (1564-1642)

La Accademia dei Linceii era una sociedad cientfica a la que perteneca Galileo y publicaron un trabajo sobre la observacin microscpica del aspecto de una abeja

ZACARIAS JANSSEN (1588-1628)

El primer microscopio fue construdo hacia 1595 por los fabricantes de lentes, hijo y padre, Hans y Zacarias Janssen, en Milderburg, Holanda. Mediante dos lentes separadas construyeron un primitivo artificio que permiti la ampliacin de la imagen del objeto entre 3 y 9 veces. Ms que un instrumento cientfico fue considerado una atractiva curiosidad.

Alrededor de sesenta aos faltaba para que Robert Hooke (1635 1702), construyera un microscopio perfeccionado con lmpara y condensador para concentrar la luz en el objeto.

Con este invento se describe la existencia de clulas en tejidos vegetales comenzando una alianza productiva entre las invenciones del mundo fsico y los descubrimientos del universo biolgico.

Microscopio compuesto supuestamente realizado por Zacharias Janssen en 1595, en Midelburg, HOLANDA. (25 cm de largo y 6 cm de diametro). Est formado por dos tubos de latn, soportando una lente cada uno, de 3 X y 5 X, que se deslizan dentro de otro tubo de latn lo que permite el enfoque. Se considera el primer microscopio compuesto de la historia. Este microscopio se hace segn una copia del original de los HH. Jansen, aparecida en un anticuario de Pars en 1891, hoy da se cuestiona su autenticidad

Zacharias Janssen (La Haya, 1588 - msterdam, 1628 o 1631) era hijo de un fabricante de lentes de nombre Hans, Jan, Johan o Johannides, que falleci cuando Zacharias contaba cuatro aos de edad. Su madre lo instruy en las tareas del taller familiar, que el joven dirigi hasta 1624. En 1592 haban aparecido las primeras ilustraciones de insectos aumentados con este aparato, obra del dibujante flamenco Joris Hoefnagel, cuando Zacharias contaba nicamente cuatro aos de edad, con lo que se supone que el invento ya exista, probablemente hecho por el padre, que presentaba el objeto como atraccin de ferias.

MALPIGHI (1628-1694)
Las primeras publicaciones importantes aparecen en 1660 y 1665 cuando Malpighi observa los capilares sanguneos y Hooke publica su obra Micrographia

Anton van Leeuwenhoek: A pesar de no tener estudios suficientes, contribuy al surgimiento de una de las ramas de la Biologa, la Microbiologa. A el se le atribuye la construccin del primer microscopio funcional y el descubrimiento de microorganismos en el agua; tambin fue uno de los primeros en observar espermatozoides humanos.

Robert Hooke 1635 - 1703

Le fascinaba la microscopia, y en su obra Micrographia (1665), Hooke describe el uso del microscopio compuesto que l mismo haba inventado. Acu la palabra clula para caracterizar los espacios angulares que haba observado en una delgada seccin de corcho

Micrografa (1665)

No tuvo rival como constructor de instrumentos y numerosos dispositivos. Entre ellos podemos citar el microscopio, el telescopio y el barmetro, aparatos que Hooke perfeccion notablemente. Otras de sus invenciones fueron un tambor giratorio para el registro de la presin y la temperatura, y una ensambladura universal

ERNST ABBE
Las mejoras mas importantes de la ptica surgieron en 1877 cuando Abbe publica su teora del microscopio

KARL ZEISS (1816-1888)

Mejora la microscopa de inmersin sustituyendo el agua por aceite de cedro lo que permite obtener 2000 aumentos

ERNST RUSKA
El microscopio electrnico de transmisin (T.E.M.) consigui aumentos de 100.000 X. Fue desarrollado por Max Knoll y Ernst Ruska en Alemania en 1931

Microscopio del siglo XVIII

Microscopio escolar, del siglo XX. Logra aumentos de 1000 x o 2000 x, segn la combinacin de lentes

CLULA PROCARIOTA

ORGANISMO UNICELULAR

Cyanophyta

Protozoario

CONCEPTO
El microscopio ha jugado un papel muy importante en los avances cientficos, se puede decir que seala el inicio de la biologa moderna, a partir de las observaciones de los microscopistas del siglo XVII: HOOOKE, LEEUWENHOECK, SWAMERDAN y otros.

La palabra microscopio fue utilizada por primera vez por los componentes de la "Accademia dei Lincei Micro=pequeo Scopein=ver

El microscopio es un instrumento ptico y mecnico que modula energa y amplifica el ngulo de visin humana para producir imgenes amplificadas de un objeto microscpico cualquiera.

TIPOS DE MICROSCOPIOS
Microscopio ptico Simple Microscopio ptico Microscopio ptico Compuesto

Lupa
M.O. Normal Campo oscuro Contraste de fases Fluorescencia

Tipos de microscopio s Microscopio electrnico

Transmisin Barrido Digital Efecto tnel o cuntico

Los microscopios se han clasificado de acuerdo a diferentes criterios: 1) Segn el nmero de pasos de imagen los microscpicos pueden ser simples o compuestos; los primeros son microscopios que forman una imagen en un solo paso, pueden estar formados por una o ms lentes, unidas entre s o ligeramente separadas, pero siempre actan como un solo sistema de lentes. Los microscopios compuestos, son aquellos que para formar la imagen final, usan por lo menos dos pasos de formacin de imagen, uno por el objetivo y la otra por el ocular 2) Tipo de energa empleada o modulada por el microscopio en la produccin de imagen: Fotonicos:- son aquellos microscopios cuyas fuentes de energa emiten fotones. Electrnicos:- Aquellos en los cuales la fuente de energa emite electrones, fundamentalmente. Rayos X, mesnicos y acsticos. Los primeros ocupan rayos X como elemento modular, mientras los segundos utilizan mesones y los terceros ocupan ultrasonido.

MICROSCOPIO DE CAMPO CLARO

El microscopio presenta bsicamente dos tipos de componentes: pticos y mecanicos, estos se encuentran formando 3 sistemas:

Formado por tres sistemas:

o o Sistema mecnico Sistema ptico

Sistema elctrico

FUNDAMENTO DE LA MICROSCOPA
Cuando el observador se acerca el objeto se agranda Pero a menos de 25 cm no se ve con claridad Si se aumenta el ngulo visual se ve con claridad

PARMETROS PTICOS
Poder de aumento Poder de resolucin N de campo Profundidad de foco Contraste

PODER DE AUMENTO DEL MICROSCOPIO

Poder de Aumento = Aumento del ocular X Aumento del objetivo OCULAR X OBJETIVO AUMENTO

10 10
20

X X
X

10 40
100

100 X 400 X
2000 X

* Limite de resolucin * Poder resolutivo de un microscopio

DIMETRO DEL CAMPO LUMINOSO EN EL PLANO DEL OBJETO MICROSCOPICO (DCL)

Es el dimetro de la imagen observada a travs del ocular, expresado en milmetros

DCL= AUMENTO DEL OCULAR / AUMENTO DEL OBJETIVO

PODER DE RESOLUCIN
Distancia si dos puntos se distinguen Mayor, cuando menor es la longitud de onda Mayor, cuanto mas grande es la apertura numrica Mayor, con aceite de cedro

CONTRASTE
Diferencia de absorcin de luz entre el objeto y el medio Puede aumentarse con las tinciones

MICROSCOPIO PTICO COMPUESTO

Partes de un microscopio ptico

PARTE MECNICA QUE SE PUEDE DESMONTAR

Estativo

Cabezal

Tornillos de la platina

Oculares Objetivos Condensador

SISTEMA DE AJUSTE (1)

Anillo de ajuste de los oculares Tornillo que permite mover el cabezal Tornillos del condensador

Palanca de cierre del diafragma

Tornillos reguladores de la platina

SISTEMA DE ENFOQUE
Freno

Tornillo macromtrico

Tornillo micromtric o

PARTE PTICA

Sistema de iluminacin: fuente de luz, condensador y diafragma Lentes: Del ocular Del condensador De los objetivos

SISTEMA DE ILUMINACIN: FUENTE DE LUZ

Suele ser una lmpara halgena de intensidad graduable Se enciende y apaga con un interruptor En el exterior puede tener un filtro
Interruptor y graduacin de la luz

Filtro

Lmpara

CONDENSADOR Y DIAFRAGMA

Condensador: concentra la luz de la lmpara en un punto de la preparacin Diafragma o iris (est dentro del condensador):si se cierra mejora el contraste, pero empeora la resolucin

LENTES: OBJETIVOS

Estn colocados en el revolver Tienen un sistema de amortiguacin Un anillo coloreado indica los aumentos Son de 4x, 10x, 40x y 100x (inmersin) aumentos

OBJETIVOS

Rojo 4x

Amarillo 10x

Blanco 100x

Azul 40x

Amortiguacin

OCULARES

CARACTERSTICAS DE UN OBJETIVO MICROSCPICO

TETRAOCULARES

PRIMER MICROSCOPIO ELECTRONICO

Utiliz un haz de electrones en lugar de luz para enfocar la muestra. Posteriormente, en 1942 se desarrolla el microscopio electrnico de barrido (SEM).

PRIMER M.E. EN ESPAA (1949)

MATERIAL NECESARIO: PORTAS Y CUBRES

TCNICA DE OBSERVACIN KOHLER

PODER DE OBSERVACIN DEL MICROSCOPIO

LIMITES Y DIMENSIONES EN BIOLOGA

El poder resolutivo (P.R) o de resolucin de un microscopio es la capacidad del sistema ptico para discriminar o separar dos puntos muy cercanos entre s, y se determina: P. R = longitud de onda de la energa usada/An del objetivo + An del condensador La apertura numrica (An) nos permite calcular el poder de resolucin de los sistemas pticos empleados. Se define como la dimensin del cono angular luminosos aceptado por el objetivo desde un punto del objeto (cuantifica la cantidad de luz que entra al objetivo). La apertura numrica (An) es un valor que se obtiene con la siguiente formula: An = n sen ngulo n = ndice de refraccin del medio existente entre la lente frontal del objetivo y la preparacin El lmite de resolucin de un microscopio se define, como la mnima distancia que deben de ser separados dos objetos uno del otro para poder discriminarlos (definirlos), y se calcula de la siguiente manera: d = Longitud de onda de la luz empleada / 2 An d = distancia mnima entre los dos puntos para visualizarlos separados An = apertura numrica

Lmite de resolucin (frmula de Abbe) 0.61 x l

n x sen a

ACEITE DE INMERSIN

Hoy no son de madera de cedro, sino sintticos Los hay de baja, media y alta viscosidad Su empleo es imprescindible con el objetivo de inmersin (100x)

LIMITES Y DIMENSIONES EN BIOLOGA

Limite de resolucin del ojo humano 0.1 mm = 100 micras El ojo humano resuelve puntos separados por 25 a 100 micras Limite de resolucin del microscopio compuesto 0.2 mm, 1700 A El microscopio compuesto resuelve 500 veces ms que el ojo humano. El microscopio compuesto logra aumentos de 2500 veces Limite de resolucin del microscopio electrnico 5 A, 10 A, 20 A El microscopio electrnico resuelve puntos separados por 0.018 A El microscopio electrnico resuelve 10,000 mayor que el ojo humano El microscopio electrnico resuelve 500 veces mayor que el microscopio compuesto El microscopio electrnico logra aumentos de 200,000 veces o ms Longitud de onda de la luz blanca = 0.55 micras Longitud total de una hlice de DNA correspondiente a un peso molecular de 2x106 =1 micra Dimetro de una hlice de DNA = 20 A Dimetro de un tomo de hidrogeno = 1.06 A

Unidad Centmetro Milmetro Micra Nanmetro ngstrom

Simbolo Cm mm nm A 1 mm 1 1 nm

En cm 1 10-1 10-4 10-7 10-8 = 1000 = 1000 = 10 micras nm A

En mm 10 1 10-3 10-6 10-7

En A 108 107 104 10 1

Cmo se estudian las clulas?

Microscopia ptica

Microscopio ptico

Clulas eucariontes tratadas con colchicina

Gram negativo

Gram positivo

MICROSCOPA DE CAMPO OSCURO

Treponema pallidum

MICROSCOPA DE CONTRASTE DE FASES

Clulas epiteliales 20 x

MICROSCOPIA DE FLUORESCENCIA

Clulas epiteliales 200 x

Endosperma siendo colonizada por bacterias

Bacterias en fumarolas marinas

adheridas a un cristal de sulfuro

Fibroblastos teidos con el fluorocromo FITC

Bacillus subtilis esporulando teidos

con FITC, DAPI y galactosidasa.

MICROSCOPA ELECTRNICA

Microscopia electrnica de transmisin.

Microscopia de un alga roja antes de formar su pared

MICROSCOPIO ELECTRNICO DE BARRIDO

Criofractura de epitelio gstrico

vista por microscopia de barrido

vulo de hamster sin zona pelucida con espermatozoides

Glbulo rojo

Glbulo blanco

Microscopia confocal.

Secuencia de microscopia confocal

Microscopia confocal de fluorescencia

Fraccionamiento subcelular y centrifugacin por gradiente

Fracciones N M L P S

Contenido ncleos mitocondrias lisosomas

g*min 600*10min 3000*10min 25000* 10min

microsomas y membrana
fraccin soluble

100000* 30min

Separacin de protenas en gradiente de sacarosa

Estudio de biomolculas
electroforesis de protenas

Cmaras de electroforesis

Gel de poliacrilamida teido con azul de coomasie

Electroforesis de ADN

Geles de agarosa

Gel de ADN teido con bromuro de etidio y visualizado con luz UV

MANEJO DEL MICROSCOPIO

No poner la preparacin al revs Regular la luz a intensidad media Ajustar condensador y diafragma al medio Empezar por poco aumento Mirando por fuera subir la platina Enfocar y ajustar Pasar al siguiente aumento y enfocar Al acabar retirar la preparacin Apagar la luz

CONSERVACIN DEL MICROSCOPIO

Ponerle su funda al guardarlo Limpieza de lentes con papel de gafas El exceso de xilol al limpiar las lentes desgasta el cemento Usar pincel y pera de aire