FUNDAMENTOS TOXICOLGICOS PARA ESTABLECER CATEGORIAS TOXICOLGICAS DE PLAGUICIDAS

ING. RAFAEL ROMERO PORTILLO CONSULTOR INDEPENDIENTE

ESTUDIOS DE TOXICIDAD AGUDA Y SUBCRNICA

ESTUDIOS DE TOXICIDAD AGUDA

OBJETIVOS : Evaluar efectos inmediatos de exposicin al plaguicida Determinar la DL50 para clasificar al plaguicida Brinda informacin de las condiciones de dosificacin a seguir en estudios posteriores de larga duracin

Exposicin nica
Animales sanos jvenes Estudio en ambos sexos Condiciones controladas de enjaulamiento y alimentacin

Observacin por 14 das despus de la exposicin de comportamiento,apariencia de piel, ojos,salivacion, respiracin, alimentacin, respiracin y mortalidad

Periodo de aclimatacin

Los animales que sobreviven son sacrificados para el anlsiis histopatolgico e indicar a que nivel se presentan los efectos toxicolgicos

PARAMETROS DE EVALUACIN DEL ESTUDIO

Especie, gnero y nmero de los animales de prueba

Dosis empleadas Signos y sntomas por dosis, por gnero, por animal de prueba Muertes por dosis y por gnero

Ao del estudio

Estudios bajo GLP

DL50

Metodologa empleada

RESULTADOS DE LOS ESTUDIOS AGUDOS

Inhalatorio
CL50 Dato Numrico

Oral
DL50 Dato Numrico

Drmico
DL50 Dato Numrico

Estudios agudos
Irritacin Inhalatorio Ocular CL50 Anlisis Dato subjetivo Numrico Hipersensibilidad Positivo O negativo Irritacin Drmico Dermica DL50 Anlisis Dato subjetivo Numrico

La categoria asignada esta en funcin de quien hace la observacin

Las metodologas anteriores consideran 5 o 6 diferentes grados de irritacin, las actuales consideran 4 grados

No resulta adecuado exigir para determinar equivalencia que el grado de irritacin sea exactamente el mismo en el solicitante y en el perfil de referencia

ESCALA DE EVALUACIN PARA LA IRRITACIN DERMICA ERITEMA No eritema Eritema ligero apenas perceptible GRADO 0 1

Eritema bien definido

Eritema de moderado a severo Eritema severo (rojo intenso), escaras

2
3 4

EDEMA No edemas

GRADO 0

Edema ligero apenas perceptible

1
2 3 4

En base al juicio de quin realiza la observacin de los animales de prueba

Edema ligero con bordes sobresalientes con elevacin definida Edema moderado con una elevacin mxima de aprox. 1 mm Edema severo, elevacin mayor de 1 mm extendindose ms all del sitio de aplicacin

ESCALA DE EVALUACIN PARA LA IRRITACIN OCULAR EVALUACIN DE LA CORNEA Sin ulceracin ni opacidad reas difusas de opacidad Zona traslucida fcilmente discernible, detalles del iris ligeramente oscurecido Zona nacarada, detalles del iris completamente invisibles Crnea opaca, iris no discernible a travs de la opacidad GRADO 0 1 2

EVALUACION DE CONJUNTIVA Enrojecimiento en conjuntiva palpebral y ocular, excluyendo crnea e iris, vasos sanguneos normales Hiperemia de algunos vasos sanguneos,(ojos inyectados) Coloracin carneal difusa, vasos sanguneos individuales difcilmente discernibles Coloracin roja intensa y difusa

GRADO 0

1 2

3 4

Chemosis EVALUACION DEL IRIS Normal Pliegues netamente ms profundos, congestin, tumefaccin, hiperemia pericorneal moderada o conjuntiva inyectada Ausencia de reaccin a la luz, hemorragia, destruccin marcada, o cualquiera de estos GRADO 0 1 Prpados o membranas nictitantes sin tumefaccin Cualquier tumefaccin superior a la normal, incluye membranas nictitantes Tumefaccin evidente con eversin parcial de los prpados 2 Tumefaccin con parpados medio cerrados Tumefaccin con prpados casi cerrados

GRADO 0 1

2 3 4

ESTUDIOS DE TOXICIDAD SUBCRONICA

OBJETIVOS :

Evaluar la naturaleza biolgica de los efectos txicos de bajas concentraciones a nivel celular, midiendo parmetros que usualmente no pueden obtenerse de estudios agudos debido a la rapidez de la aparicin de los signos y sntomas. Establecer la variacin entre especies. Evaluar los efectos acumulativos de exposiciones repetidas (carga corporal o productos de la biotransformacin) por un periodo de tiempo del 10% de la vida de los animales de prueba

Determinar el efecto macro y microscpico en rganos y tejidos en relacin al nivel y/o duracin de la exposicin relacin dosisrepuesta. Identificar la dosificacin aproximada a la cual presentan cambios fisiolgicos, bioqumicos, morfolgicos y moleculares.
Conocer el destino del qumico y/o de sus metabolitos en los diferentes rganos y fluidos

Predecir niveles seguros de exposicin en humanos, ya que

en condiciones naturales las poblaciones (personas y animales) estn comnmente expuestas a concentraciones bajas por perodos prolongados.

Caracteristicas del estudio

Dosificacin via gavage, en agua o en alimento Animales sanos jvenes Anlisis de rganos
Pulmones

Estudio en ambos sexos, Condiciones controladas de enjaulamiento y alimentacin

Periodo de aclimatacin

Exposicin repetida por periodo del 10% de la vida del animal de prueba

comportamiento,apariencia de piel y ojos,salivacion, respiracin, alimentacin, control de peso y mortalidad

Los animales son sacrificados para el anlisis de hematologa, uroanlisis, qumica clnica e histopatologia indicar a que nivel se de los fectos toxicolgicos

TRATAMIENTO

FASE DE RECUPERACIN 0 1 2 3 4 5
MESES

ANIMALES SOBREVIVIENTES

ACLIMATACIN

**

* Animales sacrificados para la evaluacin de parmetros fisiolgicos, bioqumicos y morfolgicos.

** Se incluye una fase de recuperacin post-tratamiento solo para evaluar la permanencia o reversibilidad de los efectos txicos.

Utilizar un amplio rango de dosis (baja/media/alta) a partir de la DL50 determinada en los estudio de toxicidad aguda. Una de las dosis (dosis baja) no debe de ser mas baja que la dosis cinticamente equivalente a la exposicin humana y que no produzca efectos. La dosis alta no debe comprometer el estado de salud del animal, excepto cuando el protocolo lo demanda.

Apariencia Crecimiento, Desarrollo Sobrevivencia Conducta

Evaluacin

Fluidos biolgicos Hematologa Qumica de Suero Bioqumica del suero Uroanlisis

Eutanasia y Necropsia Terminal Peso de cuerpos Peso de rganos Tasa peso de tejido peso de cuerpo Evaluacin Gruesa

rganos / Tejidos

Biomarcadores Enzimas Componentes endgenos Bilis Orina

Microscopia de luz

Examen en Microscopio Fijacin y tincin

Microscopia electrnica

GRACIAS
Ing. Rafael Romero Portillo