DEPARTAMENTO DE CIENCIAS QUMICAS Y DINMICAS

BIOQUMICA II
Q.F. Nelson Hermgenes Urcia Yengle

Antes de iniciar nuestro viaje a travs del metabolismo revisemos los HIDRATOS DE CARBONO, una de las cuatro clases principales de biomolculas ( las otras tres: protenas, cidos nucleicos y lpidos). Los carbohidratos son aldehdos o cetonas con mltiples grupos hidroxilo(OH), o sustancias que los forman por medio de la hidrlisis. Incluyen los azcares simples, como la glucosa, as como azcar, almidn y celulosa. Los carbohidratos son los productos primarios de la fotosntesis. L a fotosntesis, es la compleja serie de reacciones en las plantas que promueve la energa solar cuando la absorbe el pigmento verde llamado clorofila. Mediante el proceso, el CO, HO y los minerales se transforman en sustancias qumicas vegetales y oxgeno Los monosacridos o azcares simples, son los azcares ms sencillos, son aldehdos o cetonas con dos o ms grupos hidroxilo. Su frmula emprica es (CHO)n. Son carbohidratos que no pueden hidrolizarse.

Aquellos que tienen grupos aldehdo se denominan aldosas y los que tienen grupo grupos cetona se denominan cetosas. Todos los nombres de los monosacridos tienen la terminacin osa. Los ms pequeos, sean aldosas o cetosas, para los cuales n=3, son el gliceraldehdo (aldosa)y la dihidroxiacetona (cetosa), se presentan en el metabolismo. Estos son las triosas
C = O H H - C - OH CH2OH C = O H HO - C - H CH2OH CH2OH C=O CH2OH

El gliceraldehdo tiene un solo carbono asimtrico o quiral. As pues existen dos estereoismeros de esta aldosa de tres carbonos, el Dgliceraldehdo y el L-gliceraldehdo. La dihidroxiacetona, el ms sencillo de estos azcares, es pticamente inerte.

Los azcares con 4, 5, 6 y 7 tomos de carbono se llaman respectivamente: tetrosas, pentosas, hexosas y heptosas.

Dos pentosas, la ribosa y la 2-desoxirribosa, son esencialmente para los cidos nucleicos, los compuestos qumicos de la herencia.
La glucosa es una hexosa(CHO), o bien, CHO, con un grupo aldehdo, por lo que tambin se denomina aldohexosa. La galactosa tambin es una aldohexosa es un epmero de la glucosa en la configuracin de C-4 y un ismero ptico de la glucosa La fructosa, tambin (CHO) CHO, tiene un grupo ceto, por lo que es una cetohexosa. La manosa slo difiere en la configuracin de C-2 con la glucosa es un epmero.

En general, una molcula con n centros asimtricos y sin plano de simetra puede presentar 2 formas estereoismeros.

Las formas predominantes de la glucosa y fructosa en disolucin no son las de cadena abierta, sino que estas cadenas se ciclan en anillos. En general, el grupo aldehdo puede reaccionar con un alcohol para formar un hemiacetal: R-CHO + HOR R-CHOH-OR
CHOH H OH H O H OH H H OH
-D- GLUCOPIRANOSA

OH

De manera semejante el grupo cetona puede reaccionar con un alcohol para formar un hemiacetal.
R CO-R + HOR R CROH-OR

HOHC H H

O OH

CHOH
-D- Fructofuranosa

OH OH H

Las frmulas estructurales de glucopiranosa y fructofuranosa son proyecciones de Haworth Cuando se cicla la glucosa se crea un nuevo centro de asimetra. El carbono -1, el tomo de carbono carbonlico en la forma de cadena abierta, se convierte en un centro asimtrico en la forma cerrada. Al cerrarse el anillo se puede formar dos estructuras. La - Dglucopiranosa y la - D-glucopiranosa.
Segn la proyeccin de Haworth, la designacin significa que el grupo hidroxilo unido al carbono-1 queda por debajo del plano del anillo; significa que est por enzima del plano. Al carbono-1 se le denomina tomo de carbono anomrico, y por ello las formas y son anmeros.

En disoluciones acuosas, la - D-glucopiranosa y la - Dglucopiranosa, se interconvierten a travs de la forma abierta del azcar, hasta alcanzar una mezcla en equilibrio. Esta interconversin que se debe por cambio en la rotacin ptica, que fue denominada mutarrotacin. Algunas clulas contienen mutarrotasas, enzimas que aceleran la interconversin de azcares anomricos.
HOCH H
- D- Ribofuranosa

o
H

OH
H

HOCH H H

o
H

OH H

H
OH OH

OH H - D- 2-Desoxiribofuranosa0

Los azcares fosforilados son otra clase importante de derivados. En la primera etapa de la gluclisis, la escisin de la glucosa para obtener energa, es su conversin en glucosaa -6-fosfato. La transferencia de un grupo fosforilo del ATP al grupo hidroxilo situado en el carbono 6 de la glucosa es catalizada por la hexoquinasa.

Varios intermediarios de esta va metablica, tales como la dihidroxiacetona fosfato y el gliceraldehdo-3- fosfato, son azcares fosforilados.
CHO H- C-OH CH O-PO
Gliceraldehdo-3-fosfato

CHOH CH-OPO C=O CH

OH

H
OH

H
OH

H
OH

O-PO
Dihidroxiacetona fosfato

Glucosa-6-fosfato

La fosforilacin tambin sirve para sintetizar azcares aninicos. La carga neta de la glucosa-6-fosfato, es aproximadamente de -1,8 al pH intracelular de 7,4. La carga negativa aportada por la fosforilacin evita que estos azcares atraviesen espontneamente la bicapa lipdica de las membranas.

La fosforilacin ayuda retener a las biomolculkas dentro de las clulas, un efecto caprichosamente conocido domo la importancia de estar ionizada . La fosforilacin permite la sntesis de intermediarios reactivos. As por ejemplo, muchos derivados fosforilados de la ribosa juegan papel importante en la biosntesis de los nucletidos pricos y pirimidnicos. Los carbohidraos se clasifican algunas veces por su propiedad de reaccionar con los reactivos de Tollens, Benedict y Fehling. Los carbohidratos que dan positiva estas pruebas se llaman carbohidratos reductores. Todos los monosacridos y casi todos los disacridos son carbohidratos reductores. Ni la sacarosa( azcar de mesa) ni los polisacridos lo son

El reactivo de Fehling permite determinar la presencia de aldehdos en una muestra desconocida. Se prepara de tal manera que es una mezcla de color azul que al aadirla a una muestra desconocida oxida a los grupos aldehdos y como resultado positivo de la prueba se observa un precipitado de color rojo ladrillo de xido cuproso.

El reactivo de Fehling consta de dos soluciones A y B que se mezclan en partes iguales en el momento de usarse. La solucin A es sulfato cprico pentahidratado, mientras que la solucin B es de tartrato sdico potsico e hidrxido de sodio en agua.

Cuando se mezclan las dos soluciones, se obtiene un complejo cprico tartrico en medio alcalino, de color azul, de la siguiente manera:

El color azul de la solucin cprica del Fehling desaparece con la presencia de un precipitado de color rojo ladrillo (el cobre se reduce de +2 a +1) y la oxidacin del aldehdo al correspondiente cido carboxlico

EN EL REACTIVO DE BENEDICT, se reemplaza el tartrato de sodio y potasio por citrato de sodio el resto es similar al de Fehling. Muy utilizado en bioqumica para el reconocimiento de los grupos CHO de los azcares.

EL REACCION DE TOLLENS, el agente de oxidacin suave usado en esta prueba, es una solucin alcalina de nitrato de plata. La mezcla de nitrato de plata (AgNO3) con amoniaco acuoso genera una disolucin conocida : reactivo de Tollens, que contiene el in diamina de plata Ag(NH3)2+ . La solucin es transparente e incolora.

Para evitar la precipitacin de iones de plata como oxido de plata a un pH alto, se agregan unas gotas de una solucin de amoniaco, que forma con los iones plata un complejo soluble en agua:

Aunque este in es un agente oxidante muy dbil, es capaz de oxidar a los aldehdos a aniones carboxilato. La Ag +, que es el oxidante, se reduce a plata metlica, Ag o. Si el test de Tollens se efecta en un tubo de ensayo, la plata metlica se deposita en las paredes del mismo formando un espejo de plata. A veces, la oxidacin del aldehdo es muy rpida y entonces la plata metlica se deposita en forma de precipitado gris oscuro. Las cetonas, excepto las - hidroxicetona, no dan positivo el test de Tollens.

El aldehdo que se oxida a cido carboxlico; es un agente reductor. Los iones de plata se reducen a plata metlica; son agentes oxidantes. El plateado de espejos se suele hacer con el reactivo de Tollens. En el procedimiento comercial se utiliza glucosa o formaldehdo como agente reductor.

L a oxidacin con el reactivo de Tollens es til en la deteccin de aldehdos, en particular para diferenciarlos de las cetonas.

MONOSACARIDOS DERIVADOS

Por reduccin se obtienen los desoxiazucares y los polioles. estos ltimos se llaman genricamente ALDITOLES

Por oxidacin se obtienen cidos ALDONICOS, URONICOS O ALDARICOS, segn se oxide el carbono aldehdico, el hidroximetilo terminal o ambos carbonos. As por ejemplo, de la GLUCOSA se derivan tres azucares cidos.

HO - C -H

HO -

HO -

Por sustitucin, los derivados mas importantes son los aminoazcares, el grupo amino suele ocupar el carbono 2.

HO C - H H
OH

CHOH O H H
OH

H
OH

H
NH

O condrosamina

Oligosacridos
Los oligosacridos son polmeros de monosacridos (menos de diez), por tanto, se forman por la unin de n molculas de estas ltimas con prdida de n-1 molculas de agua. Por medio del proceso de hidrlisis, aparecen de 2 a 6 molculas de osas. Los oligosacridos son glucsidos en los que un grupo hidroxlico de un monosacrido se ha condensado con el grupo reductor de otro. Los ms importantes son los DISACRIDOS.

Los disacridos constan de dos azcares unidos por un enlace Oglucosdico. La sacarosa, la lactosa y la maltosa son los disacridos ms importantes.

La sacarosa, ( el azcar de mesa) se obtiene comercialmente a

partir de la caa o la remolacha. En la sacarosa, los carbonos anomricos de la glucosa y la fructosa estn unidos mediante un enlace glucosdico, que es para la glucosa y para la fructosa. En consecuencia, la sacarosa carece de grupos reductores(aldehdos o cetonas libres) a diferencia de la mayora de los otros azcares. La hidrlisis de la sacarosa a glucosa y fructosa est catalizada por el enzima sacarasa o sucrasa( llamada tambin invertasa porque la hidrlisis produce un cambio del poder rotatorio de dextrgiro a levgiro)

La sacarosa, en su estructura la glucosa est unida a la fructosa mediante un puente de oxgeno de tal manera que no se conserva ningn grupo aldehdo o cetnico libre. El anillo de la sacarosa no puede abrirse o cerrarse espontneamente en presencia de agua. De aqu que la sacarosa no presente mutarrotacin ni d pruebas positivas con los reactivos de Tollens o Benedict. Es el nico disacrido comn que no es reductor
H H H H 1 H H
2

H H

( -D- glucopiranosil (1

2)- -D- fructopiranosa

La lactosa, el disacrido de la leche, consta de galactosa unida a glucosa mediante un enlace -1,4-glucosdico. La lactosa se hidroliza en estos monosacridos por el enzima lactasa en el hombre( por una galactosidasa en las bacterias) liberando sus azcares componentes.
H H H H H H 1 H
4

-D- galactopiranosil-(1

4)- -D -glucopiranosa

La lactosa o azcar de la leche se encuentra en la leche de los mamferos, 4% a 6% en la leche de vaca y 54% a 8% en la leche humana. Esta tambin es un subproducto en la fabricacin de los quesos. La lactosa es un galactsido, presenta mutarrotacin y es un azcar reductor.

La maltosa, o azcar de la malta, se encuentra en los granos en germinacin, procede de la hidrlisis parcial del almidn y a su vez, por medio de la maltasa, se hidroliza a glucosa. La maltosa es un azcar reductor y presenta mutarrotacin. La apertura del anillo no ocurre en el puente de oxgeno.
H H H

H
1

H 4 H

H
H

-D-glucopiranosil-(1

4)--glucopiranosa)

La celobiosa es un disacrido formado por degradacin de la celulosa. Al hidrolizarse, la celobiosa produce D-glucosa. La celobiosa y la maltosa tienen la misma estructura salvo en lo referente a la forma de unirse las unidades de glucosa, el enlace es tipo (1,4).

Esta diferencia en la forma impide al hombre aprovechar una enorme fuente de alimento potencial, no obstante que la naturaleza podra aportar una gran cantidad de sta a partir del polisacrido de celulosa. La celobiosa es un dmero de la celulosa.
H H H H H H H H H H

-D-glucopiranosil-(1

4)--glucopiranosa)

Casi todos los recin nacidos y los nios son capaces de digerir la lactosa. Por el contrario, la mayora de los adultos de todo el mundo son deficientes en lactasa, lo cual los hace intolerante a la leche.

En un adulto deficiente en lactasa, la lactosa se acumula en el lumen del intestino delgado, cuando se ha ingerido leche porque no hay ningn ,mecanismo para la incorporacin de este disacrido.

El fuerte efecto osmtico de la lactosa no absorbida provoca la entrada de lquido en el intestino delgado.
Los sntomas clnicos de intolerancia a la lactosa son distensin abdominal, nuseas, calambres, dolor y diarreas acuosas. La deficiencia de lactasa parece heredarse mediante un gen autosmico recesivo y normalmente se expresa en la adolescencia y en adultos jvenes.

Polisacridos
Cuando se produce glucosa por fotosntesis, la energa solar queda almacenada como energa qumica, la que pueden utilizar las plantas para sus procesos qumicos.

La glucosa libre es muy soluble en agua, por lo que una planta tambin tendra que conservar una cantidad de humedad considerable para mantener la glucosa en solucin. Se evita este problema mediante la conversin de la glucosa en un polmero mucho menos soluble, el almidn. El almidn es particularmente abundante en las semillas de las plantas y en los tubrculos, donde se utiliza su energa para la germinacin y el crecimiento. Los animales que se alimentan de plantas tambin aprovechan la energa del almidn. El almidn es una mezcla de dos tipos de polmeros de -glucosa, la amilosa y la amilopectina

En la amilosa, las unidades de glucosa estn unidas mediante una sucesin lineal de enlaces glucosdicos (1 4). Las longitudes de las cadenas de amilosa varan dentro de la misma muestra, pero se presenta ms de 1000 unidades de glucosa por molcula de amilosa.

Se ha determinado peso molecular que va desde 150 000 hasta 600 000. Las molculas largas de amilosa se enrollan para formar hlices parecidas parecidas a espirales, en las que se oculta una fraccin significante de los grupos OH, lejos del contacto con el agua. Por esto, la amilosa slo es ligeramente soluble en agua
Las molculas de amilopectina tienen enlaces glucosdicos tanto (1 4)como ( 1 6). Los enlaces ( 1 6) unen los extremos C-1 de las unidades lineales tipo amilosa a las posiciones C- 6 de las unidades de glucosa de otras cadenas largas de amilosa. Por cada 20 a 30 enlaces (1 4) existe un ( 1 6). Existen cientos de enlaces como stos por molcula, por lo que la amilopectina est excesivamente ramificada y las ramificaciones evitan cualquier enrollamiento del polmero. Esto hace que estn expuestos al agua mucho ms grupos OH que en la amilosa, por lo tanto, la amilopectina tiende a ser un poco ms soluble en agua que la amilosa.

Tanto la amilosa como la amilopectina no se disuelven bien en el agua. La solucin realmente es una dispersin coloidal porque produce el efecto Tyndall.

Los almidones naturales tiene aproximadamente de 10% a 20% de amilosa y de 80% a 90% de amilopectina. Ninguno es un carbohidrato reductor ni tampoco, da positiva las pruebas de Tollens, Benedict y Fehling. La nica prueba que d positiva el almidn se llama prueba del yodo y puede encontrar cantidades diminutas de almidn. Cuando se agrega una gota de yodo al almidn, aparece un color azul intenso al quedar atrapadas las molculas de yodo dentro de la vasta red de molculas de almidn. Si experimenta esta muestra hidrlisis se desbarata gradualmente por lo que el sistema pierde poco a poco su capacidad para dar positiva la prueba de yodo.

Los enlaces glucosdicos del almidn se hidrolizan fcilmente en presencia de cidos o de la enzima -amilasa, secretadas por las glndulas salivales y el pncreas. -amilasa hidroliza los enlaces (1 4) internos, originando maltosa, maltotriosa y -dextrina.

La maltosa consta de dos unidades de glucosa unidas por enlaces (1 4) y la maltotriosa consta de tres unidades unidas del mismo modo. La -dextrina est formada por varias glucosas unidas por enlaces (1 4) y enlaces ( 1 6). La maltosa y la maltotriosa son hidrolizadas a glucosa por la maltasa, mientras que la -dextrina se hidroliza a glucosa por la - dextrinasa. Las dextrinas se utiliza para fabricar muclagos y goma.
La malta contiene un enzima distinto, llamada -amilasa, que hidroliza el almidn hasta maltosa por eliminacin secuencial de fragmentos de disacrido, a partir de los extremos no reductores. La malta deriva de la cebada y otros cereales utilizados en la elaboracin de cerveza.

El hombre y muchos animales utilizan el almidn de las plantas como alimento. En la digestin se hidroliza el almidn y la glucosa que el cuerpo no puede utilizar inmediatamente se transforma en un polmero parecido a la amilopectina que se llama glucgeno.
Glucgeno, en esta forma, el organismo puede almacenar la energa qumica de las unidades de glucosa. Si se come lo suficiente para abastecer las reservas de glucgeno en varios tejidos, cualquier glucosa adicional se convierte en grasa( para satisfaccin de una enorme industria de control de peso). El glucgeno es un polmero muy grande, ramificado, de residuos de glucosa. La mayora de las unidades de glucosa del glucgeno estn unidas por enlaces (1 4) glucosdicos. Las ramificaciones se forman por enlaces (1 6) glucosdicos y aparecen en una de cada diez unidades de glucosa. Estas ramificaciones sirven para aumentar la solubilidad del glucgeno y hacer ms accesibles las unidades de azcar. Estas se liberan en muchos extremos no reductores de este carbohidrato de almacenamiento.

El peso molecular del glucgeno se halla en un intervalo de 300 000 a 100 000 000, lo cual corresponde a un intervalo de1 700 a 600 000 unidades de glucosa por molcula. El cuerpo humano almacena glucosa en forma de glucgeno principalmente en el hgado y en el tejido muscular. La mayor parte de la glucosa que produce una planta mediante la fotosntesis se destina a la produccin de celulosa y otras sustancias necesarias para construir las paredes celulares y fibras rgidas. Es decir cumple funciones estructurales y no nutritivas.
La celulosa es uno de los compuestos orgnicos ms abundantes de la biosfera. Cada ao, en la tierra, se sintetiza y degradan unos 10 kg de celulosa. La celulosa, al contrario del almidn o del glucgeno, tiene una estructura geomtrica que permite a sus molculas alinearse lado a lado, traslapndose, y torcerse para formar fibras. La diferencia geomtrica que permite a la celulosa formar fibras pero no amilosa es la orientacin del puente de oxgeno.

La celulosa es un polmero no ramificado de unidades de glucosa unidas por enlace (1 4), la configuracin permite a la celulosa formar cadenas muy largas y rectas muy parecidas a un cordn, por lo que es muy fcil para las molculas circundantes acomodarse una sobre otras donde los enlaces de hidrgeno entre molculas estabilizan los agregados. Las fibras de celulosa de resistencia considerable son posibles debido al enrollamiento de estos agregados, esto debido a que cada residuo de glucosa est girado con una rotacin de 180 respecto al residuo siguiente. Las diferentes consecuencias de las uniones y son importantes en biologa. La cadena recta formada por uniones es ptima para construir fibras con una elevada fuerza, tensil. Poe el contrario , la hlices abiertas formadas por uniones son muy adecuadas para integrar almacenes de azcares accesibles.

Los mamferos no tienen celulasa y por eso son incapaces de digerir la madera y las fibras vegetales.

Algunos rumiantes hospedan bacterias productoras de celulasa en su tubo digestivo y por eso digieren la celulosa. Los hongos y los protozoos tambin secretan celulasas. De hecho la digestin de la madera por las termitas depende de la presencia de protozoos en su tubo digestivo, en una asociacin mutuamente beneficiosa. Los puentes de hidrgeno en la celulosa de las telas de algodn, se hidrolizan cuando una pequea cantidad de catalizador cido est presente. La resistencia de una fibra de algodn, se debe en parte a las miles de enlaces de hidrgeno que se forman entre molculas de celulosa paralelas y traslapadas. El exoesqueleto de los insectos y crustceos contiene quitina, que consiste en residuos de N- acetilglucosamina unidos por enlaces (1 4). La quitina forma largas cadenas rectas que sirven de armazn estructural.

En la superficie celular y en la matriz extracelular de los animales est presente una clase diferente de polisacrido repetitivo.
Muchos glicosaminoglicanos estn constituidos por unidades repetitivas de un disacrido que contiene un derivado de aminoazcar, glucosamina o bien galactosamina. Por lo menos uno de los azcares del disacrido tiene un grupo carboxilato o sulfato cargado negativamente. Los principales glicosaminoglicanos son : hialuronato, condroitnsulfato, queratnsulfato, heparnsulfato, dermatnsulfato y heparina. La heparina se sintetiza como proteoglicano no sulfatado, que posteriormente se desacila y sulfata. La heparina libre acta como anticoagulante porque se une especficamente a la antitrombina lo cual acelera a que sta secuestre a la trombina. Los proteoglicanos son protenas que contienen una o ms cadenas de glicosaminoglicanos covalentemente unidas. El ms caracterizado de es el proteoglicano de la matriz extracelular del cartlago.

Las cadenas de glicosaminoglicano tambin sirve de punto de anclaje del factor de crecimiento de los fibroblastos y de otras protenas que estimulan la proliferacin celular.
CHOSO
H

Hh H COO H H H OSO HEPARINA

O
H OH H

NHSO H

Los proteoglucanos son partes esenciales de la matriz extracelular, el humor acuoso del ojo, las secreciones de las clulas que producen moco y el cartlago

Constituyen la mayor parte de la materia orgnica de la Tierra a causa de sus variadas funciones en todos los seres vivos. En primer lugar, los carbohidratos sirven como almacenes de energa, combustibles e intermediarios metablicos. El almidn de las plantas y el glucgeno de los animales son dos polisacridos que rpidamente pueden movilizarse para liberar glucosa, el combustible primordial para generar energa. El ATP, la unidad biolgica de energa libre, es un derivado de azcar fosforilado, como tambin lo son muchos coenzimas.

En segundo lugar, los azcares ribosa y desoxiribosa forman parte de la trama estructural del RNA y el DNA. La flexibilidad conformacional de los anillos de estos azcares es importante en el almacenamiento y expresin de la informacin gentica.

En tercer lugar, los polisacridos son los elementos estructurales de las paredes celulares de bacterias y plantas y del exoesqueleto de los artrpodos. De hecho, la celulosa, el principal componente de las paredes celulares de las plantas, es el compuesto orgnico ms abundante de la biosfera. En cuarto lugar, los carbohidratos estn unidos a muchas protenas y lpidos. As, por ejemplo, las unidades de azcar de la glicoforina, una protena intrnseca de membrana, confieren a los hemates una envoltura aninica altamente polar. Estudios recientes sugieren que las unidades de carbohidrato de la superficie de las clulas son participantes cruciales en el proceso de reconocimiento intercelular. Los carbohidratos han resultado ser molculas ricas en informacin, llenas de significado tanto en el desarrollo como en la reparacin de tejidos.

El grupo hidroxilo del carbono anomrico de un monosacrido puede reaccionar con un grupo OH o NH de otro compuesto para formar un enlace glucosdico. El enlace puede ser dependiendo de la posicin del tomo unido al carbono anomrico del azcar. Los enlaces N-glucosdicos se encuentran en los nuclesidos y nucletidos. Por ejemplo, en la adenosina del ATP, la base nitrogenada adenina est unida al azcar ribosa a travs de un enlace N- glucosdico. En cambio los enlaces O-glucosdicos, como los que se encuentran en la lactosa, une azcares entre ellos o une azcares al grupo hidroxilo de un aminocido en una protena.

Enlace N- glucosdico