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Dr H. GONSU KAMGA
Mdecin biologiste FMSB / CHU Yaound
OBJECTIFS
OBJECTIF GENERAL
Identifier les mycoplasmes les plus rencontrs en pathologie humaine Apprcier la pathognicit des mycoplasmes Matriser lidentification morphologique et biochimique des mycoplasmes
PLAN
INTRODUCTION I. PROPRIETES GENERALES II. HABITAT POUVOIR PATHOGENE III. CIRCONSTANCES DIAGNOSTQUES IV. DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE V. SENSIBILITE AUX ATB CONCLUSION
INTRODUCTION
INTRODUCTION
16 espces chez lhomme : colonisation des muqueuses
respiratoires et gnitales - Prsence ltat commensal - Infections aiges ,maladies chroniques - Immunodprims:bactries opportunistes
I. PROPPRIETES GENERALES
A. QUELQUES DATES
1898 Nocard et Roux:agent de la pleuropneumonie bovine(M.mycoides) 1937 Dienes et Edsall: pleuropneumoniae like organisms PPLO chez lhomme(M.hominis) 1954 Shepard : souche T(U.urealyticum)
I. PROPRIETES GENERALES
B. TAXONOMIE
- Ordre des Procaryotes - Classe des Mollicutes - Mollicutes pathognes pour lhomme - Ordre des Mycoplasmatales - Famille des Mycoplasmataceae - 2 genres: Mycoplasma et Ureaplasma
I. PROPRIETES GENERALES
C. MORPHOLOGIE - Pas de formes dfinies - Visible en fond noir ou contraste de phase: non colorable au Gram - Parfois mobiles(spiroplasme ou par glissement sur
support solide)
I. PROPRIETES GENERALES
D. STRUCTURE Absence de paroi (ni peptidoglycane,ni PLP)
uniquement une membrane plasmique - caractre flexible et petite taille(passage travers les filtres antibactriens de 0,45m)
-
Membrane
cytoplasmique
I. PROPRIETES
E. CULTURE ET METABOLISME 1. Caractres culturaux Mycoplasmes cultivables en milieu acellulaire ; mais exigences nutritionnelles complexes en facteurs de croissance, en cholestrol: srum,extrait de levure, tween 80 Aro-anarobies (certains anarobies strictes) Croissance lente 18h - 2 3 mois Colonies en uf sur le plat ou en tte dpingle Inhibition de croissance et du mtabolisme par Ac spcifiques
I. PROPRIETES
2. Proprits mtaboliques
Espces fermentantes par fermentation du glucose: M.pneunoniae,M.genitalium Espces non fermentantes par hydrolyse de Larginine : M.hominis Lure : Ureaplasma sp. Proprits dhmadsorption et dhmolyse: M.pneumoniae
HABITAT-PP
B. MECANISMES DU PP
Adhrence Production de mtabolites toxiques Pntration intracellulaire Interaction avec le systme immunitaire
III.CIRCONSTANCES DE Dg
B. INFECTIONS UROGENITALES
Cervicite Mg
Bartholinite Mh
Vaginose bactrienne = dsquilibre de la flore
III. CIRCONSTANCES DE Dg
B. INFECTIONS UG
4. Mycoplasmes et strilit U
Retentissement qualitatif sur la mobilit des spermatozodes
III.CIRCONSTANCES DE Dg
B. INFECTIONS UG 4. Mycoplasmes et strilit U Retentissement qualitatif sur la mobilit des spermatozodes 5. Infections au cours de la grossesse Mh, U. - chorioamniotites - fivres post-partum, post-abortum Mh+++ - avortements rptition? Prmaturit? hypotrophie?
III.CIRCONSTANCES DE Dg
C. INFECTIONS EXTRAGENITALES ET EXTRARESPIRATOIRES Souvent mconnues arthrites
infections invasives chez ID Mp,Mh, U surinfections de plaies sternales Mh
IV. Dg BIOLOGIQUE
A. INFECTIONS RESPIRATOIRES
1. Dg direct(2)
Recherche directe Dtection des antignes: peu sensible ,peu spcfique Recherche par PCR: cible gne de ladhsine P1
IV.Dg BIOLOGIQUE
A. INFECTIONS RESPIRATOIRES Culture (idem MUG) Milieux de culture complexes
- Base de peptone ou tryptone (protine, aa) - Extrait de levure(vitamines et facteurs de croissance) - Substrat mtabolique source dnergie(glucose,arginine,ure) - Srum (strols et cholestrol)
VI. Dg BIOLOGIQUE
A. INFECTIONS RESPIRATOIRES Culture (2) Milieux rendus slectifs par ajout dATB(P,Amp) Aucun milieu ne convient toutes les espces Croissance +ou- lente en 02j +++sem.; T 30c et 37c Atmosphre arobie ou anarobie enrichie en CO2.
VI. Dg BIOLOGIQUE
A. INFECTIONS PULMONAIRES Culture 3 Milieux de culture liquides ou gloss Milieux liquides: avec indicateur color(rouge de phnol) ph adapt 7,4-7,6 Mycoplasmes; 66,5Uraplasmes Milieux solides: sans substrat mtabolique,ni rouge de phnol. Typage PCR-RFLP m.e.e de 2 types :1+2
VI. Dg BIOLOGIQUE
A.INFECTIONS RESPIRATOIRES 2. Diagnostic srologique
Ac non spcifiques: agglutinines froides Ac spcifiques . FC . IFA . Agglutination de particules de latex . ELISA Diagnostic de certitude: PCR + prsence dIgM
VI. Dg BIOLOGIQUE
B. INFECTIONS UROGENITALES
Ureaplasma spp. M.hominis M.Genitalium Uniquement un diagnostic direct
VI. Dg BIOLOGIQUE
B. INFECTIONS UROGENITALES M.genitalium: Culture trs fastidieuse
Pas de srologie
VI. Dg BIOLOGIQUE
B. INFECTIONS UROGENITALES 1. Prlvements Prlvements urognitaux Chez m: couvillonage urtral, urine 1er jet, sperme, scrtions prostatiques Chez f: PCV,endomtre, trompe,liq.Douglas, liq.amniotique,placenta
VI. Dg BIOLOGIQUE
1. Prlvements(2) Nouveaux-ns Prlvement nasopharyng, gorge, endotrachal
Autres : en fonction du site de linfection Liquide synovial, biopsie articulaire , sang, LCR
VI. Dg BIOLOGIQUE
B. INFECTIONS UG 2. Culture: U.spp et M.h Milieux cf M.p Culture U.spp.
Milieu Ph milieu Temps Substrat Shepard 5,5 6 16 20h ure
M.h
Hayflick 7,0 7,2 24 48h arginine
VI. Dg BIOLOGIQUE
B. INFECTIONS UROGENITALES 2. Culture (2) Identification - Proprits mtaboliques en milieu liquide : Changement de couleur de lindicateur de pH
Ureaplasma spp. M.Hominis Jaune orang orang framboise
VI. Dg BIOLOGIQUE
B. INFECTIONS UROGENITALES 2. Culture(3) Identification - Aspect des colonies sur glose
Ureaplama spp. Petites colonies ponctiformes noires (MnSO4) en 24h M.hominis : aspect en uf sur le plat en 2 4j
VI. Dg BIOLOGIQUE
2. Culture (4)
Interprtation Prlvements
- Pvts normalement striles
- Homme Urtre et sperme Urine 1er jet
seuil
aucun isolement = infection
U > 104 UCC /ml U > 103 UCC /ml
VI. Dg BIOLOGIQUE
B. INFECTIONS UROGENITALES 2. Culture (5) Interprtation - Femme
Cervico-vaginal U aucun,non significatif Mh >104UCC / ml U > 103UCC / ml
- NN
Endotrachal
VI. Dg BIOLOGIQUE
B. INFECTIONS URO-GENITALES 2. Culture U et Mh Kits commercialiss pour:
- Identification - Numration - Sensibilit aux ATB bioMrieux, International Microbio, Bio-Rad, PBS Orgenics
A. Infections respiratoires
- Macrolides et apparents - Ttracyclines - Fluoroquinolones
B. Infections gnitales
- Attention l interprtation pour Mh et Uu - UNG doxycycline - Azythromycine
V. TRAITEMENT
C. Infections nonatales Macrolides D. Infections extragnitales, chez limmunodprim Association de plusieurs ATB : CC +D +FQ Traitement de limmuno suppression
CONCLUSION
Pb de standardisation des mthodes de diagnostic et dtude la sensibilit aux ATB Rsistances acquises peu connues et peu tudies Dure du traitement : fonction de la localisation et de la gravit Pb majeur: traiter ou pas les infections M.gnitaux?
sites striles : ok sites non striles (pcv,pvts respiratoiresNNs ) ???
JE NAI PAS DE PAROI MAIS JE SUIS AUSSI UNE BACTERIE FAITES ATTENTION A MOI!!!