CRITERIOS DE CALIDAD EN MICROBIOLOGIA

Pertinencia clnica Fiabilidad Reproducibilidad Eficiencia

PERTINENCIA CLINICA
Grado en que una prueba Microbiolgica contribuye a prevenir o curar enfermedades infecciosas. Una prueba de buena calidad es aquella que informa con precisin y aporta resultados tiles para prevenir o curar la infeccin

PERTINENCIA CLINICA
RECOMENDACIONES

El laboratorio clnico debe mantener una buena comunicacin con el paciente.

No es necesario aislar e identificar todos los tipos de microorganismos presentes en la muestra

FIABILIDAD
Se mide determinando si el resultado es correcto. Ejemplo:

1. - Identificacin de agentes patgenos 2. - Pruebas de sensibilidad de grmenes aislados a los antibiticos mediante el mtodo de los discos RECOMENDACIONES Usar terminologa uniforme para designar los microorganismos . Debe utilizarse siempre la nomenclatura reconocida internacionalmente. Es imprescindible el empleo de mtodos aprobados y uniformes .

REPRODUCIBILIDAD
La reproducibilidad o precisin de una prueba microbiologica se ve menoscabada por dos factores :

1. Falta de homogeneidad

2. Falta de estabilidad

Falta de homogeneidad
En una muestra nica puede haber ms de un microorganismo. En consecuencia , al repetir los cultivos pueden aislarse microorganismos diferentes

Falta de estabilidad:
A medida que el tiempo transcurre, los microorganismos presentes en un especimen se multiplican o mueren en lapsos de tiempo variables.

Por tanto, al repetirse los cultivos pueden aislar diferentes microorganismos

RECOMENDACIN: Las muestras se deben someter a l examen lo antes posible despus de recogerlas.

EFICIENCIA
La eficiencia de una prueba microbiolgica es la capacidad de sta para dar el diagnstico correcto de un agente patgeno o de un estado morboso. Se mide por dos criterios:

1. Sensibilidad 2.Especificidad

El agar Mac conkey tiene poca sensibilidad para aislar Salmonella typhi en las heces. Este importante agente patgeno intestinal pasa a menudo inadvertido a consecuencia de la proliferacin de bacterias intestinales no patgenas.

La tincin demuestras de esputo por la tcnica de Ziehl Neelsen es sumamente

especifica para el diagnstico de tuberculosis, ya que da muy pocos resultados

falsos positivos LA tincin de muestras de orina mediante la tcnica de Ziehl - Neelsen es mucho menos especifica porque da muchos resultados falsos positivos.

FASE PRE-ANALITICA
Solicitud del anlisis legible y con datos completos Toma de muestra adecuada, transporte y conservacion de la muestra adecuado

Control de calidad de discos, medios de medios de cultivo, reactivos y antisueros , sistemas de identificacin
Control de calidad de equipos Control de calidad del personal

SOLICITUD DEL ANALISIS

Nombres y apellidos completos, edad , sexo ,servicio, cama Antecedentes importantes Si es que el paciente ha recibido o no tratamiento antibiotico previo ( especificar cual) Finalidad del estudio Diagnostico Clnico (Es importante que en la solicitud figure si se sospecha de una infeccin intrahospitalaria o no) Tipo de muestra

La investigacin que se solicita

El responsable de la toma de muestra Fecha y hora de recoleccin de La muestra Firma y sello del mdico solicitante

LA CALIDAD DE LA MUESTRA MICROBIOLGICA

La efectividad de un laboratorio microbiolgico y el xito de los procedimientos dependen en gran medida del modo de obtencin, transporte (adecuado y rpido), y de la conservacin hasta el momento el procesamiento .

TOMA DE MUESTRA
La muestra clnica debe ser material del sitio infeccin real y debe recogerse con un mnimo de contaminacin a partir de tejidos, rganos o secreciones adyacentes. Debe establecerse el momento ptimo para la recoleccin de muestras Debe obtenerse una cantidad suficiente de la muestra para efectuar las tcnicas de cultivo solicitadas. Deben usarse dispositivos de recoleccin y envases adecuados Toda vez que sea posible, deben obtenerse muestras antes de la administracin de antibiticos. El envase con la muestra debe rotularse de forma correcta

CRITERIOS PARA RECHAZAR UNA MUESTRA

Debe controlarse cada hoja de pedido y etiqueta de la muestra para ver si se ha Antes de rechazar una muestra debido a una informacin inapropiada o incompleta, se debe establecer contacto con la persona responsable para efectuar las correcciones necesarias para as poder completar la informacin No indicar tipo de muestra o procedencia en la orden No indicar tipo de examen en la orden Demora en el envo al laboratorio Medio de transporte inadecuado Muestra sin rotular o mal rotulada Muestra que tenga evidencias de haberse derramado Es importante el examen microscpico del material clnico, ya que permite conocer no slo la calidad de la muestra, sino tambin la presencia de microorganismos, lo que proporciona suficiente informacin para un diagnstico presuntivo inmediato incluido toda la informacin esencial

CONTROL DE CALIDAD -MEDIOS DE CULTIVO

Cada partida de medio de cultivo preparado en el laboratorio u obtenido comercialmente, debe ser controlado en el laboratorio para lo cual es necesario realizar:

1. Control de Esterilidad 2. Control de las propiedades de los medios de cultivo 3. Control del ph 4. Control de la fecha de expiracin

Procedimiento de control de esterilidad Una parte proporcional de cada lote de fabricacin (5%), se aparta para efectuar un control de esterilidad, que consiste en comprobar la ausencia de crecimiento despus de dos das de incubacin a 35C y 5 dias a temperatura ambiente para descartar hongos

Interpretacin: Si no hay crecimiento en el grupo control, se mantiene el resto del lote en el refrigerador hasta su utilizacin (suponiendo que pase el segundo control).

Procedimiento del control de pH: El pH de cada medio debe comprobarse con un pH metro despus que se ha dejado que el medio se enfri a temperatura ambiente. El pH no puede determinarse con fiabilidad mientras el medio est caliente. Procedimiento de caducidad: En el momento de emplacar los agares es preciso rotular de forma visible sobre cada placa, el nombre del medio de cultivo y la fecha de su preparacin. De esta manera ser fcil en todo momento identificarlo y reconocer el tiempo de caducidad. Existen tablas donde se seala la caducidad de los medios preparados.

CONTROL DE CALIDAD -REACTIVOS PARA COLORACIONES

Procedimiento de control: Se preparan portas de microscopio con una gota de una suspensin que contenga organismos Gram positivos y Gram negativos

mezclados en diferentes proporciones. Una vez seco, estos portas de microscopio pueden almacenarse para su empleo posterior como controles de la tincin Gram.

FASE ANALITICA
Es necesario que en todo laboratorio de microbiologia exista un manual de Es importante el examen microscopico del material clnico, ya que permite conocer no slo la calidad de la muestra, sino tambin la presencia de microorganismos, lo que proporciona suficiente informacin para un diagnstico presuntivo inmediato.

Procedimientos

FASE ANALITICA-HEMOCULTIVOS
Procedimiento de control: Realizar subcultivos y Tincin de Gram Frecuencia: Cada vez que se realiza el subcultivo Interpretacin: Si en la tincin Gram se observan bacterias y no se desarrollan en el cultivo se debe pensar en anaerobios o en bacterias fastidiosas. Procedimiento de control: Revisin de resultados obtenidos simultaneamente.

Frecuencia:Mensualmente
Interpretacin : Si aparecen con frecuencia Staphylococcus coagulasa negativa se debe pensar en contaminacin en la toma de muestra.

FASE ANALITICA-UROCULTIVOS
Procedimiento de control: Gram de orina no centrifugada Frecuencia: Cada vez que se realice Interpretacin : La presencia de uno o varios elementos bacterianos por campo examinado por inmersin suele indicar que la muestra contiene 105 o mas bacterias por mililitro.

La presencia de uno o varios leucocitos por campo es un indicio ms de infeccin urinaria. En las mujeres la presencia de muchas celulas epiteliales escamosas , mezcladas o no con bacterias , es un fuerte indicio presuntivo de que la muestra est contaminada por flora vaginal y obligar a examinar otra muestra. Debe existir concordancia entre el gram y el cultivo. Un gram que muestra indicios de infeccin urinaria con cultivo negativo puede deberse a procesamiento de diferentes muestras o tambin puede ocurrir si el paciente est en tratamiento antimicrobiano antes de la toma de muestra

FASE ANALITICA- ESPUTO

Procedimiento de control: Se clasifica a la muestra basada en la presencia de leucocitos y clulas epiteliales utilizando el Sistema de clasificacin en grados de Murray o el Sistema de clasificacin en grados de Barlett para evaluar la calidad de la muestra de esputo. Frecuencia: Cada vez que se realice Interpretacin: Segn el sistema de Barlett un puntaje

final de 0 o menos indica ausencia de respuesta inflamatoria o presencia de una contaminacin salival significativa, lo cual invalida la muestra
Segn el sistema de Murray el gran nmero de clulas epiteliales en los grupos 1 a 4 indica contaminacin con secreciones orofaringeas e invalida la muestra. Solo las muestras del grupo 5 se considera de importancia clnica.

FASE ANALITICA-ANTIBIOGRAMAS
VARIABLES A CONTROLAR Inoculo Caractersticas del medio de cultivo

Agente antimicrobiano
Incubacin Interpretacin del tamao de la zona de inhibicin

Control de calidad de sensidiscos

FASE POST-ANALITICA
Al emitir un informe es importante que se tenga en cuenta la poblacin de Debe utilizarse siempre la nomenclatura reconocida internacionalmente. Todos resultados deben ser revisados por el encargado del rea antes de ser entregados. Debe evaluarse el porcentaje de exmenes discordantes con la clnica Debe evaluarse el porcentaje de error de transcripcin al informe Debe evaluarse la oportunidad

microorganismos que residen normalmente en el cuerpo humano

Solicitud de laboratorio

Nombre completo, edad, sexo, fecha y hora de la recoleccin de la muestra

Estado de nutricin, Procedencia geogrfica del enfermo Ingesta de bario, bismuto o antiparasitarios

Diagnstico clnico
Resultados de otros exmenes de laboratorio PREPARACION DEL PACIENTE Usar impresos que detallen todas las instrucciones necesarias para la recoleccin de la muestra Restringir por tres das que anteceden al examen coprolgico los alimentos que dejan Demasiado residuo .

RECOLECCION DE LA MUESTRA Tipo de reciente empleado Calidad de la muestra

Cantidad de muestra
Nmero de muestras que se estudian Intervalo de das entre las muestras

CONTROL DE CALIDAD EN LA RECOLECCIN DE LA MUESTRA

Relacin fijador /muestra Frecuencia: mensual Procedimiento:

Porcentaje de muestras escasas

Porcentaje de muestras excesivas Homogenizacin de la m. fijadas Frecuencia: mensual

Procedimiento:
Evaluar en cruces (+/++/+++) la consistencia de la muestra

Toma de muestra de Test de Graham Frecuencia : Mensual Procedimiento:

Porcentaje de las muestras rechazadas

Instrucciones para recoleccin de muestras Frecuencia : trimestral Procedimiento:

Solicitar que un porcentaje de los pacientes repita verbalmente las instrucciones

CONTROL DE CALIDAD DE EQUIPOS Y REACTIVOS

Control de calidad de los equipos utilizados por ejemplo los microscopios , centrifugas ,etc. Es necesario graduar los microscopios utilizando micrometros de platina y oculares. Control de reactivos: -Densidad del sulfato de zinc (Mtodo de Flotacin) Frecuencia : al prepararlo y antes del uso utilizando un densitmetro-Colorantes Frecuencia: al prepararlo usando un control biolgicos -Fijadores :

Frecuencia: antes de su empleo en muestras clnicas.

Procedimiento: 1. Obtener sangre fresca con anticoagulante, centrifugar y separar la capa de leucocitos, la que debe tener un recuento alto.

2. Mezclar 2 gramos de muestra de deposicin fresca, que no contenga elementos parasitarios, con varias gotas de los leucocitos obtenidos anteriormente.
3. Agregar 10 ml del fijador a controlar a la mezcla preparada y dejar actuar durante 30 minutos. Preparar varios frotis. 4. Realizar las tinciones habituales. 5. Si despus de la tincin de leucocitos aparecen con su morfologa tpica se podra asumir una buena fijacin de los elementos parasitarios. 6. Para una fijacin adecuada es importante respetar el tiempo limite recomendado entre la eliminacin de la muestra y la fijacin.

Examen coproparasitologico macroscopico En muestras no preservadas se recomienda examinarse la consistencia , presencia de moco , sangre y parsitos macroscopicos. Examen coproparasitologico microscopico

Cualitativos: se emplea para detectar formas parasitarias. (examen directo y concentrado)

Cuantitativos: reportan el nmero de formas parasitarias que se encuentran y sobretodo se utiliza en helmintiasis

MTODO DIRECTO
Permite encontrar la mayora de los parsitos(quistes , huevos y larvas ) y estudiar los caracteres de movilidad de las formas vegetativas de los protozoarios Desventaja : la muestra es tan pequea que es poco representativa Si se tiene heces de consistencia acuosa y muco sanguinolentas se debe examinar las heces sin diluir

Si se tiene heces de consistencia dura se debe diluir en suero fisiolgico

CONTROL DE LOS PREPARADOS ENTRE LAMINAS Y LAMINILLAS

Porcentaje de muestras diluidas o concentradas por observacin microscopica. Distribucin similar de los elementos parasitarios en las preparaciones repetidas. CONTROL DE LA OBSERVACION MICROSCOPICA Mtodo estadstico: Analiza solo positivos mensuales Mtodo de la muestra por azar Preparaciones dobles entre porta y cubreobjeto de

una misma muestra, con diferentes nmeros correlativos

Mtodo de incorporacin de muestras de referencia: Incorpora a la rutina preparaciones del material de referencia

PREPARACIN DE MATERIAL DE CONTROL

1. Seleccionar al paciente

2. Recoleccin de la muestra:

- La deposicin del paciente seleccionado es recogida en un recipiente limpio y seco

- Con bajalenguas de madera pasar toda la deposicin en el frasco plstico (capacidad aproximada 600ml) que tiene el fijador PAF 3. Procesamiento de la muestra:

Resuspender la emulsin fecal con una paleta de madera agregando fijador si la emulsin es muy espesa.
Tamizarla emulsin a travs de una malla metalica que cubra la boca del recipiente de vidrio utilizado 4. Distribucin de la muestra Introducir una barra de Iman dentro del recipiente de vidrio que contiene la muestra y colocar este sobre el agitador Con una pipeta automtica colocar un ml de la suspensin en viales

5.Control de calidad interno (homogeneidad) Cada 10 viales se hace un control de la suspensin del material de control. 6. Se enva este material del control preparado al comit de expertos en el diagnsticos de enteroparsitos. Cada profesional anota los elementos encontrados

7. El material de control preparado puede ser positivo o negativo, mono o poliparasitado.

8. Las muestras de evaluacin deben procesarse y observarse como una muestra de paciente. Criterios de evaluacin: 9. Criterios de evaluacin. Se calcula el puntaje obtenido por muestra de control N de diag. correctos x 100 ------------------------------------------------------------------------------------------N de diag. (C. expertos)+ N diag. Incorrectos

Si se envan dos muestras se deben sumar los puntajes obtenidos por cada una de
las muestras y se divide entre dos.

10. Procesamiento de los datos Los resultados informados por cada laboratorio participante se comparan con los elementos identificados en el material de control por el Comit de expertos. Son elementos parasitarios exigidos aquellos que por encontrarse en cantidad adecuada han sido identificados por todos los expertos. Los elementos parasitarios que se encuentran en escasa cantidad y que son diagnosticados por algunos de los expertos son informados pero no influye en el puntaje final. 11. Criterios de aceptabilidad : El puntaje mnimo de aceptabilidad con este mtodo corresponde a un 75% y el mximo a un 100%

CODIGOS DE LOS ELEMENTOS PARASITARIOS Cdigo Elemento parasitario 12 Quites de Girdias lamblia 15 Trofozotos de Entamoeba histolytica 16 Quistes de Entamoeba histolytica 17 Trofozotos de Entamoeba coli 18 Quistes de Entamoeba coli 23 Formas vacuoladas de Blastocystis hominis 27 Cristales de Charcot-Leyden

CONTROL DE CALIDAD DE LA CALIDAD DEL REPORTE

Se recomienda tener en el laboratorio y en el lugar de transcripcin una lista de los

protozoos y helmintos con las formas evolutivas que se pueden encontrar.

El informe debe incluir datos del paciente fecha, mtodo utilizado, nmero de muestras. Siempre se debe indicar la forma evolutiva ( huevos, quiste, etc.) y el nombre cientifico correctamente escrito.

Se recomienda no clasificar la especies encontradas en parasitos y comensales.