Diferenciacin Celular

Conversin de Unidades
1 m = 1000 mm (milmetros) 1 mm = 1000 m (micrmetros) 1 m = 1000 nm (nanmetros) 1 mm = 0,001 m 1 m = 0.001 mm 1 nm = 0,001 m

Niveles de organizacin de la materia viva

Partculas Subatmicas tomos Molculas Clulas Tejidos rganos Aparatos y Sistemas Organismo Pluricelular

Niveles de organizacin de la materia viva

Morfologa microscpica

Histologa

Morfologa macroscpica y mesoscpica

Anatoma

Tejidos
Estn formados por:

Clulas Sustancia Intercelular

Tejidos: agrupaciones de clulas, generalmente de un mismo tipo, que poseen una sustancia intercelular entre ellas, que las relaciona.

Diferenciacin Celular

Las clulas altamente diferenciadas generalmente

sintetizan una gran cantidad de una o slo unas pocas protenas.

queratina en las clulas epidrmicas.

hemoglobina en los glbulos rojos. tripsina en las clulas acinares del pncreas.

Diferenciacin Celular

Ello llev a pensar que la diferenciacin celular

consistira en la amplificacin de secuencias particulares de ADN que codifican para tales protenas (genes).

Dado que todas las clulas de una misma especie

poseen la misma cantidad de ADN, el aumento de copias de un determinado gen debera implicar que otros se pierden.

Diferenciacin Celular

As las clulas epidrmicas podran haber perdido los genes que codifican para hemoglobina, tripsina, etc. y haber aumentado el nmero de copias de los genes que codifican para queratina.
La prdida de genes durante el proceso de diferenciacin tambin se pens que podra explicar el hecho de que la diferenciacin celular es casi siempre, un fenmeno irreversible.

Diferenciacin Celular

Esta era la concepcin prevalente durante la dcada del

50.

Durante los aos 60 Gurdon realiz una serie de experimentos que cambi fundamentalmente el concepto de diferenciacin celular.

Una primera serie de experimentos se realiz transplantando ncleos a ovocitos de anfibios.

Diferenciacin Celular

Estas clulas son suficientemente grandes para inyectarles un ncleo de otra clula.
Ovocitos de rana no fertilizados son sometidos a luz ultravioleta, lo cual produce la destruccin del ncleo, dando como resultado ovocitos enucleados (sin ncleo). A partir de renacuajos de la misma especie se separan ncleos de clulas somticas diferenciadas, tales como clulas epiteliales de la epidermis, del intestino o de clulas nerviosas.

Diferenciacin Celular

Cada uno de estos ncleos es inyectados individualmente a ovocitos enucleados.

El transplante de un ncleo somtico (diploide) al ovocito enucleado gatilla el mismo proceso que el de la fecundacin de un ovocito normal por un espermatozoide: la obtencin, a travs de un proceso normal de desarrollo de una rana adulta normal y frtil.

Es decir, el ncleo de una clula diferenciada contiene toda la informacin gentica necesaria para originar un nuevo individuo.

Experimento de Gurdon

Diferenciacin Celular

Durante la diferenciacin celular el genoma permanece

constante, sin que haya prdida de informacin gentica fundamental.

Todas las clulas de un organismo multicelular poseen el mismo ADN, ms precisamente, las mismas

secuencias de ADN (genes).

Diferenciacin Celular

Dado que un mismo ncleo puede "expresar" genes

diferentes segn el citoplasma que lo rodea se puede inferir que en el citoplasma existen factores que influyen en la expresin gnica y por lo tanto en la diferenciacin celular.

Diferenciacin Celular

Recientemente, se ha logrado reproducir el experimento

de Gurdon en una especie mamfera. La oveja "Dolly" es el resultado del transplante de un ncleo de una clula

somtica de un animal adulto (clula de la glndula

mamaria) en el citoplasma de un ovocito enucleado, obtenindose por primera vez un "clon" viable de un mamfero adulto.

Diferenciacin y sntesis de protenas

En un organismo multicelular, los diferentes tipos celulares sintetizan y almacenan protenas diferentes.
Cun extensas deben ser las diferencias entre las protenas de dos tipos celulares de tal manera que uno termine siendo una clula muscular estriada y el otro una neurona? No hay an una respuesta para esta pregunta.

Todas las clulas de un mismo organismo producen un cierto nmero de protenas que le son comunes y que podran considerarse como protenas de "utilera.

Diferenciacin y sntesis de protenas

Citoesqueleto
Histonas de la cromatina Protenas ribosomales

Conforman la lmina del ncleo

Conforman las membranas del RER y el aparato de Golgi Cadena respiratoria de las crestas mitocondriales Enzimas que son claves en el metabolismo celular.

Diferenciacin y sntesis de protenas

Existen por otro lado, protenas excepcionales que slo

son sintetizadas en uno o unos pocos tipos celulares (Hemoglobina slo est en los eritrocitos)

estando presente en varios tipos celulares, slo en uno de ellos se sintetizan en cantidades excepcionalmente

grandes, como la miosina en la clula muscular

estriada.

Diferenciacin y sntesis de protenas

El anlisis del nmero de secuencias diferentes del mARN sugiere que una clula eucaritica superior sintetiza entre 10.000 y 20.000 protenas diferentes. De stas slo unas 2.000 estn en cantidades suficientes (ms de 50.000 copias) como para ser detectadas.
La mayora de estas 2.000 protenas parecen ser comunes a todos los tipos celulares de un mismo organismo.

Diferenciacin y sntesis de protenas

Lo cual sugiere que un nmero relativamente bajo de protenas diferentes o especiales debe ser suficiente para crear diferencias muy grandes en la conducta celular.
Si las clulas se diferencian entre s por las protenas que producen, pero todas ellas poseen el mismo genoma, se puede concluir que los distintos tipos celulares se diferencian porque expresan genes diferentes.

Diferenciacin celular y expresin gnica

En eucariontes la va que va desde el ADN a la protena involucra las siguientes etapas:

Transcripcin de ADN a hnARN; Procesamiento del hnARN (ARN nuclear heterogneo) a mARN; Transporte del mARN del ncleo al citoplasma; Traduccin del mARN a protena; Degradacin del mARN.

Diferenciacin celular y expresin gnica

Dado que las clulas se diferencian unas de otras por las protenas que sintetizan, 20 el proceso de diferenciacin podra involucrar a una, ms de una, o a las cinco etapas que median entre el ADN y la protena finalmente sintetizada.

Control de la diferenciacin a nivel de la transcripcin

Esta protena se une especficamente a una determinada secuencia de 21 pares de bases del ADN. A esta regin del ADN se la llama operador y se superpone parcialmente a una regin ms larga del ADN, que es el sitio de unin de la enzima ARN polimerasa. A esta ltima regin del ADN se la conoce como promotor.

Control de la diferenciacin a nivel de la transcripcin

Si la protena represora no est presente, el promotor

puede unir la ARN polimerasa y se transcribe el mARN correspondiente, el cual, a su vez, se traduce en

protenas (enzimas) que degradan lactosa.

Control de la diferenciacin a nivel de la transcripcin

La lactosa, a su vez, tiene afinidad por la protena represora del gen.

En presencia de lactosa, la protena represora no se une al operador y por lo tanto se produce una activacin de la expresin del gen que codifica para galactosida-sa.

Control de la diferenciacin a nivel de la transcripcin

Al disminuir el contenido intracelular de lactosa, la protena represora queda libre de lactosa y entonces puede unirse al operador.
Esto, a su vez, impide la unin de ARN polimerasa, bloqueando as la activacin del gen y su correspondiente transcripcin y traduccin. Como resultado de ello decrece la concentracin de la enzima degradadora de lactosa y ello resulta en un aumento de lactosa.

Control de la diferenciacin a nivel de la transcripcin

Al aumentar la lactosa se une a la protena represora dejando el promotor libre y posibilitando que se active el gen nuevamente. Este tipo de control gnico es llamado regulacin negativa. Existe otro tipo de control conocido como regulacin positiva. En ella es necesaria la unin de una protena especfica (protena activadora) al operador para que la ARN polimerasa se pueda unir al promotor. En este caso la secuencia de pares de nucletidos del operador no se superpone a la del promotor.

Control de la diferenciacin a nivel de la transcripcin

En clulas eucariontes de organismos superiores slo

alrededor del 7% de los genes son transcritos a ARN.

Parece altamente improbable que el 93% de los genes restantes estn reprimidos por protenas represoras especficas, pues se requeriran miles de ellas.

El juego de genes que se transcriben (7%) es propio de cada tipo celular y determina el proceso de diferenciacin.

Control de la diferenciacin a nivel de la transcripcin

La seleccin de los genes que se transcribirn en cada

clula es progresiva y se realiza durante el proceso de desarrollo (embriolgico) de los organismos

multicelulares.

Una vez que dicho juego de genes ha sido finalmente seleccionado, queda como un rasgo estable que adems se transmite de una generacin a otra de dicho tipo celular.

Probables mecanismos de expresin gnica

Un primer grado de mayor complejidad, respecto del modelo de represin o activacin por una protena represora o activadora, es la existencia de protenas reguladoras que pueden activar un gen y reprimir otro.

Probables mecanismos de expresin gnica

Esto es posible porque a lo largo del genoma existen dos sitios de unin para esta protena reguladora (dos operadores idnticos).
uno de los operadores se superpone al promotor (gen reprimido).

Probables mecanismos de expresin gnica

Otro operador est desplazado y no se superpone al promotor, en este gen la protena acta como activadora.
Existen evidencias de que hay protenas que pueden regular la expresin de varios genes.

Probables mecanismos de expresin gnica

A estas protenas se las

ha llamado protenas reguladoras maestras.

En este caso existen en

el genoma varios sitios de unin para esta

protena maestra (varios

operadores).

Probables mecanismos de expresin gnica

A estas protenas se las

ha llamado protenas reguladoras maestras.

En este caso existen en

el genoma varios sitios de unin para esta

protena maestra (varios

operadores).

Probables mecanismos de expresin gnica

Dependiendo de la ubicacin del operador respecto del promotor la protena maestra activa o reprime los genes.
La prot. maestra por ser una protena, resulta de la activacin del gen que la codifica.

Probables mecanismos de expresin gnica

Si existe una protena

que regula al gen de la protena maestra, dicha

protena regular a la
protena maestra, y con ello a todos los genes

regulados
ltima.

por

esta

Probables mecanismos de expresin gnica

La existencia de unas pocas protenas reguladoras

maestras y la posibilidad de que las mismas estn combinadas de maneras diferentes a travs de las divisiones celulares sucesivas, permite que se vayan diferenciando un alto nmero de tipos celulares

diferentes.

Diferenciacin celular y procesamiento del ARN

Alrededor del 7% de los genes son transcritos a RNA nuclear.

El mRNA que se encuentra en el citoplasma representa slo el 1% al 2% de los genes. Ello indica que no todo el ARN que se transcribe a partir del DNA llega a ser mARN. El producto de la transcripcin del gen por la participacin de la RNA polimerasa II se lo conoce como RNA nuclear heterogneo (hnARN) o transcritos de ARNo ARN precursor.

Diferenciacin celular y procesamiento del ARN

Estos precursores sufren un procesamiento de tal manera que regiones completas de su secuencia son removidas y los extremos de las porciones restantes vueltas a sellar (splicing).
Ello da como resultado una molcula de ARN ms corta (hasta 20 veces ms corta) y que es la que saldr al citoplasma como mARN.

Las regiones eliminadas del RNA precursor se conocen como intrones.

Diferenciacin celular y procesamiento del ARN

Un mismo ARN precursor puede ser procesado de dos o ms maneras, lo cual determinar un mARN diferente en cada caso, y consecuentemente una protena diferente.
El mismo gen puede traducirse finalmente en protenas diferentes segn sea el procesamiento del ARN precursor.

Esta es una importante forma de regular el mecanismo de la diferenciacin celular.

FIN