INTRODUCCIN A LA BIOLOGA MOLECULAR

Tema 1

Origen

Neoltico (ao tecnolgico:

7000

A.C.)

cambio

Aparicin de tiles de piedra pulimentada

Sedentarismo de la poblacin estabilidad

Revolucin Neoltica se enfatiza la produccin de subsistencia Domesticacin de plantas y animales Desarrollo de la agricultura como modo de produccin Desarrollo de la ganadera

Origen

Las civilizaciones Sumria y Babilonia (6000 aos A.C.), conocan como elaborar la cerveza. Labor realizada por las mujeres Los egipcios (4000 aos A.C.) saban como elaborar pan a partir del trigo.

Cultivo de cereales en inmediaciones del ro Nilo

las

Se conoca de los procesos de fermentacin antes de la escritura del libro del Gnesis

Segn la Biblia, No sufri los efectos de la fermentacin espontnea del mosto de la uva

Origen

Fabricacin de queso: 3000 aos A.C. en el Oriente Medio, y de otros alimentos como el yogurt y la soya Cultivo de championes Produccin de bebidas fermentadas Tratamiento de aguas residuales

Historia de la Biotecnologa en nuestra era

S. XIII, se elabora el whisky en Irlanda S. XIV, se emplean cadveres afectados por la peste bubnica S. XV, se insemina, sin xito, a la Reina Doa Juana de Portugal con esperma del Rey Enrique IV S. XVII, se observan y describen los microorganismos S. XVIII, se vacuna con microorganismos vivos

Hooke (1665) descubrimiento de las clulas en un pedazo de corteza

Anton Van Leeuwenhoek (1675) construccin de microscpio con amplificacin de 270X

Louis Pasteur (1857-1876) los microorganimos y el proceso de la fermentacin

final del S.XIX Industrias para la produccin de etanol, cido actico, butanol y acetona, a travs de fermentaciones al aire libre en condiciones no estriles
Al

Continuando con el S. XIX

Se desecha la hiptesis de la generacin espontnea Se proponen las bases de la herencia Se patenta una levadura libre de grmenes de enfermedad como artculo de manufactura Se describen los virus filtrables Se describe que algunos microorganismos son causantes de enfermedades

La era de oro de la Bacteriologa

Mejoras en la microscopia Desarrollo de tcnicas de esterilizacin, pasteurizacin y asepsia Desarrollo de tcnicas de cultivo de cepas Investigaciones sobre metabolismo de bacterias

Aerbicas anaerbicas

Avances en la Gentica

Estudios de Gregor Mendel sobre herencia de caracteres

Leyes

Mendelianas

Thomas Morgan e identificacin de estructuras portadoras de genes

Caracteres

ligados

A comienzos del S.XX 1911-1920. Nace la microbiologa industrial: los alemanes producen glicerol con Saccharomyces y los ingleses acetona con Clostridium. Se emplea la cristalografa de rayos X 1921-1930. Se describe el principio transformante en bacterias. Se describe la composicin de la nuclena. Se descubren los antibiticos. Se purifica y produce una hormona

En la dcada de 1940

Fabricacin de la Penicilina en la II Guerra Mundial Transformacin de esteroides y de cultivo de clulas animales para la produccin de vacunas antivirales 1931-1940. Se emplea la cristalografa de rayos X para determinar la estructura de molculas complejas. Se introduce la electroforesis de protenas.

S. XX (1941-1950)

George Beadle y Edward Tatum establecen la teora: Un gen una enzima Se descubre que el principio transformante es el ADN Se establece la equivalencia purina-pirimidina en ADN Se produce penicilina industrialmente Se introduce el trmino Ingeniera Bioqumica

S. XX (1951- 1960)

Se propone la estructura alfa hlice y beta plegada de las protenas. Se secuencia la primera protena Se propone la estructura doble hlice del ADN. Se descubre la ADN polimerasa Se plantea el dogma central de la Biologa Se emplea satisfactoriamente la tcnica de transferencia nuclear en anfibios

S. XX (1961-1970)

Se realiza una hibridacin de cidos nucleicos Se asla un ARN Se asla, purifica y caracteriza una enzima de restriccin y de una retrotranscriptasa Se sientan las bases del cdigo gentico Se publica el primer algoritmo para la comparacin de secuencias genticas

En los aos 70

Tcnicas y herramientas que permiten manipular y modificar el ADN Ingeniera gentica o tecnologa del ADN recombinante Propagacin de plsmidos en Escherichia coli

En los aos 70

Hamilton Smith y Daniel Nathans creacin del primer microorganismo que recombinaba partes de su ADN Tcnica de PCR

Proyecto Genoma Humano Secuencia completa del genoma humano y de otros organismos modelos Diagnstico, terapia de enfermedades, biotecnologas, entre otros. Se descubren los oncogenes La secuenciacin de genomas de plantas y animales mejora agronmica y ganadera La Bioinformtica

S. XX y XXI (1981-2005)

Kits para Biologa Molecular Secuenciacin a gran escala de ADN y protenas, chips de ADN Windows, PC, Blast, Phylip, NCBI Biocarburantes, biorremediacin Nanotecnologa

S. XX y XXI (1981-2005)

Animales y plantas transgnicos, animales clnicos, clulas madres SIDA, Alzheimer, Parkinson, SARS, vacas locas, bioterrorismo Anticuerpos, antibiticos, anticancergenos, terapia gnica

Introduccin

En 1953, con el descubrimiento de la estructura del ADN, nace la poca de la Biologa molecular. Permite entender cmo la clula viva utiliza su informacin gentica para producir protenas y cmo cada una de estas protenas, llevan a cabo las funciones que permiten la vida.

Introduccin

A partir de 1970,, el conocimiento de cmo funciona la clula, permiti la aparicin y sofisticacin de tcnicas que hicieron posible la manipulacin de la informacin gentica.

Manipulaci n gentica

Ingeniera gentica

Introduccin

Las tcnicas genticas han permitido utilizar el conocimiento que se tiene sobre los genes y aplicarlo en la construccin de organismos transgnicos. Un organismo transgnico, es aquel que lleva uno o varios genes de diferentes origen a los suyos.

Introduccin

El uso de tcnicas de ingeniera gentica ha permitido el avance del conocimiento de la organizacin de los genes en los cromosomas y de cmo se regulan.

Usos y aplicaciones Aplicaciones teraputicas:

Productos farmacuticos: antibiticos, vacunas, hormonas, terapias gnicas

Protenas

para uso

medicinal Eritropoietina (EPO) Insulina humana Activador del plasmingeno tisular (TPA)

Protena TPA y su uso farmacutico. Previene la coagulacin sangunea. De gran utilidad para pacientes que sufren de coagulacin en el cerebro y el corazn

En la actividad agrcola y ganadera:

Mejoramiento

de especies de plantas Animales clonados que expresan genes de uso benfico

Alimentacin
Mejora de los procesos tradicionales en la obtencin de alimentos y bebidas Produccin de alimentos con mayor calidad nutricional, para la mejora de la salud Produccin de aditivos alimentarios

Medio ambiente
Tratamiento de residuos urbanos, agrcolas e industriales Bioremedio y Bioreparacin Produccin de energa a partir de biomasa

Preocupacin pblica con la Biotecnologa

En 1970, los investigadores mostraron preocupacin al trabajar con ADN recombinante y cepas bacterianas

Se tomaron precauciones necesarias para prevenir liberacin accidental de organismos recombinantes

Con la expansin de plantas genticamente modificadas, surgieron nuevos temores

Interferencia artificial en la naturaleza Alimentos alterados genticamente no son seguros para la ingestin Escape de transgenes para otras especies

Tanto los lmites hasta donde la ciencia debe avanzar- que hoy aparecen borrosos y cuestionados-, como la equidad de los beneficios que el desarrollo biotecnolgico reporte Si tales innovaciones concretan una real y autntica mejora en la calidad de vida, as como la asignacin de derechos y designacin de los titulares de esos derechos Son todas cuestiones que conmueven la base misma del ser humano individual y social, y no puede entenderse sin un debate profundo de los aspectos ticos involucrados Teodora Zamudio

Bioenergtica

La energa es un tema en la bioqumica: las clulas y organismos dependen de un suministro constante de energa. Los organismos vivos no se encuentran nunca en equilibrio con su entorno. La composicin molecular es reflejo de un estado estacionario dinmico. Los organismos vivos transforman energa y materia de su entorno.

Bioenergtica

1.

2.

Los organismos vivos emplean dos estrategias para extraer energa de su entorno: Captan combustibles qumicos del entorno. Absorben energa de la luz solar. La bioenergtica es el estudio cuantitativo de la transferencia y utilizacin de la energa en los sistemas biolgicos.

Bioenergtica

En cualquier proceso fsico o qumico la cantidad de energa total del universo permanece constante, aunque su forma puede variar. En un proceso biolgico, las clulas son consumados transductores de energa, capaces de interconvertir energa qumica, electromagntica, mecnica y osmtica con gran eficacia.

Bioenergtica

La cuestin central en bioenergtica es de qu manera la energa obtenida del metabolismo de los combustibles o captada por la luz se acopla a la energa requerida por las reacciones. La cantidad de energa realmente transformable en trabajo se denomina energa libre (G).

Bioenergtica

La energa libre (G), predice si una reaccin es factible o no.

Acoplamiento de reacciones biolgicas

Las reacciones qumicas tambin se pueden acoplar y una reaccin que libera energa empuja a otra reaccin que requiere.

Acoplamiento de reacciones biolgicas

El acoplamiento de reacciones exergnicas (libera energa libre), con otras endergnicas (requieren energa), es central en los intercambios energticos de los sistemas vivos.

Acoplamiento de reacciones biolgicas

Compuestos ricos en energa

El acoplamiento de las reacciones endergnicas y exergnicas est mediado por intermediarios de alta energa. Liberan energa mediante hidrlisis y transferencia de grupo. Transfiere la energa en una sola reaccin.

Trifosfato de adenosina (ATP)

Reacciones biolgicas

Las miles de reacciones qumicas catalizadas en las clulas se encuentran organizadas en muchas secuencias diferentes de reacciones consecutivas denominadas rutas.

ATP

Energa liberada

Energa consumida

Polisacrido Anabolismo

Energa liberada

Catabolismo

Glucosa

Catabolismo

CO2 + H2O

Introduccin
E
E e1 ATP + H20 + ADP + Pi Reaccin catablica (exergnica) E

e2

E1

G -

E2
ADP + Pi

Reaccin anablica (endergnica)

Reacciones biolgicas
CATABOLISMO Reacciones de degradacin destruccin Reacciones de oxidacin Desprenden energa ANABOLISMO o Reacciones de sntesis construccin Reaccin de reduccin Consumen energa o

A partir de muchos sustratos A partir de pocos sustratos distintos, se originan los mismos distintos, se originan muchos productos (rutas convergentes) productos distintos(rutas divergentes)

Nutrientes
1. Macronutrientes o macroelementos: Constituyen el 95% del peso seco de la clula: C, O, H, N, S, P, K, Ca, Mg, Fe. Los 6 primeros son componentes de hidratos de carbono, protenas, lpidos y c. Nuclicos Son necesarios en cantidades de gramos por litro de medio Los 4 restantes se encuentran en la clula en forma de cationes

K, actividad de enzimas;
Ca, termorresistencia de endosporas; Mg, cofactor de muchas enzimas; Fe, citocromos.

Nutrientes
2. Micronutrientes u oligoelementos: : Mn, Zn, Co, Mo, Ni, Cu. 3. Se requieren en cantidades de microgramos por litro de medio Parte importante de enzimas y cofactores, facilitan la catlisis de reacciones y mantenimiento de estructura de protenas.

Vitaminas y hormonas. Las vitaminas hidrosolubles son necesarias para el crecimiento y son componentes de coenzimas.