Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Facultad de Estudios Superiores Zaragoza. Ttulo: Cromatografa. Materia: Laboratorio de Ciencia Bsica III.

Alumnos: Moiss Espindola Aparicio. Alejandro Caltzontzin Reyes Prof.: Mara Eugenia Ibarra Hernndez. Grupo: 3304 Fecha de entrega: mircoles de 2012

Resumen.
A continuacin se presenta la informacin experimental que fue reunida durante el desarrollo del experimento de cromatografa en capa fina y en columna. Por medio de este proyecto experimental pudimos extraer el pigmento natural que da su color caracterstico al chile guajillo y utilizarlo en cromatografa en capa fina esto con el fina de poder elegir el disolventes y/o mezclas de disolventes para poder fraccionar los colores del cual esta compuesto este pigmento. Posteriormente se logro separar de forma exitosa el color amarillo contenido en el pigmento natural del chile guajillo con un Rf=0.9. Llegando a la conclusiones, que el mtodo de cromatografa en capa fina que sirve para elegir el disolvente adecuado es un mtodo

demasiado laboriosos e impreciso.

Introduccin.
La cromatografa es una tcnica que se emplea para separar entre si los componentes de una sustancia. Esta tcnica fue creada por el botnico ruso Michael Tswett en 1906, el cual llam a su mtodo cromatografa, palabra griega que significa escritura a color, porque lo utilizo para separar compuestos coloreados. Tswett llev a cabo una extraccin de una mezcla de pigmentos de hojas verdes utilizando ter de petrleo, un disolvente no polar, y descubri que era capaz de separar los pigmentos al hacer pasar el extracto a travs de una columna, un tubo de vidrio rellenado con carbonato de calcio (tiza). Tswett utiliz como detector del experimento la simple observacin, ya que los compuestos que separ tenan color y era posible detectar bandas o zonas de distintas materias por su color en la columna, demostrando que la clorofila es solo uno de los muchos pigmentos que se encuentran en las hojas de las plantas

Diseo experimental.
Extraccin de pigmentos. Materiales. Un anillo de fierro. Un matraz bola de 250 ml. Una canastilla de calentamiento. Un soporte universal. Una pinza de tres dedos con nuez. Un condensador. Mangueras para agua. Un recirculador. Un recipiente para agua. Un embudo de decantacin.

Reactivos. Agua . H2O Etanol. CH3CH2OH

Cloruro de Metileno. CH2Cl2

Una probeta de 10 ml.

*Se cortaron 5 g de chile guajillo en tiras. *Se monto el equipo de reflujo. *Se coloco en el matraz bola los 5 g de chile guajillo y se adicionaron 10 ml de etanol, el matraz se adapto al equipo de reflujo, y se llevo a reflujo durante 5 minutos. *Con los 5 g que ya existen en el matraz se agrego 10 ml de cloruro de metileno y se llevo a reflujo durante 5 minutos (Se repetido este proceso 4 veces mas) *Se decanto y filtro esta mezcla colocndola en un embudo de decantacin de 125 ml. *Se preparo una solucin saturada de agua con sal (salmuera). *Esta disolucin saturada se agrego al embudo de decantacin junto con el pigmento, se agito el embudo y atreves de la llave del embudo se dejaron salir los gases generados. *Se introdujo el contenido del embudo en un frasco mbar, solo se verti el contenido orgnico y no la salmuera. Se etiqueto y guardo el frasco.

Procedimiento.

Diagrama de flujo.
*Se coloco en el matraz bola los 5 g de chile guajillo y se adicionaron 10 ml de etanol, el matraz se adapto al equipo de reflujo, y se llevo a reflujo durante 5 minutos. *Con los 5 g que ya existen en el matraz se agrego 10 ml de cloruro de metileno y se llevo a reflujo durante 5 minutos (Se repetido este proceso 4 veces mas)

*Se cortaron 5 g de chile guajillo en tiras. *Se monto el equipo de reflujo.

*Se decanto y filtro esta mezcla colocndola en un embudo de decantacin de 125 ml. *Se preparo una solucin saturada de agua con sal (salmuera).

*Esta disolucin saturada se agrego al embudo de decantacin junto con el pigmento, se agito el embudo y atreves de la llave del embudo se dejaron salir los gases generados. *Se introdujo el contenido del embudo en un frasco mbar, solo se verti el contenido orgnico y no la salmuera. Se etiqueto y guardo el frasco.

Imgenes obtenidas en el desarrollo experimental. Extraccin del pigmento. Reflujo. Filtracin del pigmento.

Cromatografa en capa fina.

Materiales. 10 Frascos de gerber. Papel filtro del N 1 20 Porta objetos Tubos capilares Pipetas graduadas. Una parrilla de calentamiento Una superficie metlica para calentar. Agitador de vidrio. Regla graduada.

Reactivos. Acetona. CH3(CO)CH3

ter de petrleo. Hexano. C6H14 Cloruro de metileno. CH2Cl2. Metanol. CH3OH Alcohol etlico. CH3CH2OH Acetato de etilo. CH3-COOCH2-CH3 Tolueno. C6H5CH3 Cloroformo. CHCl3 Gel de slice para cromatografa en capa fina..

Procedimiento
*Se concentro el pigmento calentndolo en bao mara. *Se preparo una papilla de gel de slice con agua y se unto sobre varios porta objetos. *se colocaron sobre una superficie metlica y esta sobre una parrilla de calentamiento para activar las cromatoplacas. *El papel filtro se corto en rectngulos que se ajustaran al rea lateral de los frasco. *Se introdujeron lo papeles filtro dentro de los frascos (cmaras de elucin.) *Se agregaron 5ml de los diferentes disolventes, posteriormente se comenzaron a hacer mezclas entre ellos variando los volmenes entre si. (se prepararon n cantidad de mezclas). *Los tubos capilares se fundieron por la mitad para separarlos y formar una micro pipeta. *Con la micro pipeta se coloco una micro gota en las cromatoplacas activadas (un centmetro por encima del borde donde termina la gel de slice) y se introdujo en los disolventes o mezclas de disolventes. Se observo que distancia recorre la mancha y que colores se separaba. *Se tomo notas, fotos, dibujos etc., se hiso los registros y clculos necesarios.

Diagrama de flujo.
*Se concentro el pigmento calentndolo en bao mara. *Se preparo una papilla de gel de slice con agua y se unto sobre varios porta objetos. *se colocaron sobre una superficie metlica y esta sobre una parrilla de calentamiento para activar las cromatoplacas. *El papel filtro se corto en rectngulos que se ajustaran al rea lateral de los frasco. *Se introdujeron lo papeles filtro dentro de los frascos (cmaras de elucin.) *Se agregaron 5ml de los diferentes disolventes, posteriormente se comenzaron a hacer mezclas entre ellos variando los volmenes entre si. (se prepararon n cantidad de mezclas).

*Los tubos capilares se fundieron por la mitad para separarlos y formar una micro pipeta. *Con la micro pipeta se coloco una micro gota en las cromatoplacas activadas (un centmetro por encima del borde donde termina la gel de slice) y se introdujo en los disolventes o mezclas de disolventes. Se observo que distancia recorre la mancha y que colores se separa. *Se tomo notas, fotos, dibujos etc., se hiso los registros y clculos necesarios.

Imgenes obtenidas en el desarrollo experimental.

Activacin de las cromatoplacas.

Cmaras de elucin.

Distancia que recorre la mancha.

Cromatografa en columna.
Material. Una probeta de 10 ml larga. Una pipeta de 5ml graduada. 10 Tubos de ensaye. Una gradilla. Un soporte universal. Una pinza doble de presin. Reactivos. Acetona. CH3(CO)CH3 ter de petrleo. Hexano. C6H14

Cloruro de metileno. CH2Cl2.

Metanol. CH3OH Alcohol etlico. CH3CH2OH Acetato de etilo. CH3-COO-CH2-CH3 Tolueno. C6H5CH3 Cloroformo. CHCl3 Arena de mar. Gel de slice para cromatografa en columna..

Un agitador de vidrio.
Mangueras para vaco. Algodn. Una bomba de vaco. Dos vasos de precipitado de 100 ml.

Procedimiento
*Con ayuda de el agitador de vidrio y/o la bomba de vaco se introdujo una pequea torunda de algodn dentro de la base interna de la bureta. *Por encima del algodn se introdujo y se midi 20 cm de gel de slice. Despus de medir esa distancia se verti la gel dentro de uno de los vasos de precipitados. *Se introdujo 1 cm de arena de mar en la probeta por encima del algodn *Se preparo una papilla con la gel de slice (que ya fue medida) y hexano. *Esta mezcla es insoluble; se vaco dentro de la probeta y se abri la llave (como quedaron residuos del la gel hmeda en el vaso de precipitados este procedimiento se hizo n cantidad de veces hasta que la gel quede completamente dentro de la probeta). La parte superior de la gel de slice nunca debe de quedar seca es decir siempre debe tener disolvente. *Se agrego 1 cm de arena de mar por encima de la gel de slice, se administro 1 ml del pigmento encima de la arena de mar. *Por ultimo se agregaron los lo disolventes y/o mezclas de ellos elegidos previamente en cromatografa en capa fina, esto con el fin de separar los colores. *Se fueron recolectando cada color en tubos de ensaye teniendo cuidado de no mezclarlos entre ellos. Se tomo notas, fotos, dibujos etc., se hiso los registros y clculos necesarios.

Diagrama de flujo.
*Con ayuda de el agitador de vidrio y/o la bomba de vaco se introdujo una pequea torunda de algodn dentro de la base interna de la bureta. *Por encima del algodn se introdujo y se midi 20 cm de gel de slice. Despus de medir esa distancia se verti la gel dentro de uno de los vasos de precipitados.

*Se introdujo 1 cm de arena de mar en la probeta por encima del algodn *Se preparo una papilla con la gel de slice (que ya fue medida) y hexano.

*Esta mezcla es insoluble; se vaco dentro de la probeta y se abri la llave de la probeta (como quedaron residuos del la gel hmeda en el vaso de precipitados este procedimiento se hizo n cantidad de veces hasta que la gel quede completamente dentro de la probeta). La parte superior de la gel de slice nunca debe de quedar seca es decir siempre debe tener disolvente.

*Se agrego 1 cm de arena de mar por encima de la gel de slice, se administro 1 ml del pigmento encima de la arena de mar. *Por ultimo se agregaron los lo disolventes y/o mezclas de ellos elegidos previamente en cromatografa en capa fina, esto con el fin de separar los colores.

*Se fueron recolectando cada color en tubos de ensaye teniendo cuidado de no mezclarlos entre ellos. Se tomo notas, fotos, dibujos etc., se hiso los registros y clculos necesarios.

Imgenes obtenidas en el desarrollo experimental.

Columna de cromatografa. (Imagen de archivo). Colores extrados de cromatografa en columna.

Segunda Cromatografa en Capa Fina.

Procedimiento
*Se concentro el pigmento calentndolo en bao mara. *Se preparo una papilla de gel de slice con agua y se unto sobre 6 porta objetos. *se colocaron sobre una superficie metlica y esta sobre una parrilla de calentamiento para activar las cromatoplacas. *El papel filtro se corto en rectngulos que se ajustaran al rea lateral de los frasco. *Se introdujeron lo papeles filtro dentro de los frascos (cmaras de elucin.). *En los frascos se agrego 5 ml de los disolventes y mezclas de disolventes utilizados en cromatografia en columna. *Con la micro pipeta se coloco una micro gota en las cromatoplacas activadas (un centmetro por encima del borde donde termina la gel de slice) y se introdujo en las mezclas de disolventes. Se observo que distancia recorre la mancha y que colores se sopaba. *Se tomo notas, fotos, dibujos etc., se hiso los registros y clculos necesarios.

*Se concentro el pigmento calentndolo en bao mara. *Se preparo una papilla de gel de slice con agua y se unto sobre 6 porta objetos.

Diagrama de flujo.
*se colocaron sobre una superficie metlica y esta sobre una parrilla de calentamiento para activar las cromatoplacas. *El papel filtro se corto en rectngulos que se ajustaran al rea lateral de los frasco.

*Se introdujeron lo papeles filtro dentro de los frascos (cmaras de elucin.). *En los frascos se agrego 5 ml de los disolventes y mezclas de disolventes utilizados en cromatografia en columna.

*Con la micro pipeta se coloco una micro gota en las cromatoplacas activadas (un centmetro por encima del borde donde termina la gel de slice) y se introdujo en las mezclas de disolventes. Se observo que distancia recorre la mancha y que colores se sopaba. *Se tomo notas, fotos, dibujos etc., se hiso los registros y clculos necesarios.

Imgenes obtenidas en el desarrollo experimental.

Resultados Experimentales.
Extraccin de pigmento. Se obtuvieron alrededor de 40 ml de pigmento de chile guajillo. Cromatografa en capa fina. Disolvente. P o l a r i d a d ter de petrleo. Hexano. C6H14 R.F. 0.575 0.5 0.92 0.88 0.9

Tolueno.

C6H5CH3

Cloroformo. CHCl3

Cloruro de metileno. CH2Cl2.

Acetato de etilo. CH3-COO-CH2-CH3
Acetona. CH3(CO)CH3 Alcohol etlico. CH3CH2OH Metanol. CH3OH

0.84
0.5 0.56 19

Mezclas de disolventes.
Mezcla de disolvente. Metanol 2.1 ml y Hexano 2.9 ml. ter de petrleo 1.6 ml y cloruro de metileno 3.4 ml. Cloruro de metileno 2.5ml y Acetona 2.5 ml. Etanol 2.6 ml y Acetona 2.4 ml. R.F. 0.8 1.04 1.08 0.84 0.7 0.9

Hexano 4 ml y ter de petrleo 1 ml. Tolueno 1 ml y ter de petrleo 4ml.

Cloruro de metileno 2.5 y Etanol 2.5 ml. Cloroformo 2.5 ml y metanol 2.5ml.

Las disolventes y mezclas de disolventes resaltados en las tablas anteriores son los que se utilizaron en la cromatografa en columna, puesto que fueron mas eficientes para separar colores. El tolueno y cualquier mezcla con tolueno separo dos tonos de amarillo, y el ter de petrleo y el cloroformo separo dos tonos de color anaranjado y el rojo, el tolueno que fue agregado para finalizar el procedimiento de la columna y separo amarillos muy diluidos.

Cromatografa en columna.

Segunda cromatografa en capa fina.

Disolvente y/o Mezcla. R.F. Color separado.

Tolueno 1 ml y ter de petrleo 4ml.

Hexano 4 ml y ter de petrleo 1 ml. Cloruro de metileno. CH2Cl2. Tolueno. C6H5CH3

0.9
0 0 0

Amarillo.
Rojo ligeramente naranjado Rojizo anaranjado. Ninguno.

Anlisis de Resultados.
Extraccin de pigmentos.

En este proceso del experimento no existieron dificultades durante el desarrollo de la practica es decir fue la fase mas fcil de realizar.
Cromatografa en capa fina.

La problemtica comn durante esta etapa del desarrollo experimental fue que al introducir las cromatoplacas dentro de las cmaras de elucin los colores no eran separados de igual manera, y esto fue fcil de comprobar por que al hacer comparaciones entres los colores que nuestro equipo y otros equipos separaron con un mismo disolvente era evidente que exista una gran diferencia entres sus resultados y los nuestros a dems que la perdida de volumen de disolvente en las cmaras de elucin era indiscutible.

Cromatografa en columna.
Cundo por fin pudimos elegir los disolventes y las mezclas de disolventes adecuados para separa colores, realizamos esta etapa del experimento, en donde se encontr una serie de problemticas empezando por como preparar la columna, que present la dificultad de introducir el algodn en la base interna de la bureta, hasta introducir de manera correcta la papilla de la gel de slice, que fue un proceso bastante laborioso. Adems cuando fueron agregados los disolventes y las mezclas (uno a uno) no separaron los colores como esperbamos mas que nada pareca ser que estaban mezclados entre si los 3 tipos de colores que esperbamos obtener. Cuando los recolectamos los colores a travs de la llave de la bureta obtuvimos 2 tonos de amarillo muy similares, dos rojos muy parecidos entre si y cerca de 3 tonos de amarillo demasiado claros.

Segunda cromatografa en capa fina.

El color amarillo fue el nico que pudimos ver que se separo de manera ideal por que las manchas de rojo ni siquiera se movieron en la cromatoplaca, cuando realizamos esta ultima etapa del experimento, los amarillos muy claros no se alcanzaron a distinguir si corrieron o no en la cromatoplaca, a simple viste no se vea ninguna mancha.

Conclusiones.
Con el termino de este proyecto experimental nos dimos cuenta que la cromatografa realizada al pigmento natural del chile guajillo, solo pudimos separar de manera eficiente el color amarillo obteniendo un RF=0.9, el color rojizo anaranjado no fue separado por que en la segunda cromatografa en capa fina no se movio de el lugar donde fue colocada la mancha y su RF= 0. Con esto podemos concluir que el nico color que separamos exitosamente fue el amarillo. Adems que el tolueno es el disolvente que lo separa de forma ideal as como las mezclas de cualquier otro disolvente con tolueno sin importar el volumen de este. Otra conclusin importante es que el mtodo de cromatografa en capa fina que se utilizo para encontrar al disolvente ideal, para usarlo en cromatografia en columna es un mtodo bastante laborioso e inexacto por que nunca se tiene la certeza de saber que disolvente separara los colores que se desean separar adems las mezclas entre disolventes lo hacen aun mas impreciso, puesto que las variantes se potencializan mucho mas, debido a que la variacin entre los volmenes de disolvente as como las naturaleza de los mismos hace que la incertidumbre crezca mas y hace un trabajo mas laborioso.

Sugerencias.
El experimento se realiz en las mejores condiciones posibles, y las nicas recomendaciones que se hace es revisar de forma ms detenida los materiales y el equipo con el que se va a experimentar, adems de poner ms atencin a los detalles durante el desarrollo experimental. Si fuera posible hacer una investigacin previa sobre algn mtodo analtico que pudiese facilitar la forma de encontrar el disolvente y/o la mezcla de disolventes mas eficiente para separar los compuestos requeridos.

Bibliografa.
*Brewester, R.Q. Introduccin al curso prctico de qumica orgnica experimental. Almahambra S.A. Madrid 1978. *Fieser L.F. Experimentos de qumica orgnica experimenta, Almahambra, S.A. Madrid 1978. *Pavia, DL; Lampman, G.M.; riz, G.S. And Engel; Introducttion to laboratory techniques: A mall Scale Aaprproach, Saunders CollagePublishing., U.S.A. 1998.

Web Bibliogrfica.
www.wikipedia.org http://es.scribd.com