Universidade Federal de Gois Bioqumica Bsica - Biomedicina

Lays Costa Marques Nbia Siqueira Damaceno Renata Caroline

Funes gerais das Lipoprotenas

Transporte de cidos graxos para o tecido adiposo e os msculos na forma de triacilgliceris; Transporte de colesterol para as clulas perifricas; Retorno do colesterol no utilizado pelas clulas para o fgado.

Origem do Colesterol Endgeno

Sintetizado por praticamente todos os tecidos / Metade fornecido pela dieta Produto Tpico do Metabolismo Animal (Gema de Ovo, Carne, Fgado)

Formas do Colesterol

Colesterol

ster de colesterol (colesterol + cido graxo)

Destinos do Colesterol

Ao da Acil-CoA Colesterol Aciltransferase (ACAT)

Esterificao do Colesterol Intracelular

O colesterol intracelular pode ser esterificado

Colesterol

Acil-CoA colesterol aciltransferase

Acil-CoA Graxo SHCoA

ster de Colesterol

Lipoprotenas Plasmticas

Complexos macromoleculares de protenas transportadoras especficas com uma forma variada de molculas lipdicas.
Triacilgliceris (16%); Fosfolipdios (30%); Colesterol (14%); steres de Colesterol (36%) e cidos Graxos Livres (4%)
metabolicamente mais ativos

Lipoprotenas

So partculas formadas por um cerne de lipdeos hidrofbicos envolvido por uma capa de lipdeos mais polares ou anfipticos e protenas . O cerne apolar composto principalmente por triacilgliceris e colesteril steres. Assim como nas membranas celulares essas molculas so orientadas de forma que seus grupos polares estejam em contato com o meio aquoso externo. A frao protica de uma lipoprotena chamada de apolipoprotena ou apoprotena.

Lipoprotena
Proteins (apoproteins)
HO

Cholesterol

Non polar lipids in core (TAG and cholesterol esters)

O

HO

HO

Lipoprotenas

A frao protica das lipoprotenas denomina-se Apoprotena, e se divide em 5 classes principais Apo A, B, C, D e E e vrias subclasses A frao lipidca das lipoprotenas muito varivel, e permite a classificao das mesmas em 5 grupos, de acordo com suas densidades e mobilidade eletrosfrica: Quilomcrons, VLDL; IDL; LDL; HDL.

Lipoprotenas

Apolipoprotenas

apo designa a protena sem lipdios. Existem pelo menos 9 no plasma humano, sendo distinguidas por: Seu tamanho, Suas reaes com anticorpos especficos e Sua distribuio caractersticas nas classes de lipoprotenas. Podem ser integrais ou livres.

Apolipoprotena
N C

Lipid-free Apolipoprotein A-I

PDB 2A01

Papis das Apolipoprotenas:

1.

Podem formar parte da estrutura da lipoprotena (apoB); Co-fatores enzimticos (C-II, lipoprotena lipase) e inibidores enzimticos (apos A-II e C-III na lipoprotena lipase); Elas agem a partir da interao de sua ligao com os receptores de lipoprotenas existentes nos tecidos (apos B-100 e E para receptores de LDL e A-I para receptores de HDL);

2.

3.

Papis das Apolipoprotenas:

4.

Contribuem para a coeso e solubilidade das lipoprotenas.

Podem estar integradas no envoltrio anfiptico (apoB). E tambm podem se encontrarem na face externa da micela (apolipoprotenas perifricas), se fixando por ligaes inicas aos fosfolipdios ou se fixando por pontes de dissulfeto entre apolipoprotenas.
As apoD no teve o seu papel definido embora acredite que seja um importante fator nas desordens neurodegenerativas humanas. A apoB-100 sintetizada pelo fgado uma das maiores.

Quilomcrons

Sintetizados no Retculo Endoplasmtico das clulas epiteliais do intestino delgado. So os maiores e menos densos. Movimentam os triacilgliceris desde o intestino at serem consumidos ou armazenados ( apoB-48 e apoE) principalmente aos msculos esquelticos, cardacos e glndulas mamrias.

Distribuio no Quilomcron

Apoprotein phospholipid Cholesterol ester Cholesterol

TAG (86%)

Quilomcrons

ApoC-II ativa a lipase lipoprotica nos capilares dos tecidos adiposos, liberando cidos graxos livres. So captados por endocitose por receptores no fgado. Os remanecentes (apoE) liberam o colesterol, que degradado nos lisossomos.

Transporte do Colesterol
Intestino

Dieta ou Biossntese

Colesterol + steres de colesterol

Quilomcron Colesterol + steres de colesterol

Fgado

5%

Colesterol + steres de colesterol

Tecidos Extra-hepticos

Quando tem mais cido graxo que a necessidade de combustvel os triacilgliceris no fgado so convertidos em VLDL (very low density lipoproteins).

VLDL

Lipoprotenas de muito baixa densidade. Origem heptica.

Contm adicionados aos triacilgliceris alguma quantidade de colesterol e steres de colesterol.

So transportados do fgado para os msculos e tecido adiposo. apoB-100, aposC, apoE.

VLDL

Ativao pela apoC-II, da lipoprotena lipase separa os cidos graxos da VLDL; So captados pelos adipcitos e ressintetizam triacilgliceris, armazenando gotculas lipdicas intracelulares; Nos micitos oxidam para obterem energia; As VLDL remanescentes so removidas da ciculao por hepatcitos (receptores apoE).

Distribuio da VLDL
Protein phospholipid

Cholesterol ester
TAG (55%) Cholesterol

Transporte do Colesterol
Biossntese
Fgado

Colesterol + steres de colesterol

VLDL (LDL)

Colesterol + steres de colesterol

Tecidos Extra-hepticos

A perda de triacilgliceris das VLDL converte em remanescentes de VLDL ou intermediate-density lipoprotein, as IDL.

IDL

Lipoprotena de densidade intermediria.

1.

Tem dois destinos:

Metade delas captada pelo fgado para processamento. Metade transformada em LDL pela remoo de mais triacilglicerol.

2.

Remoo adicional das VLDL produz as LDL (low-density lipoprotein).

LDL

Lipoprotenas de baixa densidade. Ricas em colesterol e em steres de colesterol. Transportam para os tecidos perifricos que possuem receptores apoB-100.
Separao do LDL do seu Receptor Remanescentes de LDL sofrem hidrlise Libera colesterol, AA, AG e fosfolipdios.

OBS. Deficincia de receptores de LDL causa uma elevao nos nveis plasmticos de LDL (aterosclerose).

LDL
Apoprotein B-100 monolayer of phospholipid & cholesterol core: cholesteryl esters & some triacylglycerols

LDL

Receptores de LDL

LDL extracellular space cytosol LDL receptor

receptor-mediated endocytosis

HDL

Lipoprotena de alta densidade (high-density lipoproteins). Sintetizadas no fgado e no intestino delgado. Partculas pequenas, ricas em protenas, contendo pouco colesterol e nenhum ster de colesterol. Contm apoC-I, apoC-II e outros.

HDL

Na superfcie da HDL recm formada exite a enzima lecitina - colesterol aciltransferase (LCAT), que catalisa a formao de steres de colesterol a partir lecitina e colesterol. Convertendo o colesterol e a fosfatilcolina dos quilomcrons e remanescentes de VLDL em steres de colesterol, inicia a formao de um ncleo que transforma a HDL nascente (disco) em madura (esfrica).

HDL

As lipoprotenas ricas em colesterol, voltam ao fgado, onde o colesterol descarregado; parte deles sendo convertido em sais biliares. As HDL podem ser captadas pelo fgado por endocitose (mediada por receptor), podem ligar receptores de membrana plasmtica os SR-BI (no tecido heptico e nos produtores de
hormnios esteris, ex.: glndula adrenal).

HDL

Transporte reverso: - Sem os componentes lipdicos descarregados, elas podem voltar circular na corrente sangunea e extrair captar mais colesterol armazenado nos tecidos extra-hepticos e transport-los para o fgado.

- Interao : HDL nascente com receptores SR-BI ativam o transporte passivo do colesterol.

HDL

Transporte do Colesterol
Tecidos Extra-hepticos

Colesterol + steres de colesterol

HDL/VLDL (IDL e LDL)

Fgado

steres de colesterol

Transporte do Colesterol
alm de protenas, a HDL retira colesterol dos tecidos extrahepticos e das lipoprotenas
Lipoprotenas
Colesterol

Papel da HDL na Transferncia de Lipdios:

Tecidos Extra-hepticos
Colesterol

Colesterol

HDL

Classes de Lipoprotenas caractersticas gerais

Lipoprotenas Principais Lipdeos (%) TG: 90% TC: 55% Colesterol: 45% Apoprotena (%) 2% 5 a 8% 20-24% Origem Funo

Quilomcron VLDL LDL

Intestino Fgado e Intestino Intravascul ar Fgado e Intestino

Transporte TG exgeno Transporte de TG endgeno Transporte de colesterol aos tecidos Transporte reverso do colesterol dos tecidos para o fgado

HDL

Fosfolipdeos: 30%

50%

Os componentes da lipoprotena esto em constante estado de sntese, degradao e remoo do plasma OBS.: Sistema de entrega deficiente deposio gradual de lipdeos (arteroesclerose).

Lipoprotenas

As classes tambm so conhecidas como: VLDL : pr-lipoprotena; LDL: -lipoprotenas (ApoB); HDL: -lipoprotenas (ApoA).

Tamanhos Relativos das Lipoprotenas

Dosagem de Lipoprotenas
Mtodos enzimticos: soro + reagente. Mtodos qumicos: baseados em meio cido ou utilizando ons frricos.

Dosagem de lipoprotenas
Mtodo enzimtico: utilizado principalmente para a determinao do
colesterol em amostras de soro

Os steres de colesterol so hidrolisados pela colesterol

esterease a colesterol e cidos graxos. O colesterol livre oxidado ela colesterol oxidase a colest-4-en-ona e perxido de hidrognio. Na presena de peroxidase e perxido de hidrognio, o fenol e a 4-aminoantipirina so oxidados formando a antipirilquinonimina .

Dosagem de lipoprotenas
Colesterol

steres do colesterol Esterease

Colesterol + O2

Colesterol + cidos graxos

Colesterol Colest-4-en-ona + H2O Oxidase Peroxidase

2H2O2+Fenol+4-Aminoantipirina

Antipirilquinonimina+4H2O2

Dosagem de lipoprotenas
Os mtodos para quantificao do colesterol utilizam tanto
o consumo de oxignio, quanto a formao do perxido de hidrognio como indicadores da quantidade de colesterol presente na amostra.

formado um cromforo que tem absorbncia mxima em torno de 500nm.

A intensidade da cor vermelha formada na reao final diretamente proporcional concentrao do colesterol na amostra.

Dosagem de lipoprotenas
Clculos: Colesterol (mg/dL) = Absorbncia do teste_ x 200

Absorbncia do Padro

Mtodo Qumico

So mtodos baseados em meio cido ou utilizando ons frrico

Dosagem de lipoprotenas
A maioria destes ensaios requer procedimentos de extrao ou pr-tratamento da amostra e utilizam reagentes custicos

Estes mtodos praticamente no so mais utilizados nos laboratrios

Dosagem de lipoprotenas
Mtodos para dosagem de HDL e LDL Em laboratrios comumente se utilizam mtodos de precipitao seletiva das LDL e VLDL. Aps a centrifugao da amostra o colesterol ligado s lipoprotenas de alta densidade determinado no sobrenadante . A dosagem do LDL em geral feita por mtodo enzimtico colorimtrico

Classes das Lipoprotenas

Quantidade desejvel de colesterol total, HDL e LDL em mg/dL

Colesterol total

Colesterol LDL
Menor que 110 mg/dL

Colesterol HDL
Maior que 40 mg/dL

2 A 19 anos

170 mg/dL

Adultos

200 mg/dL

Menor que 100 mg/dL

Maior que 60 mg/dL

Obrigada!