CONSERVACIN DE SEMEN DEL ONCORHYNCHUS MYKISS MEDIANTE TCNICA DE CONGELACIN

TOSCANO CAMPOSANO, RUFFO MEZA POMA,NGEL Octubre de 2011

El trabajo de investigacin se realiz en la piscigranja La Cabaa, ubicado en el distrito de Sapallanga Huancayo-Junn. Se ha observado que actualmente existen problemas en la importacin de ovas, tiene como objetivo conservar semen del Oncorhynchus mykiss, mediante la tcnica de congelacin. Este trabajo es importancia porque permite disponer semen en cualquier poca del ao y puede superar los problemas en la escasez de ovas, El trabajo se realiz en la misma piscigranja la Cabaa, bsicamente para manipular el semen, porque una de las caractersticas de la trucha es de ser poiquilotermo, motivo suficiente para realizar una modificacin sustancial, en el mismo lugar durante el proceso de congelacin

MATERIALES Y MTODOS. Se utiliz, equipos de laboratorio, de campo, tiles de escritorio, reactivo y otros Mtodo De 250 machos se han seleccionado 05, con promedio de 03 aos y 1.800 kls. de peso. Tamao (longitud) 50 centmetros, considerando que estas, ya habran tenido en la campaa prxima pasada, actividad reproductiva, en la fecundacin de ovas.

AGUA

TO

TRUCHA

SEMEN

TO

VOLMEN

VITALIDAD
pH TIEMPO MOTILIDAD

CONCENTRACION

% DE VIVOS

% DE ANORMALES

10.2 11.0 11.0 11.5 11.5 11.0

A B C D E Promed.

10.50 11.10 11.50 11.50 11.50 11.22

8.00 8.50 10.00 5.50 6.00 7.60

7.5 8,0 8,2 7,9 8,0 7.9

4.0 3.0 2.5 2.0 2.0 2.7

0 3 2 1 2 1

4,25 8,45 6,55 5,95 7,15 6,45

00 95 92 82 89 72

5.00 10.00 7.00 12.00 8.00 8.40

TO TRUCHA SEMEN DILUIDO

pH SEMEN DILUIDO

RELACION DE DILUCIN

CANTIDAD SEMEN VS DILUTOR

MOTILIDAD SEMEN DILUIDO

CONCENTRACION

A B C D E
Promedio

11,50 11.10 11.50 11.50 11.50 11.50

7.5 8,0 8,2 7,9 8,0 7,9

1a1 1a1 1a1 1a1 1a1 1a1

3ml a 3ml 3ml a 3ml 3ml a 3ml 3ml a 3ml 3ml a 3ml 3ml a 3ml

0 2 1 0 1 1

1,95 4,25 3,15 2,95 3,45 3,15

Despus de la valoracin del semen diluido se procedi al proceso de congelacin, de las muestras B, C, y E cuyas caractersticas han sido consideras, como para congelar. Descenso de la Temperatura; En este proceso, se ha obtenido un descenso de 3o por minuto. El tiempo obtenido de 3 minutos para disminuir de 11.36Co a 3.0 Co Punto de Refrigeracin., fue 3 grados centgrados, Comprobado la motilidad se procedido a envasar en frasquitos con capacidad de 6 ml, considerado como una dosis para fecundar a una cantidad de ovas, que logra desovar la hembra. Punto de Congelacin., temperatura a -92o Co Congelacin; De la Temperatura de -92o Co, se ha sumergido el frasco contenido el semen diluido a T0 -196Co considerado ste, como punto de congelacin permanente, Proceso de Descongelacin; Despus de una hora de congelado, y con la finalidad de comprobar la vitalidad del semen, se hizo la valoracin, con el siguiente resultado:

Despus de una hora de congelado, y con la finalidad de comprobar la vitalidad del semen, se hizo la valoracin, con el siguiente resultado VALORACIN DESPUES DE CONGELADO (Tabla 3)
TRUCHA T SEMEN pH MOTILIDAD CONCEN% TRACIN DE VIVOS

B
C E

11
11 11

7.9
7.5 7.8

1
0 0

3,85
3,05 2,05

65
00 00

Aspectos generales., Las truchas para el trabajo tuvieron las siguientes condiciones: edad; 3 aos, peso promedio1.800 kg, Longitud 56 centmetros, Color gris oscuro. Valoracin del Semen Puro, se obtuvo como resultado los siguientes promedios: To del agua (estanque) 11oCo, To del semen 11 a 12 Co, volumen de semen recolectado 7.60 ml., pH 7.9, motilidad 1, concentracin 6,45 espermatozoides/mm3, % de Espermatozoides vivos 72 % y porcentaje de anormales 8.4% Dilucin., como dilutor se utiliz el Tris-Fructosa-Yema de Huevo. La dilucin del fue 1 a 1, o sea 3 ml de dilutor en 3 ml. de semen. Valoracin de Semen diluido, se ha obtenido como resultado, TO 11.50Co, pH 7.9, Motilidad 1, Concentracin 3,15 espermatozoides/mm3 Descenso de la Temperatura, fu 3o por cada minuto, el tiempo de descenso de 11.36 Co a 3.0 Co fue de 3 minutos. Dosis de semen congelado por trucha desovado, consideramos 6 ml. El punto de congelacin, para bajar a -92 Co debe durar 2 minutos Congelacin, consideramos a -196Co durante el tiempo que fuera necesario. Descongelado, ponerlo el frasco en el agua a una temperatura ambiente de 11o a 12Co

Bastardo (1992) encontr que el pH seminal fue bsico y oscilo entre 8,0 en los reproductores de 2 aos, y 8,2 en los reproductores de mayor edad En el presente trabajo, el pH obtenido en promedio fue 7.9 en el semen puro y diluido. Terner y Korsh (1986) manifiestan sobre motilidad masal, que el esperma de los salmnidos, son inmviles en el plasma seminal hasta que ellos son activados por contacto con el fluido ovrico. Su movilidad no depende de la presencia de los huevos. Incluso indican que, un rasgo distintivo de la esperma de los salmnidos es la muy corta duracin. El esperma de la trucha puede ser mvil durante 30 segundos. Sobre el particular, efectivamente no hallamos una motilidad significativa, por lo tanto la motilidad en semen puro y diluido fue de 1. La motilidad disminuy 15 segundos despus de la dilucin y el movimiento fue lento y en crculos; despus de 20 a 30 segundos se inmovilizaron. Los autores explican y concluyeron que la mxima duracin de la motilidad de los espermatozoides (dos minutos) se debi a una baja capacidad de fosforilizacin oxidativa mitocondrial. Terner y Korsh (1986) manifiestan que, el tiempo de la extraccin a la dilucin en el esperma de los salmnidos Es esencial un mnimo de retraso entre la disolucin y la observacin. Efectivamente, nosotros en el presente trabajo, evaluamos que a los cuatro minutos haba una motilidad de 0, en cambio a los 2 minutos logramos ver hasta una motilidad de 3.

Conclusin General., Es factible la conservacin de semen del Oncorhynchusmykiss (trucha), mediante la tcnica de congelacin, y su posterior utilizacin con fines reproductivos.
Conclusiones Especficas. En la valoracin del semen se observa que la To del semen recolectado; 11 a 12Coes ligeramente superior a la To del agua (11oCo). El volumen de semen extrado de la trucha; fue en promedio de 7.60 ml. La Dilucin del semen, teniendo en cuenta la motilidad, la relacin fue 1 a 1. El tiempo de vida despus de la extraccin, en promedio fue 2 minutos. El tiempo para la dilucin no debe sobrepasar los 2 minutos. La dosis de semen se ha considerado en 6 ml

 Se

debe realizar nuevos experimentos, considerando que el protocolo vari, disminuyendo el tiempo. Utilizar como dilutor al bioxel y disear equipos de laboratorio especiales Utilizar mtodos que mejoren la fertilidad del semen, entre lo que se encuentran la aplicacin de antioxidantes y la deshidratacin del esperma.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS 1.-Blanco M. 1995. La Trucha, Cra Industrial. 2da. Edicin. Madrid. Ediciones Mundi Prensa. 2.-Poma C. 2006. Efecto de la Edad Sobre los ndices de Valoracin Espermtica en Truchas Arco Iris (Oncorhynchusmykiss), Criadas en el Centro Piscicola El Ingenio. Tesis de Grado UNCP. 3.-www.produccin-animal.com (consulta 09-12-09).