Bandeamiento y Nomenclatura

Bandas claras y oscuras

Dos tipos: 1. Las que resultan en bandas

distribuidas a lo largo de todo el cromosoma, bandas G, Q y R, demostrando patrones de sntesis de DNA. 2. Y las que colorean un nmero especfico de bandas o estructuras. Estas incluyen mtodos que revelan centrmeros (heterocromatina constitutiva) bandas C, regiones telomricas bandas T y regiones organizadoras nucleolares o Bandas NORs.

 Bandeo Dinmico:Son aquellas bandas

obtenidas por uso de anlogo de bases nitrogenadas como la 5-Bromo deoxiuridina (BrdU) y permiten ver zonas de replicacin tarda como el cromosoma X inactivo u obtener Intercambio de cromtidas hermanas. Una regin del cromosoma es definida como un rea entre dos landmarks adyacentes.Las bandas y las regiones son numeradas a partir del centrmero hacia fuera.

 Las bandas nos permiten:

1. La individualizacin de cromosomas.
2. Conocer la ubicacin exacta de genes 3. Localizar el lugar exacto en donde se produjo

una alteracin cromosmica estructural 4. Localizar puntos de ruptura, entre otros.

Badas G
Se obtienen por digestin de los cromosomas a

partir de una enzima proteoltica como la Tripsina (Ureasas o proteasas) Descrita como GTG: Banda G por tripsina y coloreada por Giemsa. A partir de estas se obtiene un patr+on caracterstico de bandeo para cada par homlogo, similar al encontrado en bandas Q. Colorean Zonas ricas en AT.

Bandas Q
Bandas Q: Se utiliza quinacrina, produciendo

patrones de bandeamineto fluorescentes en cromosomas, que al ser observados al microscopio de fluorescencia revelan un patrn caracterstico para cada cromosoma. Regiones ricas en AT.
BANDAS R

Inversas a las G
Altas temperaturas y colorear con Giemsa y

Naranja de Acridina.

Bandas C
Selectiva sobre heterocromatina constitutiva,

centromericas y pericentromricas, se obtienen por desnaturalizacin del DNA por accin de BaOH, que extraen hasta el 50% del DNA, preferiblemente en los brazos de los cromosomas.
Bandas NORs: Son las regiones de

organizadores Nucleolares en clulas de mamferos, localizados en los tallos de los satlites en cromosomas Acrocntricos.En ellos se localizan los genes de clase I que transcriben para los RNAr 18S y 28S. Coloreadas

Nomenclatura
, separa nmero de cromosomas de sexuales.

del
der- Derivado dup dic fra- sitios frgiles h- regin heterocromtica i- isocromosoma

PCR Multiplex
Mltiples fragmentos amplificados al mismo

tiempo. Pueden estudiarse diferentes genes al tiempo.

Anlisis de mutaciones Identificacin Clasificacin de especies

 Temperatura de annealing Complementariedad de los primers Pesos diferentes Nmero de ciclos Siempre usar controles internos Marcadores de peso Ajustar los componentes de la PCR segn la

cantidad de sistema. Si no son compatibles los primers: Pequeos plex Volumen inicial x Concentracin inicial = Volumen final x Concentracin final

Procedimiento
Desnaturalizacin inicial 94c 10 minutos

Cada ciclo:
94c por 30 52c por 30 65c por 45

Extensin final 65c por 10 minutos 30 ciclos

FISH
Aneuploidas

Microdeleciones
Duplicaciones Inversiones

En Metafase
Se puede en interfase

Microarray