Siglo Biotecnolgico

LAS NOTICIAS DE LA INVENCIN DE NUEVAS TCNICAS DE INTERVENCIN SOBRE LA VIDA VEGETAL, ANIMAL Y HUMANA INVADEN CASI A DIARIO LA OPININ PBLICA, SUSCITANDO REACCIONES A MENUDO APASIONADAS Y VALORACIONES OPUESTAS.

Desarrollo de una Ciencia

La gentica, ingeniera gentica y los dems trminos relacionados con la herencia son referentes de los grandes avances que se esta produciendo la ciencia y las grandes expectativas creadas han provocado una gran conmocin pblica.

Los impactos ms significativos han sido en la agricultura y ganadera. Al empezar a actuar sobre el hombre, sus genes y su descendencia es cuando empiezan a surgir las dudas ticas sobre estas tcnicas, sobre si respetan o no la dignidad humana

Cromosoma: corpsculo intracelular alargado

que consta de ADN, asociado con protenas, y constituido por una serie lineal de unidades funcionales. La especie humana tiene 46 cromosomas (23 pares).

Gen: unidad fsica y funcional del material

hereditario que determina un carcter del individuo y que se transmite de generacin en generacin.

Genoma: conjunto de todos los genes de un

organismo, de todo el patrimonio gentico almacenado en el conjunto de su ADN o de sus cromosomas.

Mapa gentico: diagrama descriptivo de los

genes en cada cromosoma

Ingeniera Gentica
Tcnicas que modifican las caractersticas hereditarias de un organismo en un sentido predeterminado mediante la alteracin de su material gentico

La formacin de nuevas combinaciones de genes por el aislamiento de un fragmento de DNA, la creacin en l de determinados cambios y la reintroduccin de este fragmento en el mismo organismo o en otro. Cuando los genes nuevos son introducidos en las plantas o animales, los organismos resultantes pasan a llamarse transgnicos.

OBJETIVOS:
Presentar informacin con validez cientfica, en forma clara y comprensible. Contribuir a generar un ambiente propicio para la reflexin analtica sobre la Ingeniera Gentica (Tecnologa del ADN recombinante). Promover el espritu crtico e identificar

BASES MOLECULARES MOLECULARES BASES DE LA LA INGENIERIA INGENIERIA DE GENTICA GENTICA

HECHOS HISTRICOS DE LA BIOLOGA MOLECULAR

1953 1966 1967 1970 1973 1974 1975 1977 1978 1980 1982 1983 Watson & Crick determinacin de estructura del ADN

Nirenberg, Ochoa y Khorana elucidaron Cdigo Gentico Wise y Richardson aislaron ADN ligasa Smith y Wilcox aislaron y caracterizaron Hind III Stanley Cohen y H. Boyer pusieron ADNr en bacterias Demostracin directa de deleccin gnica humana Edward Southern Southern Blotting Chow & Roberts, Sharp Intrones-Exones ADN codificante Y. W. Kan & A. M. Dozy RFPL diag. prenatal, oncogenes Maxam-Gilbert & Sanger Mtodos de Secuenciacin Tabaco, la primera planta modificada genticamente Kary Mullis concibe el PCR / Fred Sanger y colegas publican la secuencia del fago lambda 2000 26 de junio se presenta 90% borrador genoma humano 2001 26 de enero borrador genma del arroz Oriza sativa

Transferencia de genes en animales

Cultivo de Clulas Vegetales

BIOTECNOLOGA
Diagnsticos

Frmacos Anti-cncer

Solucin de crimenes Tecnolog a del ADN Bancos de ADN, ARN Protenas Mapas de Genomas completos

A n t A c n u s t e ii o c u p v s i e o o t rr s l p M v i o u o t s l C n M o u o c e nocll C ularre o n a o n e a l l a e ll u e l C s Ce s s s Biologa Biologa Molecular Molecular

Ingeniera Gentica Clonacin Produccin de Protenas humanas Recursos humanos qumicos raros Nuevos Antibiticos Terapia Gnica

Marcadore s Sntesis de Sondas de ADN Localizacin desrdenes genticos

Sntesis de Nuevas Protenas Nuevas Plantas y Animales Nuevos Alimentos

BASES MOLECULARES genoma DE LA VIDA

Clula cromosomas gene s

ADN ARN

ADN

PROTENAS
los genes contienen instrucciones para hacer protenas

ADN

protenas

las protenas actan solas o en complejos para realizar las funciones celulares

Todos los seres vivos tienen su informacin hereditaria codificada en la molcula de ADN. El juego completo de ADN de un ser vivo es el genoma. El genoma humano cuenta con 3 mil millones de pares de bases (pb) y unos 30,000 genes, que son un 3% del genoma. El tamao del genoma es independiente de la complejidad del organismo. El Genoma de mayor tamao es el del pez pulmonado africano Protopterus aethiopicus con 139 mil millones de pb; una planta con flores Fritillaria assyriaca tiene 124,900 millones de pb. 60%

GENOMAS

IDENTIDAD GENTICA
70%

20%

95% idntico

De 289 genes humanos implicados en enfermedades, hay 177 cercanamente similares a los genes de Drosophila.

Humanos 30,000 genes

Chimpanc 30,000 genes

Ratn 30,000 genes

A. thaliana 25,000 genes

C. elegans 19,000 genes

D. melanogaster 13,000 genes

Entre una persona y otra el ADN solo difiere en 0.2%

COMPARACIN DE GENOMAS
ESPECIES CROMOSOMAS GENES PARES DE BASES (MILLONES) HUMANO (Homo sapiens) RATN (Mus musculus) PEZ SOPLADOR (Fugu rubripes) MOSQUITO DE MALARIA (Anopheles gambiae) CHORRO DE MAR (Ciona intestinalis) MOSCA DE LA FRUTA (Drosophila melanogaster) LOMBRIZ INTESTINAL (Caenorhabditis elegans) BACTERIA (Escherichia coli)

46 (23 pares) 40 44 6 28 8 12 1 (cromonema)

28-35,000 22.5-30,000 ~ 31,000 ~ 14,000 ~ 16,000 ~ 14,000 19,000 ~ 5,000

~ 3,100* ~ 2,700 ~ 365 ~ 289 ~ 160 ~ 137 ~ 97 ~ 4.1

(www.jgi.doe.gov)

humanos, aprximadamente el 3% son secuencias codificantes

ESTRUCTURA DE UN GEN
Tradicionalmente, un gen se ha definido como un segmento de ADN que codifica para un polipptido o para una molcula funcional de ARN.

Molcula de ADN

Recientemente, los nuevos descubrimientos han alterado radicalmente esta visin, para adoptar una definicin ms vaga. De acuerdo con ello, un gen es una secuencia de ADN genmico o de ARN que es esencial para especificar una determinada funcin. Para llevar a cabo su funcin el gen no necesita ser traducido a protena, y a veces ni siquiera necesita ser transcrito.

ESTRUCTURA DE UN GEN
Elementos tpicos: 1) regin reguladora o promotor basal (caja TATA). o sitios de unin de proteinas reguladoras (upstream promoter). o Realzadores (enhancers) o Silenciadores 2) sitio de inicio de transcripcin. 3) 5'UTR. 4) codn de inicio. 5) intrones y exones alternados, con sitios de procesamiento aceptores y donadores 6) Codn de paro. 7) 3'UTR. 8) seal de poli-adenilacin.
(Gomez, M. & R. Alonso-Allende, CSIC)

ESTRUCTURA GENMICA DE GENES

Regin cromosmica del gen ADAM33. (a) estructura genmica de genes a los lados de ADAM33 (barra 15 kb). (b) Estructura exon intron de ADAM33 (barra 1 kb). Polimorfismos de nucletidos nicos SNPs se indican abajo del gen. (c ) Organizacin del Dominio del gen ADAM33 y localizacin de SNPs 3UTR Codificantes. Tamao de exones en pares de bases (pb) (Kreeger, Y. The Scientist apr. 2003).

INGENIERA GENTICA O ADNr

La Ingeniera Gentica o tecnologa del ADNr se inici en la dcada de los 70s. Se refiere a un grupo de tecnologas usadas para cambiar la composicin gentica de las clulas y mover genes a travs de las fronteras de las especies para producir nuevos organismos. Se pueden aislar genes, modificarlos, introducirlos a nuevos hospederos, y clonarlos para obtener una ventaja novedosa sobre el organismo natural.

INGENIERA GENTICA: TCNICAS

DEL ADN RECOMBINANTE (ADNr)

TCNICA PROPSITO

Enzimas Restriccin ADN Ligasa Vectores Plasmidos PCR ADNc Sondas de ADN Sntesis Gnica Gel Electroforsis Secuenciacin ADN

Cortan ADN en puntos especficos, hacen fragmentos de ADN Une fragmentos de ADN Virus o fagos: llevan ADN a las clulas y aseguran replicacin Clase comn de vector Amplifica la cantidad de ADN de muestras pequeas Copia de ADN a partir de ARN mensajero Para identificar y marcar una pieza de ADN conteniendo cierta secuencia Para hacer un gen de una base de datos Para separar fragmentos de ADN Para leer la secuencia de bases de un segmento de ADN

Marcadores Genticos Identifican a las clulas que han sido transformadas

TCNICAS DEL ADNr: ENZIMAS

PARA LA MANIPULACIN DEL ADN

Enzimas de restriccin ADN polimerasas ARN polimerasas Nucleasa ADN ligasa Kinasa Fosfatasa Transcriptasa reversa

Tcnicas del ADNr: SISTEMAS

DE TRANSFERENCIA GENTICA
1. Agrobacterium. Uso de la bacteria Como "Ingeniero Gentico". La bacteria conteniendo el inserto, infecta las clulas de la planta produciendo la recombinacin gentica. 2. Acelerador de Partculas (Gene Gun). Un can artificial bombardea micropartculas con el inserto, sobre la clula. 3. Electroporacin. Uso de carga elctrica para que el ADN atraviese la membrana nuclear. 4. Polietilenglicol. Exposicin de las membranas al PEG, facilita el movimiento de las molculas de ADN. 5. Silicon Wiskers. Inyeccin con fibras microscpicas, que atraviesan las membranas con los insertos.

Tcnicas del ADNr: SISTEMAS

DE TRANSFERENCIA GENTICA
6. Microinyeccin. Una clula es adherida a una pipeta bajo un microscopio y el ADN forneo es inyectado directamente en el ncleo usando una micropipeta muy fina. Se usa cuando hay pocas clulas disponibles, tales como clulas fertilizadas de huevo animal. 7. Liposomas. Los vectores pueden ser encapsulados en pequeas vesculas de membrana para introducir el ADN in vivo en la clula.

Aplicaciones de la Ingeniera Gentica

Cartografa. Es el Proyecto Genoma Humano: describir todos los genes del organismo humano, localizarlos y secuenciarlos. Diagnstico. identificar los defectos genticos y diagnosticar o pronosticar las enfermedades que aparecen o pudieran aparecer. Identificacin (forense/paternidad). identificar personas o determinar la paternidad. Teraputica. corregir defectos genticos causantes de las enfermedades genticas. Los "tratamientos genticos" consisten en la reparacin o sustitucin de genes defectuosos o delecionados. Biotecnologa. alterar los genomas de los seres vivos para dotarles de alguna cualidad que no tenan (plantas resistentes a heladas, frutas que maduran antes, cultivos que crecen ms,...).

Ingeniera Gentica:
Los ANIMALES son:

MODELOS ANIMALES Y VEGETALES

Caenorhabditis elegans
(100 millones pb, 19,000 genes,

Drosophila melanogaster Mus musculus

(3 mil millones pb, 30,000 genes)

(165 millones pb)

Sus scrofa

(2 mil 700 millones pb)

Los VEGETALES son:

millones pb)

Arabidopsis thaliana

(100

Nicotiana tabacum Orizae sativa (400 millones pb) Solanum tuberosum

Blom, N. & Rapacki K. www.dur.ac.uk/biological.sciences/Bioinformatics/dogs.htm

$ 2.1-$ 2.3 miles de millones 1999

En el ao 2000 se cultivaron en el mundo 44,2 millones de ha de PRIMERA GENERACION de Plantas cultivosSup. transgnicos. cult. cultivos Produ total
transgnicas

27.8 millones de ha 1998

millones ha.

transgn.

plantas

Soya Maiz
Algodn

25,8 10,3 5,3 2,8 44,2

7%

58,4 23,3 12 6 99,7

36 16 11 7 16

Colza TOTAL

NATURALEZA DE LA MODIFICACIN GENTICA

19% 74%

Tolerancia herbicidas Resistencia insectos Ambos

(Counseil de la science et de la technologie, 2002

INDICADORES: CULTIVOS TRANSGNICOS POR

PAS EN MILLONES DE HECTAREAS, 1996 A 2000

PAS Estados Unidos Argentina Canada China Africa del Sur Australia Otros TOTAL

1999 28,7 6,7 4,0 0,3 0,1 0,1 <0,1 39,9

2000 30,3

% de Cambio +5,6

10,0 +49,3 3,0 -25,0 0,5 +66,7 0,2 +100 0,2 +100 <0,1 44,2 (Counseil de la science et +10,8 de la technologie, 2002

La investigacin en cultivos de plantas genticamente modificadas para alimentacin, est detenida en muchas partes del mundo.

CHINA ENCABEZA LA REVOLUCIN DE OMGs

En China las polticas estn promoviendo el aumento de capacidad de la Biotecnologa Vegetal. Los investigadores

El AlgodnBt creciendo en China ha reducido el uso de pesticidas, incrementado la eficiencia de la produccin y ha

ANIMALES ACUTICOS TRANSGNICOS

Especies
Ctenopharingodon idella carpa triploide de grama Cyprinus carpio carpa comn Carassius auratus pez dorado, goldfish Pez de Wuchang / Charr del artico / Mummychog / Walleye Pangio kuhli locha gigante / Esox lucio lucio del norte Oncorhynchus mykis trucha arcoiris, O. kisuth salmn Salmo salar salmn del Atlntico Oreochromis spp tilapia Artemia spp pulga de agua Macrobrachium rosenbergii camarn de agua dulce Penneus indicus camarn blanco Haliotis kamtschatkana abaln japones Haliothis rufescens abaln rojo Mytilus edulis almeja azul Crassostrea virginica ostra oriental Crassostrea gigas ostra del Pacfico

Transgenes
Genes marcadores Hormona de crecimiento Polipeptido anticongelamiento Cecropina Interferon Fitasa Factor VII de coagulacin humana Genes reporteros para contaminantes GnRH antisentido (liberacin Hormona Gonadotropina)

Pases
USA Canad Cuba Reino Unido Francia Noruega China Japn Corea India Israel

Hallmark, E. 2003, ISB News Report, april

Ingeniera Gentica: NUEVOS ALIMENTOS

ARROZ con enzima lactoferrina de leche

humana, que puede ser utilizada para mejorar las frmulas de leche infantil. Los nios la necesitan para usar eficientemente el hierro y pelear contra las infecciones
(Pearson, H. Nature, 26 april 2002).

ARROZ DORADO con beta caroteno de

genes de narciso y de Erwinia uredovora, pigmentos que se transforman en provitamina A al ser ingeridos. ARROZ fortificado con un gen de la ferritina.

ARROZ con aa esenciales (ISB, 2001, oct; Netlink, 2000).

Ingeniera Gentica NUEVAS PLANTAS

ARROZ con altos niveles de tolerancia a

diferentes condiciones ambientales de estrs. Se insertaron dos genes fusionados de trehalosa de E. Coli y un promotor tejido especfico dependiente del estrs. Los genes de trehalosa permiten la produccin de arroz an si est estresado por frio, sequa o altos niveles de salinidad e incrementa la produccin en 20%. El azcar trehalosa ayuda a estabilizar molculas biolgicas: lpidos, enzimas y otras protenas, en organismos en

Ingeniera Gentica: NUEVOS ALIMENTOS Salmn transgnico por

(ISB, 2001, oct; Netlink, 2000). hormona de crecimiento. Producido por AF Protein Inc. Cuenta con el promotor de la protena de anticongelamiento de otra especie de pez. Crece de 4 a 6 veces ms rpido que un salmn no transgnico. Tiene un 20% en mejoramiento de la eficiencia de conversin del alimento. VACAS LECHERAS con incremento de protenas. En Nueva Zelanda se clonaron vacas con vulos mejorados genticamente, para mejorar la produccin del queso y crema, aumentando dos veces la kappa casena, crucial para hacer la cuajada y de 20% ms de beta caseina, que mejora la accin del cuajo (Hoag, H. Nature, 27 enero 2003).

Implicaciones ticas de la Manipulacin Gentica en Plantas

Se refieren al hecho de informar o no al consumidor de que se trata de productos manipulados genticamente. Son desconocidos los efectos que tendrn estos alimentos en el ser humano ya que se trata de especies nuevas, no surgidas naturalmente.

Implicaciones ticas de la Manipulacin Gentica en Animales

Las mayores crticas se han dirigido contra la disminucin de la biodiversidad de las especies clonadas. Poblacin muy homognea, que podra sucumbir completamente ante una epidemia, pues sta afectara por igual a todos los ejemplares.

Todos los trabajos deben ser sometidos a un anlisis en el que se comparen los beneficios con el sufrimiento del animal.

Clonacin Animal

Transgnesis.
Variante de la recombinacin gentica, se interviene en el patrimonio gentico de un ser con adicin de nuevos genes y alteracin por tanto, de sus caractersticas. Se rompe totalmente la barrera natural entre las especies, y es tericamente factible insertar genes en casos que es imposible que se den en la naturaleza. La transgnesis debera considerarse ticamente ilcita debido a que supone una grave transgresin contra la naturaleza. Adems no se postulan grandes beneficios ni a corto ni a largo plazo, salvo la mera curiosidad de ver como se comporta la naturaleza en estos casos

Implicaciones ticas de la Manipulacin Gentica en Microorganismos

Manipulacin Gentica de seres vivos se crean nuevas especies. En el caso de los microorganismos se podran estar construyendo nuevos patgenos y con ello nuevas enfermedades. Proliferacin de nuevos microorganismos con caractersticas peculiares y los consecuentes peligros para la especie humana. Entre ellos figuran la introduccin de genes productores de neoplasias malignas. Es previsible la formacin de microorganismos de una virulencia extraordinaria y resistentes a la teraputica usual conocida.

Implicaciones ticas de la Manipulacin Gentica en Humanos

Mientras que los beneficios potenciales de la ingeniera gentica son considerables tambin lo son sus riesgos La ingeniera gentica ofrece a este nivel, esperanzas fundadas de que en un futuro prximo se puedan tratar con xito algunas enfermedades especficas. Dado que todas las actuaciones de la terapia gnica tienen un claro fin teraputico, a priori son moralmente lcitas. Esta licitud desaparece cuando se usan los hombres a modo de "conejillos de indias", desapareciendo el fin teraputico.

Actuaciones sobre el Genoma Humano

Se llama genoma a la totalidad del material gentico de un organismo. El genoma humano posee entre 50 000 y 100 000 genes distribuidos entre los 23 pares de cromosomas de la clula somtica humana. Cada cromosoma puede contener ms de 250 millones de pares de bases de DNA, y se estima que la totalidad de genoma humano tiene 3000 millones de pares de bases. La investigacin del genoma, representa un hecho claramente positivo. Los anlisis prenatales sirven para determinar si un embrin lleva o no una tara gentica. El estudio puede prevenir futuras actuaciones teraputicas, en este caso es ticamente lcito, porque se busca un fin teraputico en el anlisis. En algunos casos, un anlisis gentico puede tener como objetivo un tratamiento que como consecuencia del diagnstico obtenido puede conducir al aborto. Por esto para determinar la licitud de estas actuaciones hay que preguntarse cul es el fin de las mismas.

Existen diferentes argumentos que tratan de justificar la interrupcin del embarazo por motivos eugensicos: El caso de la tesis que sostiene que el nacimiento de nios minusvlidos sera irresponsable. Los nios con taras no se incluyen dentro de los nios deseados. Todas estas justificaciones y otras similares son inaceptables ya que ignoran totalmente el respeto a la dignidad de cada ser humano. La Declaracin Universal sobre el Genoma y Derechos Humanos, en el artculo 10 dice que: "Ninguna investigacin relativa al genoma humano ni sus aplicaciones, en particular en las esferas de la biologa, la gentica y la medicina, podrn prevalecer sobre el respeto de los derechos humanos, de las libertades fundamentales y de la dignidad humana de los individuos o, si procede, de los grupos humanos". Con esto se ratifica la ilicitud de las actuaciones eugensicas

Discriminacin Gentica
Se estn usando como mtodo de discriminacin, hecho que aparte de ilegal, moralmente es inaceptable. Muchas compaas de seguros estn haciendo anlisis genmicos de los peticionarios de seguros de vida. Con este fin buscan el mayor beneficio al discriminar (excluyndolos o con tasas abusivas), a los que parece que tienen alguna mayor predisposicin a enfermedades graves o a muertes prematuras. Las empresas: no contrataran a un obrero cuyos genes revelaran que concluira pronto su vida til. Las personas: podran guiarse por la gentica a la hora de escoger una pareja que encajara con ellos.

Clonacin Humana
La generacin de una entidad biolgica idntica a otra entidad: es decir, a la obtencin de seres humanos genticamente idnticos a un ser humano ya existente.

Mientras la clonacin reproductiva dejara nacer al individuo clonado, la as llamada clonacin teraputica lo habra fabricado para experimentar con l y luego destruirlo, lo cual es un acto que atenta gravemente contra el respeto debido a todo individuo humano, incluso al que es producido por clonacin

Fabricndonos
Casi sin que nos demos cuenta, los cientficos han llegado a un punto en el que no slo seran capaces de clonar seres humanos, sino que podran modificar genes en embriones para producir seres superiores.

Los problemas ticos que plantean estas tcnicas afectan fundamentalmente a la dignidad humana. Estas tcnicas plantean una serie de preguntas sobre qu significa "ser humano", sobre las relaciones familiares y entre generaciones, el concepto de individualidad y el tratamiento de los nios como objetos.

En busca de la Inmortalidad

Cientficos de la Universidad de California han conseguido multiplicar por seis la expectativa de vida de un gusano, gracias a una terapia gentica. El nematodo del experimento comparte muchas caractersticas genticas con nuestra especie, por lo que la proeza puede en principio escalarse a nivel humano y aumentar nuestra expectativa de vida hasta 500 aos sin perder la juventud.

Eugenesia

Mejoramiento del Patrimonio Hereditario

Tecnologa Segura ?

Para crear una alteracin gentica a travs de empalmes de genes es necesario romper y reconstruir directamente el cdigo gentico por procedimientos que nunca podran ocurrir en la naturaleza. Lejos de ser precisas, estas alteraciones son realmente azarosas. En la mayora de los casos, la funcin del gen que se altera no se conoce completamente, sus interacciones con otros procesos bioqumicos en el organismo son oscuras, y no se pueden predecir los efectos a largo plazo No hemos sido suficientemente advertidos por el DDT, la talidomida, dioxinas, plutonio, Chernobyl, la enfermedad de las vacas locas, las abejas asesinas, los clorofluorocarbonados, el asbesto...?

Bioindustria
La ausencia de conocimiento de peligro no debe confundirse con la ausencia de peligro. Los gobiernos tienen que comprender que estn legislando para los hijos de otras personas, no slo los propios. La responsabilidad de los cientficos En el pasado, los cientficos fueron motivados por la inspiracin del descubrimiento cientfico.. Ahora, sin embargo, la presin sobre los cientficos es econmica y es de tal magnitud que los genetistas han abandonado su preocupacin principal por la vida humana.

Reflexin Final
La sociedad tiene que promover, tambin en el mundo de la investigacin y la ciencia, valores y principios fundamentales. Los derechos humanos valen para todo hombre. La ciencia ofrece a la humanidad un nmero creciente de descubrimientos. Cada nueva frontera conquistada abre nuevas posibilidades. Orientar bien todo este cmulo de saberes depende de la

tica. No basta con ensear en la universidad lo que es posible

hacer, sino lo que es correcto. El respeto al hombre, a cada hombre, desde que inicia su existencia como cigoto hasta que muere, debe ser el criterio de discernimiento fundamental para juzgar las acciones. Fuera de ese respeto podrn darse descubrimientos importantes, pero ser mucho ms lo que se pierda. No vale la pena vivir en un mundo tcnicamente perfecto y ticamente inhumano.

GRACIAS