MATERIALES LIGNOCELULSICOS

Composicin qumica de las fibras de algunas especies vegetales no maderables

Extractivos Ceniza Fibras liberianas Lino Camo Kenaf Yute Fibras de hojas Sisal Abac Curaua Carrizos Carrizo gigante en acetona en agua Lignina Klason soluble en acido 1.6 1.5 3.0 2.8 3.0 1.4 1.6 n.d. Celulosa + hemicelulosa

1.5 2.0 1.8 2.4 1.0 0.9 1.3 4.2

0.7 0.5 1.0 0.5 0.7 0.5 5.3 1.6

1.3 1.2 1.1 0.4 2.3 1.7 5.1 8.5

2.9 4.6 11.4 13.3 5.9 7.7 4.9 24.7

92.0 90.3 81.9 81.6 85.0 85.6 92.5 49.8

Composicin qumica de pastos y algunos desechos comunes

Materia prima
Cscaras de nuez Olotes Pastos Papel Paja de trigo Desperdicios agrcolas Hojas Pelos de algodn Papel peridico Desperdicio de papel (pulpa quimica) Solidos en aguas residuales Bosta de ganado Pasto de la costa Pasto varilla Desechos de los puercos

Celulosa Hemicelulosa Lignina (%) (%) (%)

25-30 45 25-40 85-99 30 60 15-20 80-95 40-55 60-70 8-15 1.6-4.7 25 45 6 25-30 35 35-50 0 50 20 80-85 5-20 25-40 10--20 1.4-3.3 35.7 31.4 28 30-40 15 10-30 0-15 15 20 0 0 18-30 5-10 2.7-5.7 6.4 12 na

LAS MICROFIBRILLAS

La figura de arriba muestra un corazn cristalino de 5 x 3 nm conteniendo unas 48 molculas de celulosa. Al alejarse del centro cristalino, se pasa por una zona menos cristalina de hemicelulosas y celulosa no cristalina, para llegar despus a la lignina. Esta transicin gradual de la cristalinidad de lo fibroso a la matriz amorfa resulta en una gran resistencia al cizallamiento interlaminar, que contribuye a la alta resistencia a la tensin, y a la considerable resiliencia de algunos materiales lignocelulsicos. El arreglo del centro cristalino rodeado de una matriz constituye lo que se llama una microfibrilla. En la madera, stas miden 10 x 5 nm en seccin transversal. Las microfibrillas estn agrupadas en placas delgadas, llamadas laminillas, y un grupo de estas forman a su vez cada una de las capas (P, S1, S2 y S3) de la pared secundaria. La alineacin de las microfibrillas vara de capa a capa en la pared celular.

Fotografa al microscopio electrnico de barrido (SEM) de la pared secundaria S2 deslignificada de pino escocs

La orientacin de las microfibrillas es diferente en las capas de la pared celular

Una sola clula

LIGNINA

La importancia del estudio de la composicin qumica de la lignina Composicin qumica de la lignina Distribucin de la lignina en la pared celular Diferencias entre la madera de conferas y latifoliadas

EL ESTUDIO DE LA LIGNINA

Es el segundo biopolmero ms abundante en la naturaleza, despus de la celulosa

Existe una variedad importante de productos, derivados de los residuos (lignosulfonatos) de algunos procesos de pulpeo

Tiene una importancia significativa en algunas propiedades fsicas de la madera Conocimiento bsico

Proceso de lignificacin durante el crecimiento secundario de las clulas: inters evolutivo Estudio de las rutas biosintticas para aplicaciones biotecnolgicas

ADITIVOS: CROQUETAS, BRIQUETAS, BENTONITA

MATERIALES CON CONTENIDO ALTO DE LIGNINA

Se pueden soldar ms fcilmente Tienen un contenido energtico ms alto (combustible), en particular cuando se combina con un contenido menor de hemicelulosa Ms resistentes a la biodegradacin por hongos de la pudricin blanca y por ascomicetos (pudricin blanda)

e.g. Conferas

DESVENTAJAS DE LA LIGNINA EN LA UTILIZACIN DE LIGNOCELULSICOS

Ms lignina mayores requerimientos energticos en la produccin de pulpa, e.g., en

Conferas Algunas latifoliadas tropicales Latifoliadas con una relacin S:G pequea

Desventaja para la produccin de bioetanol se requiere reducir el contenido de lignina para permitir el acceso de las enzimas y/o reactivos que hidrolizarn los polisacridos

DESARROLLO TECNOLGICO

Seleccin y mejoramiento de especies para su uso energtico (pirlisis vs bioetanol) Biopulpeo y bioblanqueo: uso de microorganismos o sus enzimas

Madera biotratada para reducir su contenido de lignina

Reducir la cantidad de lignina en astillas

Disminuir consumo de agua y reactivos en el pulpeo Disminuir consumo energtico

Blanquear pulpas con enfoques menos agresivos al ambiente

Mtodos qumicos y/o enzimticos para eliminar lignina cuando se emplean lignocelulsicos en la produccin de bioetanol de segunda generacin
Ingeniera gentica de rutas biosintticas para producir individuos con menor/mayor contenido, o con composicin qumica modificada de la lignina Polmeros derivados de la lignina

Madera de Populus modificado genticamente para producir menos lignina (o lignina ms fcil de disolver)

RELACIN ENTRE EL PODER CALORFICO Y EL CONTENIDO DE LIGNINA EN 41 ESPECIES MADERABLES

5.4

5.2

5.0

Poder calorfico (kCal g-1)

4.8

4.6

4.4

4.2

4.0 15 20 25 30 35 40 45 50

Contenido de lignina (%)

Albura Duramen

Becerra & Gonzlez-Pea (2013) Biomass and Bioenergy

Lignina

Polmero tridimensional amorfo constituido por unidades de fenilpropano. ste consta de un anillo aromtico y una cadena aliftica de tres carbonos Se produce mediante la polimerizacin deshidrogenativa enzimtica Carece de unidades repetitivas regulares y ordenadas como en la celulosa

(PARNTESIS)

tRNA

AMINOCIDOS

Frmula general

triptfano

MOLCULA DE PROTENA
Molcula de glucosa

(termina parntesis)

FORMACIN DE LA LIGNINA

Polimerizacin deshidrogenativa enzimtica

Primero: se forma un radical libre

Donde R es OCH3, o H

La fragmentacin de la lignina durante la deslignificacin ocurre frecuentemente en enlaces ter: -O-4, -O-4, 4-O-5 Enlaces CC son mucho ms resistentes al ataque de sustancias qumicas que los enlaces COC Las hojosas son en general ms fciles de deslignificar

EJEMPLOS DE OLIGOLIGNOLES

Representacin de un polmero de la lignina de Populus sp.

Segn la prediccin de la resonancia magntica nuclear de la lignina

Vanholme et al. (2010) Plant Physiology 153:895-905

Polmero amorfo tridimensional

S3

Composicin quimica pared celular confera

Capa LM + P S1 S2 S3 Celulosa GGM Xylana Otros polisac. 0.9 2.6 35.7 1.5 40.7 0.1 0.9 14.9 0.6 16.5 0.3 0.9 9.0 0.4 10.6 1.6 trazas trazas trazas 1.6 Lignina 8.5 1.4 19.8 0.9 30.6

Capa Espesor (m) LM P S1 S2 S3 0.2 - 1.0 0.1 - 0.2 0.2 - 0.3 1.0 - 5.0 0.1 - 0.3

Celulosa 0 10 35 55 55

Hemicelulosa 10 20 25 30 40

Lignina 90 70 40 15 5

CONTENIDO DE LIGNINA: CONFERAS vs. LATIFOLIADAS

Conferas

Ms lignina que las latifoliadas

Especie Pinus Picea Pseudotsuga Populus Betula Eucalyptus Paja de arroz Paja de trigo Bagazo de caa Bamb

Lignina (%) 28 29 30 18 19 26 12 19 21 26

Excepcin: algunas latifoliadas tropicales

Lignina ca. 100% tipo guaiacilo

Latifoliadas

Menos lignina que las conferas Lignina: mezcla siringilo-guaiacilo

Ejemplo: Fagus sylvatica: 40:56

Diferentes tipos y contenidos segn el tipo de clulas

Parnquima: ms lignificada, mayor proporcin tipo siringilo vs. fibras Vasos: mayor proporcin tipo guaiacilo

MTODOS PARA DETECTAR, CUANTIFICAR Y AISLAR LA LIGNINA

Mtodos para detectar lignina in situ

Microscopa ultravioleta

Mtodos para detectar lignina in situ

Microscopa de fluorescencia

La lignina aparece ms fluorescente

HISTOQUMICA

Azul astra: tie la celulosa azul, slo en la ausencia de lignina Safranina: tie la lignina de rojo, independientemente de la presencia de celulosa

Deslignificacin progresiva provocada por un hongo de la pudricin blanca

La deslignificacin causada por el hongo de la pudricin blanca es menos intensa en partes de la lmina media, y mucho ms lenta en los vasos (V), lo que sugiere una proporcin ms alta de lignina tipo guaiacilo en los vasos que en las fibras.

Todas estn con rojo intenso (unas se ven ms rojas, porque son ms densas): indicativo de presencia de lignina tipo S

Mule: Rojo intenso si la lignina contiene monolignoles S, y amarillo o caf amarillento si slo contiene monolignoles G

Wiesner: Rojo ms intenso conforme se incrementa el contenido de lignina tipo G

Wiesner: Un acercamiento a los vasos. Mayor contenido de lignina tipo G en la pared de los vasos de las primeras 3 especies

MTODOS PARA DETECTAR, CUANTIFICAR Y AISLAR LA LIGNINA

Mtodos para detectar lignina in situ

Microscopa ultravioleta, fluoroscopa, histoqumica Hmedos: Klason, TFA, Runkel Analticos: Bromuro de acetilo (reaccin para cuantificar con espectroscopia UV-Vis) Bjrkman, CEL (cellulolytic enzyme lignin), MWL (milled wood lignin)

Mtodos para cuantificar la lignina

Mtodos para aislar la lignina

Anlisis estructural de la lignina: proporcin H:G:S, y frecuencia de enlaces entre monolignoles

Tioacidlisis, pirlisis-CG/MS, 2D RMN

Rencoret J (2007) Composicin qumica de 5 encinos. Tesis de Doctorado, Universidad de Sevilla, Espaa

Relaciones S/G de la lignina de la madera molida (MWL) de eucalipto obtenidas con tres tcnicas analticas degradativas

Py-GC/MS = pirlisis seguida de cromatografa de gases con espectroscopa de masas DFRC = Derivatizacin seguida de una escisin reductora (derivatization followed by reductive cleavage) Tioacidlisis = Derivatizacin de los monmeros de la lignina para ser analizados por GC

EN OTROS MATERIALES LIGNOCELULSICOS

REFERENCIAS BSICAS

Vanholme et al. (2010) Lignin biosynthesis and structure. Plant Physiology 153:895905

Heitner et al. (2010) Lignins and Lignans. Boca Ratn: CRC Press
Ek et al. (2009) Wood Chemistry and Wood Biotechnology. Berlin: Walter de Gruyter (Captulo 6: Lignin) Boerjan et al. (2003) Lignin biosynthesis. Annual Rev. Plant Biol. 54:519 546 Lin & Dence (1992) Methods in Lignin Chemistry. New York: SpringerVerlag Rowell et al. (2005) Handbook of Wood Chemistry and Wood Composites. Boca Ratn: CRC Press (Captulo 3: Cell wall chemistry)