FIZIOLOGIA SERIEI LEUCOCITARE

Leucocitele = elemente nucleate = 5000-9000/mm3 Variaii ale numrului de leucocite Leucocitoz (>10000/mm3) - fiziologic: la sugari, gravide -patologic: n boli infecioase i inflamatorii, leucemie, tumori

Leucopenie (<4000/mm3) - fiziologic: la vrstnici, n stri postinfecioase - patologic: n unele boli infecioase (ex. febr tifoid, parotidit epidemic), afectarea mduvei hematogene (prin radiaii , medicamente, substane toxice)

Clasificare granulocite: neutrofile, eozinofile, bazofile agranulocite : monocite limfocite

Formula leucocitar
Segmentate neutrofile eozinofile bazofile Limfocite Monocite

Adult 52 - 74% 0 - 4% 0 1% 25 35% 1 8%

Copil - 1 an 25 40% 1 4% 0 - 1% 50 70% 1 - 8%

FIZIOLOGIA SERIEI GRANULOCITARE

= precursori + celulelor adulte granulocitare N, Eo i B existente n mduva hematogen, snge i esuturi.

GRANULOCITOPOIEZA 1. Etapele granulocitopoiezei CSP

Celul stem mieloid Uniti formatoare de colonii (CFU) CFU-GM i CFU-G CFU-Eo CFU-B pentru neutrofil pentru eozinofil pentru bazofil. Aceste celule nu pot fi identificate din punct de vedere morfologic.

Mieloblast = celula granulocitar "cap de serie" - are capacitate de proliferare i difereniere Promielocit = cu capacitate de proliferare i difereniere

Mielocit = celul cu capacitate de proliferare i difereniere

micorarea diametrului celular, modificarea formei i structurii nucleului, granulaii specifice.

Metamielocit = celul mare , cu nucleu ncurbat. i citoplasm roz cu granulaii specifice (N, Eo, B) Nesegmentat (N, Eo, B) Segmentat = elementul final, matur al seriei - N: nucleu polilobat, citoplasm roz pal, granulaii mici neutrofile. - Eo: nucleu bilobat, granulaii eozinofile n toat citoplasm - B: nucleu reniform, granulaii bazofile mari, care acoper nucleul

CFU - GM
GM-CSF

Neutrofil segmentat

CFU - G
Nesegmentat
G-CSF

Promielocit

Mielocit

Metamielocit
Mark Cunningham

CFU - EOS
Eozinofil
IL - 5

Eos - mielocit

Eos - metamielocit

Eos - nesegmentat

Reglarea granulocitopoiezei Factorul de stimulare a coloniilor granulo-monocitare (GM-CSF) = pp. produs de limfocite T, macrofage, CE, fibroblati - stimuleaz creterea + diferenierea progenitorilor N, Eo i Mo Factorul de stimulare a coloniilor de granulocite (G-CSF) = polipeptid produs de macrofage, celule endoteliale, fibroblati - stimuleaz formarea de colonii granulocitare (N) Interleukine - IL-3 - produs de Lf T; stimuleaz producia de N i Eo - IL-4 - produs de Lf T; stimuleaz producia de B, Lf B&T - IL-5 - produs de Lf T; stimuleaz proliferarea i diferenierea i maturarea Eo, dar i formarea Lf B&T - IL-8 i IL-9 - produse de Mo, N i respectiv Lf T); stimuleaz granulocitopoieza
Hormoni: STH, PRL, TSH, h. tiroidieni i androgenii - efect stimulator ACTH, glucocorticosteroizii - efect de inhibare a Eo, Lf

GRANULOCITELE NEUTROFILE = 52-74% = F=10-15m, nucleu polilobat, citoplasm roz pal cu granulaii N.

Cinetica granulocitelor neutrofile - 3 etape:

1. Etapa medular= 14 zile - 2 compartimente de proliferare (6 zile): mieloblast, promielocit i mielocit. de maturare i rezerv (6-8 zile): metamielocit, granulocit nesegmentat i segmentat. 2. Etapa sanguin = 6-9 ore - 2 sectoare Neutrofile circulante = 1/ 2 Neutrofile marginale = celulele care ader la endoteliul venular 3. Etapa tisular = 4-5 zile - dup traversarea peretelui venulelor postcapilare prin diapedez - migreaz mucoasele tractului respirator, digestiv, urinar, piele (zone de maxim expunere a organismului cu mediul extern).

Funciile granulocitelor neutrofile 1. Fagocitoz = funcia principal, intervine n aprarea organismului contra infeciilor (= prima linie de aprare).
Atragerea N spre un focar inflamator cu exercitarea funciei - etape: 1) Atragerea (chemotaxia) - prin ageni chemotactici sau chemoatractani: bacterii i produse bacteriene complexe antigen-anticorp produi de degradare tisular (ai colagenului i fibrinei) enzime ale coagulrii i fibrinolizei mediatori ai inflamaiei: leucotriene, PAF 2) Chemotaxia = micarea direcionat ctre focarul inflamator (prin emiterea de pseudopode pe direcia de naintare.

3) Marginalizarea i aderarea granulocitelor de celulele endoteliale de la nivelul venulelor postcapilare 4) Diapedeza = traversarea printre celulele endoteliale 5) Fagocitoza propriu-zis - care cuprinde: Opsonizarea = fixarea agentului bacterian de opsonine (IgG sau fraciunea C5) din ser; favorizeaz ingestia bacteriei. Ingestia particulelor - N emite pseudopode care nconjoar particula => vezicul citoplasmatic digestiv (fagozom) - lizozomii care conin substane bactericide fuzioneaz cu fagozomul => fagolizozom => eliberarea enzimelor din lizozomi cu distrugerea agenilor bactrieni fagocitai. Digestia si bactericidia = distrugerea agentului ingerat - mecanisme oxigen-dependente: prin RLO puternic bactericizi - mecanisme oxigen-independente: sisteme bactericide neoxidante (proteaze, lizozim, lactoferin)

2. Funcie de secreie transcobalamin-I (1-globulin care transport vitamina B12) interleukine (ex. IL-1, cu rol n inducerea febrei) PG
Variaii ale numrului de granulocite neutrofile Neutrofilie - fiziologic: nou-nascut, gravide - patologic: infecii i inflamaii acute, leucemie granulocitar cronic, n intoxicaii cu substane toxice sau medicamente, n unele tumori Neutropenie - n unele infecii bacteriene i virale, inclusiv septicemii, n cazul lezrii mduvei hematogene prin radiaii, substane chimice toxice sau medicamente

GRANULOCITELE EOZINOFILE = 0-4% = F10-15m, nucleu bilobat, granulaii Eo n toat citoplasma

Cinetica granulocitelor eozinofile - 3 etape:

1) Etapa medular= 11 zile - 2 compartimente: compartimentul de proliferare (8 zile) compartimentul de maturare i rezerv (3 zile) 2) Etapa sanguin = 3-8 ore 3) Etapa tisular = cteva sptmni - ncepe dup ce eozinofilele prsesc circulaia printrun proces de diapedez - sediile preferate = organele care au o suprafa de contact cu mediul extern: piele, plmni, tract gastrointestinal.

Funciile granulocitelor eozinofile Fagocitoza - particulariti: factorii care determin chimiotaxia eozinofilului sunt: - complexele imune antigen-anticorp (deci eozinofilul are rol mai mare n reaciile imune) - fibrina, enzime proteolitice, histamina fagocitoza urmeaz aceleai etape ca la neutrofile, dar ele au o activitate bactericid mai redus dect N eozinofilele pot fagocita i bacterii sau fungi, dar sunt mai puin atrase de acestea dect neutrofilele particip la distrugerea paraziilor (chiar dac nu i poate fagocita, eozinofilul se ataeaz de acetia i elibereaz la exterior granulaiile care conin o substan cu puternic aciune citotoxic (proteina bazic major).

Variaii ale numrului de granulocite eozinofile Eozinofilie - n boli alergice (urticarie, astm bronic alergic, rinite alergice), - n boli parazitare (ex. toxoplasmaoz, lambliaz), - n afeciuni dermatologice (eczeme, psoriazis), - n leucemia cu eozinofile Eozinopenie - n condiii de stress posttraumatic, dup intervenii chirurgicale

GRANULOCITELE BAZOFILE = 0-1% = F 10-15m, cu nucleu reniform, citoplasm roz pal cu granulaii mari metacromatice, care acoper citoplasma i nucleul.

Cinetica granulocitelor bazofile - Ciclul de via al B - asemntor celui prezentat pentru N, Eo - n esuturi: piele, ci aeriene, tract gastro-intestinal, membrane bazale epiteliale i endoteliale. Funciile granulocitelor bazofile Fagocitoz, dar la o scar mai redus. Degranularea, cu eliberarea la exteriorul celulei a numeroi mediatori, fenomen cu importan n patogenia/diagnosticul unor afeciuni alergice + funcie chemotactic pentru N, Eo Variaii ale numrului de granulocite bazofile Bazofilie - n reacii inflamatorii, reacii alergice (ex. urticarie), n leucemii acute i cronice

SERIA MONOCITO-MACROFAGIC = celule specilizate n aprarea organismului, care include: precursorii din mduva hematogen monocitele din snge = 1-8% macrofagele din esuturi

MONOCITOPOIEZA - Etapele monocitopoiezei Celul stem pluripotent

Celul stem mieloid

CFU-GM, CFU-M Monoblati = celul cap de serie Promonocite = celule rotund/ovalar + nucleoli mari, nucleu mare,

Monocite = celule cu F 10-15m, cu nucleu mare, citoplasm fumurie cu granulaii fine, azurofile

CFU - GM
GM - CSF

Monocit
M - CSF

CFU - M

Reglarea monocitopoiezei Factorul de stimulare a coloniilor granulo-monocitare (GMCSF) = produs de limfocite T, macrofage, CE, fibroblati - stimuleaz creterea i diferenierea Mo (dar i a N, Eo) Factorul de stimulare a coloniilor de monocite (M-CSF) = produs de macrofage, CE i epiteliale, fibroblati - stimuleaz formarea de colonii monocitare
+

IL cu efecte asupra funciilor monocito-macrofagelor: - IL-4 - este produs de Lf T; stimuleaz producia de B i limfocite B i T, dar produce i activarea macrofagelor - IL-13 - este produs de Lf; moduleaz morfologia i activitatea monocito-macrofagelor (influeneaz exprimarea unor Ag de suprafa, producia celular de citokine, activitatea inflamatorie).

Cinetica monocitelor - 3 etape: 1) Etapa medular - monoblast - monocit: 5 zile 2) Etapa sanguin = 3 zile - 2 compartimente central, circulant marginal: celule care vor migra n esuturi (prin diapedez) 3) Etapa tisular - sub influena micromediului local - proces de postmaturaie al Mo => macrofage: - dimensiunile cresc de aproximativ 5 ori - crete capacitatea de fagocitoz - Macrofagele fixe, tisulare = o populaie heterogen de celule - Ex. celulele Kupffer din ficat
macrofagele alveolare din plmni celulele Langerhans din piele celulele microgliale din creier celulele mezangiale din rinichi, etc.

Funcii 1. Aprare = sistemul de aprare antimicrobian (imunitate nespecific) - Macrofagele fagociteaz att microbi, inclusiv microbi intracelulari (ex. bacilul tuberculozei), ct i unele virusuri i parazii cu dimensiuni accesibile macrofagelor. 2. Iniierea rspunsului imun - macrofagele funcioneaz ca celule prezentatoare de antigen: inglobeaz antigenul i l prelucreaz, expunndu-l apoi pe suprafaa lor, ceea ce permite recunoaterea antigenului de ctre limfocitele T (care recunosc numai antigene prelucrate) 3. Modularea rspunsului imun - macrofagele produc substane care stimuleaz producia de limfokine (ex. IL-1, TNF) de la nivelul limfocitelor T; limfokinele la rndul lor moduleaz activitile macrofagelor - macrofagele produc IL-1, care stimuleaz transformarea limfocitelor B n plasmocite secretoare de anticorpi

Lizozomi

Expunerea de fragmente antigenice pe suprafa Prezentare Ag Pentru Lf

Fagocitoza microb

Macrofag

Degradare agent bacterian sub aciunea hidrolazelor lizozomale

Fagozom

Fagolizozom

4. Fagocitoza elementelor figurate - macrofagele de la nivelul splinei - rol n eritrofagocitoz. ndeprtarea L i T alterate - prin mecanisme similare. - macrofagele din mduv i ficat - rol n eritrofagocitoz 5. Funcie secretorie i de modulare a reaciei inflamatorii - secret mediatori pro-inflamatori: PG, PAF, enzime proteolitice - secret IL-1 i factorul de necroz tumoral (TNF) care provoac febra (aciune asupra c. reglator al to din hipotalamus) - secret factori care stimuleaz formarea granulocitelor i monocitelor (GM-CSF, G-CSF, M-CSF), precum i a limfocitelor (IL-1, IL-6, TNF)
Variaii ale numrului de monocite Monocitoza - boli infecioase (ex. endocardita bacterian, tbc, febr tifoid), convalescen dup boli inf. acute, neoplazii Monocitopenie - dup corticoterapie, n aplazia medular

SERIA LIMFOCITAR = 25-35% = componenta celular major din esuturile limfatice = celule mici/mijlocii/mari, n funcie de gradul lor de maturare; nucleul mare, rotund, citoplasm redus, culoare albastru deschis. !recircul ntre snge i organele limfatice

Dezvoltarea limfocitului B - Mduva hematogen -> snge i limf >organe limfoide periferice (ganglioni, splin) - 2 etape 1. Etapa antigen-independent 2. Etapa antigen-dependent

1. Etapa antigen-independent CSP IL-4 celul stem limfoid

celula progenitor B (cap de serie)

celula pre - B
IL-4 celula B imatur celula B matur Celula B matura prsete mduva hematogena , ajunge in snge si limfa = celula B de repaus (naiv), unde va ntlni Ag

1. Etapa antigen-dependent celula B matur contact cu ANTIGEN imunoblast

plasmocit Ac specifici celula B cu memorie la o nou ntlnire cu acelai antigen, se transform rapid in plasmocit Ac specifici - Producia de celule B mature este foarte mare = 2 x 107 celule/zi - Dintre celulele B mature: - o parte recunosc Ag => etapa Ag-dependent - o parte triesc cteva zile si apoi mor

Dezvoltarea limfocitului T
Originea: MRH CSP
citokine celula progenitoare Maturarea : celula progenitoare migreaz in corticala n timus externa a timusului= faza de evoluie protimic celula protimic (cap de serie a Lf T) celula migreaz in medulara timusului = = faza de evoluie timic limfocit T matur Lf T helper 2 subpopulaii Lf T citotoxice - Lf T mature circul n snge, limf , ajung n esuturi unde supravegheaz prezena Ag i i realizeaz funciile.

Subpopulaii de limfocite T 1.Limfocite T citotoxice = Lf T efectoare, mediaz rspunsul imun celular - intervin n: -citoliza celulelor infectate cu ag. patogeni intracelulari (virusuri) - citoliza celulelor neoplazice 2.Limfocite T helper - sunt limfocite reglatoare, care moduleaz activitatea Lf B i T - recunosc Ag prelucrat de macrofage i alte celule prezentatoare de antigen - coopereaz cu Lf B => favorizeaz activarea, proliferarea, diferenierea Lf B

Reglarea formrii de limfocite - citokine IL-1 - este produs de monocite; stimuleaz producia de limfocite IL-4 - este produs de limfocitele T; stimuleaz producia de bazofile i limfocite B i T IL-5 - este produs de limfocitele T; stimuleaz formarea limfocitelor T i B. IL-6 - este produs de macrofage, celule endoteliale, fibroblati, limfocite T; induce proliferarea limfocitelor T i B (efect sinergic cu IL-4) IL-7 - este produs de celulele stromale medulare; este factor de cretere a CFU-B i T IL-9, IL-13 - sunt produse de LfT; stimuleaz formarea de limfocite T i respectiv B IL-11 - este produs de fibroblati; stimuleaz formarea limfocitelor B

Funciile limfocitelor 1. Rol n imunitatea mediat umoral Rspunsul imun umoral - scop: eliminarea Ag patogen extracelular - const n producia crescut de Ig specifice Ag invadatori.
In rspunsul imun umoral participa urmtoarele celule: - macrofagele, care funcioneaz ca celule prezentatoare de antigen (APC) profesionale (fagociteaz Ag, l procesez, adic l fragmenteaz n peptide care sunt exprimate pe suprafaa macrofagelor i recunoscute specific de catre Lf Th => Lf Th se activeaz i poate declana o cooperare cu Lf B => stimularea produciei de Ig) - limfocitul B, care funcioneaz ca celul productoare de Ig ca urmare a diferenierii in plasmocite, dar i ca APC

Cinetica rspunsului umoral 1.rspunsul imun umoral primar (RIUP) - primul contact cu un Ag exogen => RIUP = producere de plasmocite secretoare de Ig i Lf B cu memorie - se secret predominant Ig M, apoi dac Ag persist apar Ig G. 2.rspunsul imun umoral secundar - Celulele B cu memorie produse in RIUP - rol predominant; - au durat de viaa crescut (luni-ani) - sunt cantonate in org. limfoide periferice (gg. limfatici, splina). - La rentlnirea cu acelai Ag => proliferarea i diferenierea cel. B cu memorie => plasmocite => producie rapid de Ig specifice (IgG, dar poate exista o comutare spre toate cele 5 clase de Ig)

2. n rspunsul imun celular - intervin limfocitele T, care au rol n citotoxic fa de celule infectate cu virusuri, celule neoplazice - Mecanism: Lf Tc recunoate Ag exprimate de celule i apoi Lf T citotoxice elibereaz coninutul granulelor (cu mediatori citotoxici) => distrugerea celulei int 3. Funcie secretorie - secreie de citokine (limfocitele T produc IL-3, 4, 5, IL-9, GM-CSF) - secreie de anticorpi (limfocitul B activat) Variaii ale numrului de limfocite Limfocitoz - n infecii virale (ex. mononucleoza infecioas, rujeol, rubeol, varicel), infecii cronice (ex. tbc), neoplazii (limfoame) Limfopenie - HIV, tratamente cu citostatice