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Fundamentos da Espectrofotometria
Melhor maneira de cutucar uma molcula por meio de radiaes eletromagnticas (Luz). (Souza, 2008) A espectrofotometria faz parte da classe dos mtodos analticos que baseiam-se na interao da matria com a energia radiante.
Luz incidente Luz emergente
Luz absorvida
Fundamentos da Espectrofotometria
Propriedades da Luz
Fundamentos da Espectrofotometria
Absoro da Luz
Espectro Eletromagntico
Fundamentos da Espectrofotometria
Absoro de Radiao Eletromagntica
Fundamentos da Espectrofotometria
Porque ocorre o fenmeno da absoro?
TRANSIES ELETRNICAS
Molculas que apresentam eltrons que podem ser promovidos a nveis de energia mais elevados mediante a absoro de energia.
ROTACIONAL E VIBRACIONAL
Por este motivo no se observa uma linha de absoro ntida, mas sim uma banda de absoro.
Fundamentos da Espectrofotometria
Fundamentos da Espectrofotometria
H dois requisitos que devem ser observados para que uma determinada radiao possa ser absorvida por uma molcula:
1. A radiao incidente deve ser de frequncia equivalente aquela rotacional ou vibracional, eletrnica ou nuclear da molcula;
2. A molcula deve ter um dipolo permanente ou um dipolo induzido, ou seja, deve haver algum trabalho que a energia absorvida possa fazer.
Espectros de absoro diferentes substncias (1: bacterioclorofila; 2: clorofila a; 3: clorofila b; 4: ficoeritrobilina; 5: beta-caroteno)
Teoria da Espectrofotometria
Lei de Lambert
Io
1 cm
Io
3 cm
I = Intensidade da luz transmitida Io = Intensidade da luz incidente k = constante nominada coeficiente de absoro e que depende do meio absorvente empregado l = Espessura do meio absorvente
I = Io 10-Kl
Teoria da Espectrofotometria
Lei de Beer
Io
soluo 10 g/l
I = Intensidade da luz transmitida Io = Intensidade da luz incidente k = Constante denominada coeficiente de absoro c = Concentrao do meio absorvente
Io
soluo 20 g/l
I = Io 10-Kc
Teoria da Espectrofotometria
Lei de Beer-Lambert
A espectroscopia de absoro molecular est baseada na medida de absorbncia (A) ou transmitncia (T), que esto relacionadas atravs das equaes:
Teoria da Espectrofotometria
Lei de Beer-Lambert
A absorbncia muito importante porque ela diretamente proporcional concentrao, c, de espcies absorventes de luz na amostra
a. Luz Fonte de energia radiante capaz de emitir uma mistura de comprimento de onda; b. Fenda de entrada; c. Prisma ptico; d. Fenda de sada; b + c + d = Monocromador usado para isolamento da poro desejada do espectro; e. Porta cubeta recipiente onde se coloca a cubeta contendo a soluo a ser medida; f. Detector utilizado para receber a energia radiante transmitida atravs da soluo e transform-la em energia eltrica; g. Circuito medidor ou Galvanmetro recebe energia eltrica emitida pelo detector apresentando-a ao operador sob uma forma til de medida.
Fontes de Radiao
Sistema ptico
Celas de Medidas
Detectores
Detectores
Espectrofotmetros Portteis
Anlises Quantitativas
Anlises Quantitativas
Anlises Quantitativas
Titulaes Espectrofotomtricas
Anlises Qualitativas
3,2
D
C5H11 C5H11 OH R OH
3,0
Log
2,8
R OH
A ou B
2,6
(A)
(B)
OH C5H11
2,4
C5H11
2,2
OH
2,0 240 250 260 270 280 290 300
OH (C)
OH
(D)
OH
Referncias
http://bio-trabalho.blogspot.com.br/2011_11_01_archive.html Acessado em 16 de outubro de 2013.
http://wikiciencias.casadasciencias.org/wiki/index.php/Lei_de_Lambert%E2%80%93Beer Acessado em
16 de outubro de 2013. http://profs.ccems.pt/PauloPortugal/CHYMICA/Intermoleculares/Intermoleculares.htm Acessado em 16 de outubro de 2013.
Obrigado!