Coliformes, Coliformes Fecales and E.

coli
Laboratorio de Microbiologia de Alimentos

Coliformes
Aerobicos y facultativos anaerobicos Gram negativo No formadores de esporas Forma de bacilo Fermentan lactosa, con produccion de
acido y gas dentro de 48 hr a 35 C

Coliformes- Porque son importantes

Organismo indicador (no

necesariamente un patogeno)
Coliformes fecales
Potencial contaminate en carne

Patogeno potencial
Enterobacter en formula de infantes

Coliformes no fecales agua, suelo,

ambiente

Mtodos para Detectar Coliformes

MPN

Basado en probabilidad estadistica NO es contaje directo Tcnica lquida Contaje directo en medio

Slido

Coliforms

MPN - Continuacin
El objetivo es diluir el organismo Seleccione la muestra ms diluda con todos los tubos positivos y los prximos dos

3,2,1 Nuestra combinacin

Determine el MPN utilizando la tabla de

MPN

Coliformes

MPN
Puede tambien utilizarse 5 tubos para
MPN Aumenta la exactitud EXACTITUD Cuan cercano a los valores reales PRECISION Cuan cercano son los nmeros uno al otro Asegrate de usar la tabla apropiada

Se asume en MPN
Distribucin al azar de la bacteria Los organismos no se aglutinan Si hay un microorganismo presente,

crecera Existen las condiciones apropiadas para crecer

Ventajas sobre el uso de placas

El tamano de la muestra puede ser
mayor Mejor para nmeros bajos de organismos El medio lquido es ms suave para el organismo porque no se expone al calor Requiere preparacin de medio con antelacin

Medio - LST
Lauryl Sulfate Tryptose Broth Prueba PRESUMPTIVA para coliformes

Se informa como presumptive coliforms/g

Ingredientes

Lauryl Sulfate Algunas bacterias no pueden crecer - Selectivo Lactosa Produccin de gas Diferencial w/durham tubo NaCl Aumenta razn de reproduccin Tryptona Fuente de Nitrgeno

Incube a 35 C por 48 horas

Medio - BGLB
Brilliant Green Lactose Bile Incube a 35 C por 48 horas Produccin de gas Positivo Ingredientes

Oxgall forma de bilis Brilliant Green Dye Inhibe Gram +

Resultados son coliformes confirmados No utilize BGLB directamente Altamente

inhibitorio

Medio EMB Agar

Eosine Methylene Bule Agar Placas ya servidas Estriado para aislar del MPN Ingredientes - Diferencial

Peptona Proteina Lactosa Produccion de acido Tinte Eosine Inhibitorio Azul de metileno Indicador de pH
Nucleated, dark centered, with or without a metallic green sheen CONFIRMED COLIFORMS

E. coli and Enterobacer

Coliforms

Coliforms

Mtodo Slido
VRBA

Violet Red Bile Agar

Peptone Nitrogen Source

Lactose Acid Production

Neutral Red Indicator (6.8 red, 8.0 yellow) Crystal Violet Inhibits Gram + NaCl Increase Growth Rate Bile Salts

VRBA
Tpica Rojo-prpura, Colonias
Elpticas, puede ser una zona de precipitacin Se recomiendan placas con 10-100 colonias Colonias ms grandes Ponga una capa de agar luego que la primera solidifique Resultados Presumptive Coliformes

Coliformes