FACULTAD DE MEDICINA HUMANA DEPARTAMENTO ACADMICO DE CIENCIAS BSICAS MDICAS BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

Organelas Bioenergticas: Mitocondrias y cloroplastos

Blga. Milagros Quintana Cceda, MSc.

Mitocondrias
Blefaroplasto, condrioplastos, condriosomas, grnulos fucsinoflicos, mitogel, cuerpos parabasales, vermculas, sarcosomas, cuerpos intersticiales, plasmosomas, plastocondrios, bioblastos, etc. Carl Benda,1889, denomin as a grnulos que brillaban en tinciones de cristal violeta y alizarina. Hogeboon, Schneider y Palade,1948, establecen que es el lugar de la respiracin celular. M. Nass y S.Nass, 1963, presencia de ADN. Encargados de suministrar la mayor parte de la energa necesaria para la actividad celular. En organismos eucariota (hongos, animales y plantas). Estructuras mviles y muy plsticas que se deforman, se dividen y fusionan. Normalmente se las representa como Cilindros alargados. Ocupan el 25% del volumen celular Desplazamiento asociado a los microtbulos Pueden formar largos filamentos o cadenas mviles. Posee un sistema gentico propio.
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Mitocondria: Estructura y Composicin

Tamao: Longitud: 0.5 10 m Dimetro: 0.5 1 m N/clula: 1 1000 Condrioma celular: conjunto de mitocondrias en la clula.
Ejm. Hepatocito de 1000 2000 mitocondrias (1/5 del vol.celular).

Estructura: Membrana interna (Crestas) Membrana externa Espacio Intermembranoso Matriz Composicin Molecular: Protenas y fosfolpidos de las membranas son muy diferentes.
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ATP Sintasa (F F ) Cresta 0 1

Membrana Externa (bicapa lipidica) 50% de protenas, 50% lpidos Permeable a iones, molculas 5Kd (metabolitos, polipptidos) Contiene enzimas implicados en sntesis de lpidos. Membrana Interna (altamente selectiva) Impermeable a molculas 5 Kd y iones, incluido H+
Contiene:

80% protenas, 20% lpidos de los cuales 10% es cardiolipina Transportadores de la cadena de electrones (Complejo I-IV) Otros Transportadores de membrana. Traslocasa ADP-ATP Difosfatidilglicerol (DPG) ATP Sintasa (F0F1)
Cardiolipina

Ribosomas
Canales Porina VDAC
Canal Anionico Dependiente de Voltaje

Espacio Intermembranoso
Contiene Citocromo c Enzimas dependientes de ATP para fosforilar otros nucletidos. (adenilato quinasa, creatinina quinasa) Carnitina

Matriz Contiene: Complejo Piruvato DH Enzimas del Ciclo cidos Tricarboxilicos Enzimas - oxidacin Enzimas de oxidacin de Aminocidos Ribosoma, ADN Muchas otras enzimas ATP, ADP, Mg+2, Ca+2, K+ Muchos intermediarios metablicos 4 solubles

Mitocondria: Funciones
Produccin de la Energa Respiracin celular Integracin del metabolismo de los azcares Oxidacin del piruvato Metabolismo de los cidos grasos y esteroides Metabolismo de los aminocidos Ciclo de los cidos tricarboxilicos (Ciclo de Krebs) Fosforilacin oxidativa para obtencin de ATP Termognesis
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Vas Metablicas en la Mitocondria

ANT= Translocador
de nucletido de adenina CACT= Translocasa carnitina acilcarnitina CPT= Carnitina palmitoil transferasa DIC= Transportador de Dicarboxilatos ETF= Flavoprotena transportadora de electrones ETF-DH= deshidrogenasa transportadora de electrones PDHC= Complejo Piruvato deshidrogenasa TCA= cidos Tricarboxlicos (Ciclo Krebs)

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Complejos Multiprotecos del Transporte de electrones en la Cadena Respiratoria

COENZIMA Q:

10 unidades de isoprenos en mamferos y 6 unidades en bacterias. Acepta electrones del NADH y del Succinato

Citrocomo Oxidasa (Complejo IV)

Fo-F1 ATP sintasa (Complejo V)

Succinato Deshidrogenasa (Complejo II)

Coenzima Q Oxido-reductasa y Citocromo c reductasa (Complejo III)

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Complejos Multiprotecos en el ensamblaje respiratorio

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Determinacin del Transporte de Electrones de la Cadena Respiratoria

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Translocacin de protones a travs del gradiente de la membrana interna mitocondrial

NAD
+

NAD+

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Membrana externa

Quimiosmosis
Es el termino dado al proceso donde los protones atraviesan una membrana a travs de una gradiente electroqumico de protones. El protn usa un complejo proteico integral de membrana llamado Complejo FoF1. Este complejo contiene una enzima que liga ADP a Pi y sintetiza ATP. La energa necesaria para esta reaccin es obtenida de la difusin de protones a travs de la gradiente de concentracin, desde que este es un proceso exergnico 12

Membrana interna

ATP
Matriz Quimiosmosis

H+

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ATP
Los enlaces fosfoanhidridos del ATP representan el Potencial Qumico de Energa. Los dos enlaces fosfoanhidridos terminales, son conocidos como enlaces de alta energa, por que cuando se hidrolizan ellos liberan una gran cantidad de energa. La energa liberada se utiliza para: transporte activo, contraccin muscular, movimiento celular, movimiento intracelular de organelas y cromosomas.

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Sntesis de ATP
Hay muchas vas metablicas por la cul clulas de organismos heterotrficos pueden sintetizar ATP.

MECANISMO: Fosforilacin a nivel de sustrato (Gluclisis y Creatina fosfato) Quimiosmosis

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Termognesis
Capacidad de generar calor en el organismo debido a reacciones metablicas.

La disipacin de calor equilibra esta generacin de energa interna dando lugar a una homeostasis trmica (equilibrio trmico) en las clulas (37C en el hombre) La termognesis puede ser inducida por dieta (alimentos con capacidad termognica) Si la energa contenida (como grasa, protena y glucgeno) no se ve alterada (Almacenamiento de Calor=0) la energa entrante es igual a la que sale, y por lo tanto se produce un equilibrio energtico. Si la prdida de calor es alta (aumento de la termognesis) hay disminucin en el almacenamiento; si es baja, el almacenamiento se activa ( capacidad de almacenar grasa,glucogeno, etc.)
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Flagelo

Espacio Extracelular

Rotacin del flagelo bacteriano

Gradiente de protones a travs de la membrana plasmtica es utilizada para:

Impulsar la sntesis de ATP. Transporte de metabolitos. Rotacin del flagelo para desplazarse.

Membrana bacteriana externa

Membrana bacteriana interna (Membrana plasmtica)

Estativo Proteico

Rotor Proteico

Bomba de protones

Motor flagelar girando a ms de 100 revoluciones por segundo

Citoplasma

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ADN Mitocondrial
ADN es circular, bicatenario, cerrado, sin extremos. En los seres humanos tiene un tamao de 16569 pares de bases, conteniendo un pequeo nmero de genes (que codifican para13 protenas mitocondriales y algunos ARN) distribuidos entre la cadena H y la cadena L. Cadena H: Composicin en bases (total bases: 16569): 4096 A ; 2171 C ; 5180 G ; 5122 T. Peso molecular: 5168.726 daltons Cadena L: Composicin en bases (total bases: 16569): 5122 A ; 5180 C ; 2171 G ; 4096 T. Peso molecular: 5060.609 daltons. Cada mitocondria contiene entre 2 y 10 copias de la molcula de ADN.
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Caractersticas Especficas de la Gentica Mitocondrial

Localizado en un organelo citoplasmtico Herencia materna Segregacin mittica Alta velocidad de mutacin No presenta intrones Poliplasmia (alto nmero de copias

16,569 pb

Mapa gentico del DNA mitocondrial humano. se representa las dos hebras del DNA con los genes que codifican: rRNA (12s y 16s), tRNA, sealados con la abreviatura del aminocido que transportan, y secuencias codificadoras de protenas (CO: subunidades citocromo c oxidasa; cyt b: citocromo b y ND: subunidades de NADH deshidrogenasa). H1, H2 y L indican los lugares de iniciacin de la transcripcin de las hebras pesada y ligera, respectivamente. OH y OL simbolizan los orgenes de replicacin de la cadena Blga. Milagros Quintana Cceda MSc. 18 pesada y ligera

En el ADN mitocondrial humano estn codificados 37 genes (frente a los 20,000 25,000 genes ADN cromosmico nuclear): 2 ARNr ribosmicos, 22 ARNt de transferencia y 13 ARNm para protenas que participan en la fosforilacin oxidativa
genes que codifican el complejo I de NADH deshidrogenasa genes que codifican el complejo IV de citocromo oxidasa genes que codifican el complejo V (ATP-sintasa) genes que codifican el complejo III (ubiquinona-citocromo b oxido-reductasa) Blga. Milagros Quintana Cceda MSc.

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rganos afectados por las patologas mitocondriales

La funcin de los complejos de la fosforilacin oxidativa pueden sufrir alteraciones por defectos en el ADNn o/y en el ADNmt; lo cual afecta la produccin de ATP que traer como consecuencia el dao a diferentes rganos.
Adapted from Johns, DR: Mitochondrial DNA and Disease. The New England Journal of Medicine; 333: 638-644, 1995.
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rganos afectados por las patologas mitocondriales

ORGANO

AFECTACIN Retraso en el desarrollo, retardo mental, demencia, convulsiones, desrdenes neuro-psiquitricos, parlisis cerebral atpica, migraas, infartos. Debilidad, dolor nueroptico, ausencia de reflejos, problemas gastrointestinales (reflujo gastroesofgeo, vaciado gstrico retrasado, constipacin, pseudo obstruccin), desmayos, ausencia o exceso de sudor relacionados con problemas de regulacin de la temperatura.

Cerebro

Nervios

Msculos
Riones Corazn Hgado Ojos Odos Pncreas Sistmico

Debilidad, hipotona, calambres, dolor muscular.

Desgasta proximal renal tubular que provoca prdida de protenas, magnesio, fsforo, calcio y otros electrolitos. Defectos en los conductos cardiacos (bloqueos del corazn), cardiomiopata. Hipoglicemia (niveles de azcar bajos en la sangre), falla del hgado. Prdida de visin y ceguera. Prdida auditiva y sordera. Diabetes y falla pancreattica exocrina (incapacidad para generar encimas digestivas). Incapacidad para subir de peso, corta estatura, fatiga, problemas respiratorios incluyendo sofocamientos intermitentes.
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Pueden ser causadas por mutaciones puntuales: sustitucin, insercin o deleccin En la base de secuencias codificadoras.
Factores: Naturaleza de la mutacin Grado de heteroplasmia Requerimientos energticos del tejido Capacidad del tejido para reparar el dao.

Enfermedades Mitocondriales

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Las mutaciones que ocasionan enfermedades se indican con el nmero de la pareja de bases (p.e. MELAS 3243)
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Grupo

Nombre de Enfermedad
Neuropata ptica hereditaria de Leber (LHON) Sndrome de Neuropata, ataxia y retinoplasta pigmentaria (NARP) Sndrome de Leigh de herencia materna (MILS)

Mutacin ADNmt
G3460 A G11778 A T14484 C T8993 G

Gen Afectado
ND1 ND4 ND6 ATPasa 6

Caracterstica de la enfermedad
Perdida visin central. Neuropata perifrica Ataxia cerebral Debilidad muscular neurognica Ataxia Retinitis pigmentosa Demencia Retraso desarrollo Degeneracin multisistmica Ataxia Convulsiones Neuropata perifrica. Epilepsia mioclnica. Convulsiones Miopata Demencia Sordera Neuropata

T8993 G T8993 C

ATPasa 6 ATPasa 6

Mutaciones Puntuales en ADNmt

Sndrome de Epilepsia mioclnica con fibras rojo-rasgadas (MERRF)

A8344 G T8356 C

tRNALis tRNALis

Sndrome de encefalomiopata mitocondrial con cidosis lctica y episodios de accidentes cerebro-vasculares (MELAS)
Diabetes de herencia Materna con sordera.

A3243 G C3256 T T3271 C T3291 C T9957 C

A3243 G Deleccin nica Delecin 5000pb

tRNALeu tRNALeu tRNALeu tRNALeu CO III

tRNALeu

Convulsiones generalizadas. Dolor de cabeza. Sordera Demencia

Sordera Anemia macroctica Muerte Oftalmoplejia, retinitis pigmentosa Dolor neuralgico y debilidad Disfagia, ataxia Muerte prematura

Reorganizaciones en el ADNmt

Sndrome de mdula sea-pncreas de Pearson Sndrome de Kearns-Sayre (SKS)

Deplesiones ADNm

Relacionada con el nmero de copias del ADNmt por mutaciones en genes del ADNn.

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Organelas bioenergticas
son presentes en Animales Vegetales formados por Matriz contiene Membrana Membrana Mitocondrial externa Mitocondria interna posee Protenas transmembrana Como la Porina Procesos metablicos presenta Crestas mitocondriales Tilacoides poseen contiene Estroma

Mitocondrias
formadas por

Cloroplastos

contiene

ADN mitocondrial Mitorribosomas Enzimas

los pequeos forman la Grana

Membrana Membrana Plastidial interna Plastidial externa

posee

ADN plastidial Plastorribosomas

Pigmentos fotosintticos absorben la

Protenas translocadoras

Enzimas

contienen

Energa Transportadores ATP-sintetasa luminosa de electrones donde se base para se sintetiza realizar la encuentran en la

como Carotenoides

liberan
oxidacin ac. grasos Ciclo de ATC

ATP mediante

Clorofila

Biosntesis Cadena Quimismosis respiratoria protenas

Fotosntesis 24

PLASTOS
Estructuras membranosas de composicin qumica lipoproteica, que en su interior pueden contener pigmentos, enzimas y/o iones. Se encuentran en el citoplasma de las clulas tanto de algas como de plantas. Sirven como almacn de protenas, lpidos o almidn (leucoplastos) , o bien de pigmentos (cromoplastos). Los plastos se clasifican en: Leucoplastos, formados por una membrana; Cromoplastos, que almacenan pigmentos rojo, amarillo y anaranjado; Cloroplastos, que en su interior encontramos la grana, intergrana y los tilacoides, dentro de los cuales esta contenida la molcula de clorofila
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Cloroplasto
Realizan fotosntesis en horas de luz. Son descendientes de bacterias fotosintticas productoras O2 Miembro ms destacado de la familia de los plastidos . Todos los plastidos de una misma especie contienen mltiples copias del mismo genoma. Rodeado por envoltura de membranas. Realizan sus interconversiones energticas mediante mecanismos quimiosmticos.
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Cloroplasto: Estructura
Hoja Cloroplasto
Epidermis superior (haz)

Contiene: Enzimas metablicas; RNA, ADN, ribosomas; Lpidos, grnulos de almidn y otras Estroma sustancias

Grana

Grana

Membran a Membran tilacoidal Membrana externa Altamente a interna Espacio Intermembrana permeable (Porinas) Epidermis inferior (envs) Menos permeable Contiene protenas de transporte. Delimita al estroma

Espacio tilacoidal

Cadena de transporte de eSistema de captacin de luz ATP sintasa 27

Cloroplasto: Funciones
Realizar la fotosntesis que comprende: Reacciones fotosintticas de transferencia de electrones Fase luminosa: Se realiza en la membrana de los tilacoides, donde se halla la cadena de transporte de e- y la ATPsintasa responsables de la conversin de la energa lumnica en energa qumica (ATP) y de la generacin del poder reductor (NADPH). Reacciones de fijacin de Carbono Fase oscura: Se produce en el estroma, donde se halla el enzima Ribulosa-1,5-difosfato carboxilasa oxidasa (RuBisCO), responsable de la fijacin del CO2 mediante el Ciclo de Calvin. Blga. Milagros Quintana Cceda MSc.
Cloroplasto
Reacciones fotosintticas de transferencia de e- en la Membrana Tilacoidal

Reacciones de fijacin de C en el estroma

Azcares, Aminocidos, cidos grasos

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Reacciones Fotosintticas de transferencia de eEn los cloroplastos, los pigmentos fotosintticos (clorofila a, clorofila b y carotenoides) son encerrados en estructuras de membranas llamadas Fotosistema I (PSI) y Fotosistema II (PSII). Los e- son transportados de PSII a PSI va la cadena de transporte de e-.
Espacio Tilacoide

ADP + Pi ATP Estroma

Estroma

Fotosistema II

Fotosistema I

Los fotones inciden sobre PSII, excitando y liberando 2 e-, que pasan al primer aceptor de e-, la feofitina. Los e- los repone el primer dador de e-, el dador Z, con los e- procedentes de la fotlisis del agua en el interior del tilacoide . Los protones de la fotlisis se acumulan en el interior del tilacoide, y el O2 es 29 liberado.

Variaciones de Potencial redox durante la fotosntesis

Fase luminosa aciclica (FS II y FS I) Fotolisis del agua, produccin de ATP y NADPH Fase luminosa ciclica (FS I) Genera solo ATP

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Reacciones de Fijacin de Carbono

Ribulosa 1,5 diP compuesto rico en energa favorece la fijacin del CO2. Se requiere 2 NADPH y 3 ATP Se produce gliceraldehdo 3-P que puede transformar en Fructosa 6-P y glucosa. Se forma Sacarosa que luego se transporta desde las hojas a toda la planta. El gliceraldehdo que se queda en el cloroplasto es transformado en almidn.
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3 Molculas de CO2 se fijan y dan una produccin neta de 1 molcula de 3-fosfato y un costo neto de 9 molculas de ATP y 6 molculas de NADPH

Azcares, Aminocidos y cidos grasos

La fijacin del CO2 ocurre en tres estados

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Reduccin del 3PG

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Otras funciones de los cloroplastos

Sntesis de cidos grasos y aminocidos en el estroma El poder reductor impulsa la reduccin de nitritos (NO2- a amoniaco (NH3), necesario para sntesis de aminocidos y de nucletidos.

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Teora endosimbitica
Hace unos 1.500 millones de aos, una clula procariota capaz de obtener energa de los nutrientes orgnicos aprovechando como oxidante al O2 fue fagocitada por otra clula procariota o eucariota primitiva sin ser digerida inmediatamente, fusionndose en un momento de la evolucin. Simbiosis : la procariota fagocitada proporcionaba energa (ATP )y la clula hospedera ofreca un medio estable y rico en nutrientes. Este mutuo beneficio hizo que la clula invasora se convirtiera en parte del organismo mayor: la mitocondria. Factores que apoyan esta teora: Bacterias y mitocondrias tienen en comn: el tamao, la estructura, componentes de su membrana, la forma en que producen energa, etc. Las mitocondrias poseen su propio ADN y est recubierta por su propia membrana. El cdigo gentico del ADN mitocondrial no suele ser el mismo que el cdigo gentico del ADN nuclear. A lo largo de la historia comn la mayor parte de los genes mitocondriales han sido transferidos al ncleo, de tal manera que la mitocondria no es viable fuera de la clula husped y sta no suele serlo sin mitocondrias.
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rbol filogentico de la probable evolucin de los cloroplastos y mitocondrias

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