Boas Prticas Laboratoriais

Preparo de solues

Disciplina de Reumatologia 2011

http://www.ruf.rice.edu/~bioslabs/schedules/Talks/Solutions_dilutions/BIOEDmixtures.htm

O que fazer antes do preparo

Vc sabe quais so os reagentes? Todos os reagentes esto disponveis? Quanto vc vai preparar? Soluo estoque ou de uso? Vai usar algum produto txico? Veja no rtulo Que gua vc vai usar? Onde vai guardar sua soluo?

Solues
Estoque ex. tampes concentrados PBS, TBS, TAE, NaCl sempre colocar nome e concentrao do reagente, pH, quem fez e data Soluo de uso quantidade suficiente para a reao Alquotas substncias sensveis a congelamento/descongelamento

Preparo de solues
Solvente universal gua As solues podem ser: peso/volume (g/v ou w/v) x gramas de soluto em um dado volume final de soluo (ex 1g em 100ml = soluo 1%), volume/volume (v/v) x ml de soluto em x em um dado volume final de soluo (lquidos), peso/peso x gramas de soluto em 100 gramas de soluo (uso em gradiente)

Molaridade (M)
A molaridade de uma soluo indica quantos moles da substncia existem em 1 litro de soluo. O mol o peso molecular (PM) expresso em gramas e seu valor encontrado no rtulo do frasco. Massa em gramas M= PM x volume de soluo (L)

Voc sabia?
1 mol equivale ao peso de 6.022140781023 molculas do composto Esse o nmero de tomos de 12C presentes em 12g desse istopo de carbono Esse nmero conhecido como a constante de Avogadro

Ajuda dos universitrios

http://www.graphpad.com/quickcalcs/molarityform.cfm

Chemical and radiochemical data Create and convert molar solutions

Mass from volume & concentration

Concentration: Formula Weight: Volume:

millimolar milliliter

Preparar a soluo a partir de reagente slido:

Qual o peso (ou massa) molecular do reagente? Veja no frasco MW, mol wt, MMs, PM Qual o volume de soluo voc vai preparar em litros, V. Qual a molaridade da soluo, M. Calcule as gramas (g) de soluto necessrias usando a equao: g = MW x M x V
Exemplo: Preparar 800 mL de NaCl 2 M (MW = 58.45 g/mol). g NaCl = 58.45 g/mol x 2 mol/L x 0.8 L g NaCl = 93.52 g NaCl Dissolva 93.52 g de NaCl em 400 mL de gua destilada e ento adicione mais gua at completar o volume de 800 mL.

Exemplo
Preparar 200 mL de soluo 0,4M de NaCl PM de NaCl=58,43g/mol Soluo 1M de NaCl - 58,43g em 1L g=58,43g/mol x 0,4mol/L x 0,2L g=4,674g

Molaridade a partir de soluo em %

Determine a molaridade de HCl 37,2% (peso)

(densidade 1,19 g/mL. MW 36,4 g/mol). Calcule a massa de 1L da soluo = 1000 mL x 1,19 g/mL = 1190 g Calcule quanto dessa massa de HCl = 1190 g x 0,372 = 442,68 g Calcule quantos moles correspondem a essa massa = 442,68 g/36,4 g/mol = 12,1 moles Portanto a molaridade 12,1 M

Normalidade (N)
N o n de equivalentes grama (Eq) de soluto por litro de soluo. O n de Eq o mol dividido pela valncia (n de H+ ou de OH-). Ex: uma soluo 1M de H2SO4 tem 1 mol por litro (peso molecular=98g). Como so 2 H+, o Eq do H2SO4 98/2=49g. Como temos 98g do soluto, e o Eq 49g temos 2 Eq por litro e a soluo 2N. Como regra, a Normalidade a Molaridade multiplicada pela valncia.

Grau de pureza
ACS grade Mais alta qualidade possvel (often equals or exceeds the latest purity standards set by the American Chemical Society (ACS). Reagent grade Pureza geralmente semelhante ao grau ACS. Adequado para trabalho analtico e para laboratrios em geral. USP grade Pureza suficiente para passar nos testes da U.S. Pharmacopoeia (USP).

Diluies
Para diluir uma soluo acrescentamos apenas solvente, a quantidade de soluto no alterada
adicionar solvente

Soluo inicial

Diluies
A partir de uma soluo estoque mais concentrada pode-se obter uma soluo mais diluda empregando a frmula abaixo: Ci x Vi = Cf x Vf

Ci = concentrao inicial (estoque) Vi= volume da soluo inicial (estoque) Cf = concentrao final desejada Vf = volume final desejado

Diluies
Diluio 1:2 (ex.diluir soro em PBS) 1 parte do soluto (soro) + 1 parte de solvente (PBS) o volume final o dobro do inicial Diluio 1:10 1 parte do soluto + 9 partes do solvente O volume final dez vezes o volume inicial

Ateno
Em muitos protocolos encontramos: Prepare uma soluo 100mM de cloreto de clcio pH 7,5 (11,09 g de CaCl2 em 1L de gua, acertar pH com HCl 1N) Quanta gua devo colocar para dissolver o cloreto de clcio? S tenho CaCl2.2 H2O quanto devo pesar?

Acertando o pH
Cuidados ao acertar o pH
O pHmetro est calibrado? Sei calibrar? Cuidados com os padres de pH Qual cido ou base usar? Tenho as solues de cido ou base que vou usar? No? Sei preparar?

Dicas
Tris, Trizma-base, Tris-Cl o que significam? Como diluir um cido ou base concentrados?

Acessrios

Sites teis
http://www.flinnsci.com/sections/safety/che micalSafety/L10511065_HS_SOLUTION_PREP.pdf http://www.carolina.com/category/teacher+r esources/instructions+and+buying+guides/ chemistry+instruction+manuals/solution+pr eparation+manual.do