Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
Pouco Especficos
Mtodos de anlise
Analito
Aplicaes
Separao de compostos Identificao de Metablitos Pesticidas
gua
OH OH
CH3COOH
Pesquisa de Impurezas
I HO I O I
LEVOTIROXINA
I NH2 O ONa
I NH2 HO I O I
LIOTIRONINA - 20 x mais potente
O ONa
Mikhail Tswett
Espcies separadas
formao de bandas coloridas Origem ao nome
Chroma cor Graphein escrever
O que Cromatografia?
Tcnica fsico-qumica de separao!
Migrao diferencial dos componentes de uma mistura de acordo com a partio de suas molculas em duas fases de diferentes caractersticas.
O que partio?
Partio
Distribuio das molculas de uma substncia entre 2 fases com caractersticas diferentes
LEO
GUA
Fases na cromatografia
Fase mvel
Lquida Cromatografia lquida Gasosa Cromatografia gasosa
Fase estacionria
Coluna Camada Delgada
Amostra
Distribu-se entre as fases
Separaes cromatogrficas
Forada atravs de uma FASE ESTACIONRIA Imiscvel e Fixa Amostra
Camada Delgada
Cromatografia liquida
Cromatografia gasosa
Coluna
http://www.uni-regensburg.de/Fakultaeten/nat_Fak_IV/Organische_Chemie/Didaktik/Keusch/D-TLC_lipophilic_dyes-e.htm
Cromatografia Lquida
http://orgchem.colorado.edu/hndbksupport/colchrom/colchromprocmicroflash.html
Cromatografia Lquida
Primeiros trabalhos
Colunas de vidro
50 a 500 cm
Tempo de separao
Longo Vrias horas
Melhorar o processo
Aplicao de bombas de vcuo Bombeamento Perda da eficincia
HPLC
High Performance Liquid Cromatography
Escopo do HPLC
HPLC ou CLAE
Tcnica analtica de separao mais utilizada 1bilho de dlares anuais Shimadzu
R$ 169.500,00
Escopo do HPLC
Popularidade
Sensibilidade
Baseia-se
Fase mvel Fase estacionria Tipos de equilbrio
Lquido-liquido
Lquido slido ou adsoro
Troca inica
Excluso por tamanho
Troca inica
Partio/filtrao
Fase normal
Fase estacionria
Altamente polar
Slica
Fase mvel
Apolar
Hexano Clorofrmio ter isoproplico
Fase reversa
Fase estacionria
Apolar
Slica + Hidrocarbonetos
Fase mvel
Polar
gua Metanol Acetonitrila
Aplicao Universal
de todos os teste de HPLC Quase todas as molculas orgnicas possuem regies hidrofbicas e por isto interagem com a fase estacionria.
Fase reversa
Componente mais polar eluido primeiro Diminuio da polaridade da fase mvel diminui o tempo de eluio
Cromatografia de partio
Cromatografia de par inico (pareamento de ons)
Separao de espcies inicas Fase mvel
Tampo aquoso Solvente orgnico (metanol ou acetonitrila) Composto inico
Contra on de carga oposta a do analito Formao de um par inico Espcie neutra retida na coluna de fase reversa Ex: Corante Contra on (C4H9)4N+
Coluna
Suporte de slica gel Ismero
Opticamente ativo Ligado por um polmero.
Cromatografia de Adsoro
Cromatografia lquido-slido Fase estacionria
Adsorvente slido finamente dividido
Alumina Carvo Slica
Cromatografia de Adsoro
Fase mvel
Quanto mais forte for a interao entre fase mvel e estacionria, mais fraca ser a adsoro do analito.