Pigmentos vegetales

Introduccin En las plantas la luz destinada a impulsar el proceso fotosinttico es absorbida por dos tipos de pigmentos: clorofilas y carotenos, que son molculas cromforas sensibles a la radiacin luminosa y genricamente llamadas pigmentos fotosintticos. El pigmento ms importante de la fotosntesis es la clorofila, ya que es la biomolcula cromofora que interviene directamente en el proceso de absorcin y conversin de la energa luminosa, la cual posee en su estructura un anillo tetrapirrolico cclico. La principal funcin de las clorofilas es la absorcin de luz. Los carotenoides son compuestos de cuarenta tomos de carbonos que tiene una estructura principal lineal con grupos metilos laterales cada 4 tomos de carbonos. Los extremos de la molcula de un carotenoide puede formar anillos o llevar sustituyentes oxigenados. Los carotenoides con algn tipo de un grupo oxigenado se llama xantofilas, mientras que los carburos sin oxgeno son los carotenos. Para separar los pigmentos se uso una tcnica llamada cromatografa en papel. Una vez se separaron los pigmentos se realizo otro proceso para lograr medir la cantidad de longitud de ondas absorbidas y medir el espectro de absorcin.

PLANTEAMIENTO El conocimiento de la planta y su funcionamiento adquiere cada vez mayor importancia para la humanidad. En ltimo trmino la supervivencia del gnero humano depende y probablemente depender siempre del crecimiento de los vegetales. Todo el mundo est ms o menos familiarizado con ciertos aspectos de la vida de las plantas, pero pocos son los que comprenden las causas que originan numerosos fenmenos de la vida de las mismas, para lograr esos estudios es necesario recurrir a la fisiologa vegetal. En las plantas, la luz destinada a impulsar el proceso fotosinttico es absorbida por dos tipos de pigmentos: clorofilas y carotenoides, Las investigaciones realizadas para adquirir conocimiento acerca de las ondas de luz captadas se han hecho gracias a la cromatografa, que es un mtodo que se utiliza en las diferentes investigaciones para poder separar un pigmento de otro y de esta manera estudiarlos individualmente. El pigmento fotosinttico ms importante es la clorofila, ya que es la biomolcula cromofora que interviene ms directamente en el proceso de absorcin y conversin de energa luminosa. Por otro lado se encuentran los carotenoides y su principal funcin fotosinttica es proteger el aparato fotosensible mediante mecanismos de disipacin y extincin de energa. las longitudes

OBJETIVO: Comparar y medir los espectros de absorcin por los pigmentos vegetales. JUSTIFICACION: Esta investigacin se realiz con el fin de conocer ms a fondo el trabajo y la importancia de los pigmentos vegetales ya que muchos pigmentos tendran efectos beneficiosos para el desarrollo de la industria farmacutica, tecnolgica y mdica. Las dietas deficitarias en vitamina A en los nios seran causantes de ceguera y de la reduccin en la respuesta inmune, aumentando el riesgo de infecciones severas. Por eso, el desarrollo de nuevas o ms potentes fuentes de carotenoides en las hortalizas u otros productos de consumo masivo podra realizar un importante aporte en el mejoramiento de la salud humana. En este sentido, el desarrollo de variedades genticamente modificadas es una interesante estrategia. Si se maneja bien los conceptos de la absorcin de pigmentos vegetales, tambin es posible mejorar la produccin en la planta de algn pigmento en especfico que genere beneficios por ejemplo, ser capaces de generar arroz que produzca beta-carotenos (provitamina A) en el endosperma del grano, produciendo arroz dorado, y de esta manera al consumir de este arroz se podra reducir la incidencia de la deficiencia de la vitamina A. Muchas de las investigaciones sobre pigmentos en cultivos vegetales, frutas u ornamentales se realizan centradas en la funcin que desempean en la atraccin de insectos o en la preferencia visual. As mismo tambin la manipulacin gentica para lograr obtener la produccin de un pigmento en especial como ejemplos cabe mencionar el

METODOLOGIA Para obtener los resultados esperados se realizar un trabajo experimental el cual se divide en dos partes: Parte 1 : separacin de pigmentos por cromatografa. 1. tome 1 g de espinaca fresca y cortarla en pedazos pequeos. coloque en un mortero y triture por 10 segundos. 2. traslade el material a un tubo de 50 ml provisto de tapn, agregar 4 ml de acetona, tapelo y agite vigorosamente por 10 segundos.

3. djelo en reposo por 10 minutos, aada 4 ml de agua destilada y agite. 4. luego agrege 3 ml de eter de petroleo y agite de nuevo

5. deje reposar hasta que los solventes se separen y los pigmentos hayan sido extrados casi por completo en la capa (superior) de ter de petrleo. El tejido vegetal habr quedado casi blanco. 6. con una pipeta Pasteur o gotero saque la solucin superior verde oscura evite mezclar las dos capas. Esta ser la muestra utilizada. para correr la cromatografa. 7. tome una tira de papel de cromatografa y mida dos centmetros desde la parte inferior y marque un pequeo punto con lpiz (no lapicero). 8. marque un centmetro desde la parte inferior del tubo donde se va a montar la cromatografa.
9. llene un tubo capilar colocndolo dentro del extracto de pigmentos.

10. repetidamente aplique el extracto de pigmentos sobre el punto marcado anteriormente sobre el papel de cromatografa, la muestra debe ser aplicada como una solucin muy concentrada.
11. permita que la cromatografa sobre el papel filtro se seque

12. desarrolle el cromatograma usando el solvente de la cromatografa(acetona ter de petrleo) el montaje debe de quedar bien ensamblado y sellado. 13. el papel no debe tocar las paredes del vidrio porque este interfiere con la separacin. 14. deje correr la cromatografa en la oscuridad o el luz difusa, cuando los carotenos de color naranja amarillo casi han llegado a la parte superior del cromatograma (1 cm) quitarlo del tubo y marque inmediatamente la lnea del frente del disolvente antes que se seque el papel. 15. En esta mezcla de disolventes los carotenos de color amarillo anaranjado se mueve ms rpido seguido por una o ms bandas de xantofilas amarillas, las clorofilas de color verde (a y b) se mueven ms lento.

Parte 2: determinacin del espectro de absorcin de los pigmentos fotosintticos. 1. recorte las cuatro bandas principales de pigmentos de cromatografa. la banda gris oscura que aparece entre los carotenoides y las xantofilas debe ser desechada. 2. Resuspenda en tubos por separado las clorofilas a y b agregando dos mL de acetona y los carotenos en 2ml de ter de petrleo. 3. cubra el cada tubo de ensayo con papel aluminio y guarde en hielo hasta que se ejecute el espectro de absorcin.

4. ejecute el espectro de absorcin de cada solucin de cada pigmento usando el espectrofotmetro, inicie las lecturas a 400 nm y lea la absorcin cada 20 nm de intervalo hasta los 700 nm, para las clorofilas, para las clorofilas a y b reduzca el intervalo a 10 nm entre 640 y 670. re calibre instrumento con cada longitud de onda usando acetona o ter de petrleo como blanco de acuerdo al caso

MARCO TEORICO. Para que se realice una transformacin de la energa luminosa a energa qumica es necesaria la absorcin de la luz. En las plantas esta absorcin se realiza en el cloroplasto, que son orgnulos que se encuentran aislados del citoplasma por una envoltura cloroplstica. En su interior se encuentra una sustancia llamada estroma que rodea toda la parte interior y los tilacoides formados por la membrana interna del cloroplasto, que a su vez crean sistemas enredados de membranas tilacoidales y la unin de varios tilacoides configuran Lamelas grana. En la membrana tilacoidal se encuentran los complejos encargados de la absorcin de la luz, los cuales dan lugar a los complejos pigmentoprotena. En los complejos pigmentos-protenas estn ubicados los pigmentos fotosintticos, que son molculas sensibles a la radiacin luminosa que brindan un color y que absorben la luz visible. Hay varios tipos de pigmentos vegetales

RESULTADOS Al separar los pigmentos por cromatografa en el siguiente orden: clorofila b, clorofila a, xantofilas y caroteno. Este orden se debe a la solubilidad que tiene cada pigmento en el agua, es decir el pigmento que ms distancia recorri en el papel de cromatografa , debido a que los reactivos utilizados son apolares. para lograr separar la clorofila a de la clorofila b es debido a las estructuras moleculares, aunque se parecen la clorofila a tiene un grupo metilo CH3 en la posicion donde la clorofila b tiene COH , el grupo metilo da a la clorofila a una leve afinidad por solventes no polares hidrfobos comparado con la clorofila b, esta diferencia de afinidad permite la separacin. con respecto a los carotenoides, debido a que las xantofilas, en especial contiene oxgeno en su estructura permite que sea ms polar mientras que los carotenos contiene un hidrocarburo puro, esto es lo que permite que sean separados.

Longitud de onda

Clorofila a

Clorofila b

Xantofila

Carotenoides

400 420 440 460 480 500

0,418 0,426 0,339 0,119 0,061 0,016

0,371 0,443 0,429 0,436 0,165 0,097

0,212 0,196 0,128 0,100 0,088 0,480

0,096 0,152 0,116 0,116 0,120 0,022

520
540 560 580 600 620 640 650 660 670 680 700

0,024
0,040 0,058 0,087 0,109 0,143 0,165 0,337 0,472 0,350 0,094 0,009

0,088
0,099 0,099 0,117 0,140 0,150 0,241 0,318 0,380 0,254 0,085 0,044

0,066
0,078 0,045 0,039 0 0 0 0 0 0 0 0

0,126
0,126 0,67 0,039 0 0 0 0 0 0 0 0

Bibliografia: Azcon-Bieto, Joaquin. 2000. Fundamentos de fisiologa vegetal. 1 edicin. Editorial Universidad de Barcelona. Barcelona. paginas 131 a 141 Delvin M, Robert. 1980. Fisiologia Vegetal. 3 edicion. Editorial Omega, S.A. Barcelona. Paginas 189 a 211

Gil, F. Martinez. 1995. Elementos de Fisiologia Vegetal. Editorial Mundi-prensa.

Lira S, Ricardo H. 2007. Fisiologia Vegetal. 2 edicion. Editorial Trillas. Paginas 141 a 157 Raven, P. Evert, R. Eichhorn S. 1991 .Biologa de las plantas. Editorial reverte. S.A. Barcelona. Pags 95- 115

GRACIAS