un grupo ADN

de diferentes

tipos

de hortalizas

y de la cadena de

INTRODUCCI N

La biotecnologa, juega un rol muy activo en la produccin : nuevas molculas, frmacos, qumica fina, bioingredientes, energa, alimentos y bioelectrnica La biotecnologa involucra formas vivientes activas, microorganismos, y otras entidades celulares animal y vegetal, que en conjunto ofrecen una gran biodiversidad de sistemas genmicos y metablicos . Gracias a numerosos avances cientficos en la actualidad posible efectuar mejora gentica y molecular de microbios, plantas y animales para generar biomolculas y proteinas de importancia industrial y comercial.

e s

Biotecnologa proviene de dos vocablos: Bio = vivo o viviente Tecnologa = la aplicacin de la ciencia para alcanzar objetivos industriales o comerciales. E el camp de la biologa aplicada que utiliz organismos vivos y procesos biolgicos s o a en ingeniera, tecnologa, medicina y otras reas que utilizan procesos biolgicos. L biotecnolog s refiere a toda a a e sistemas biolgicos aplicacin tecnolgica que utilice y organismos vivos o sus derivados para la creacin de producto o proceso para usos o s especficos modificacin (Convenio sobre s la Diversidad Biolgica, Artculo 2. Uso de trminos, Naciones Unidas. 1992)

Un conjunto de tcnicas que modifican

organismos vivos, transforman sustancias de origen orgnico o utilizan procesos biolgicos para producir un nuevo conocimiento o desarrollar productos y servicios (Organizacin para la Cooperacin y el Desarrollo Econmico)

El conjunt de tcnicas o procesos que o emplean organismos vivos o sustancias que provengan de ellos para producir o modificar alimento, mejorar o animale de loun que provienen planta s s desarrollars los las alimentos, o que intervenga microorganismos en los procesos de elaboracin de los n mismos (Sociedad Espaola de Biotecnologa)

CRONOLOGA DE LA BIOTECNOLO GA

CLASIFICACI DE ON LA

BIOTECNOLOG A

1. BIOTECNOLOGA se aplica a la utilizacin de biotecnologa en ROJA : mdicos. Algunos ejemplos procesos son el diseo de organismos para
producir antibiticos, el desarrollo de vacunas y nuevos frmacos, los diagnsticos moleculares, las terapias regenerativas y el desarrollo de la ingeniera gentica para curar enfermedades a travs de la terapia gnica.

2. BIOTECNOLOGA BLANCA: conocida como biotecnologa

industrial, es aquella aplicada a procesos industriales. Un ejemplo de ello es el diseo de catalizadores industriales, ya sea para productos qumicos producir valiosos oel uso de (por oejemplo microorganismos para producir un producto qumico destrui contaminantes qumicos r peligrosos utilizando enzimas como oxidorreductasas). Tambin se aplica a los la biotecnologa en la usos industria textil, de en la creacin de nuevos materiales, como plsticos biodegradables y en la produccin de biocombustibles. Su principal objetivo es la creacin de productos fcilmente degradables, que consuman menos energa y generen menos deshechos durante su produccin. La biotecnologa blanca tiende a consumir menos recursos que los procesos tradicionales utilizados para producir bienes industriales.

3. BIOTECNOLOGA es la biotecnologa VERDE, aplicadade a ello es el procesos agrcolas. Un ejemplo diseo planta de transgnic capace de crec en condicion s as desfavorables s er resistentes es ambientales o plantas a plagas y Se enfermedade qu la biotecnolog verd s. espera ms e a con el medio e produzca soluciones amigables ambiente que ejempl los mtodos tradicionales Un maz B , de unla agricultura e el transgni o o s modificado t quemaz co sus flores industrial. genticamente produce en protena Cry (Bacillus thuringiensis). As, cuando las larvas de los insectos comnmente denominados "barrenadores del tallo" intentan alimentarse de la hoja o del tallo del maz Bt, mueren. 4. BIOTECNOLOGA tambin llamada AZUL, es un trmino utilizado biotecnologa marina, para describir las aplicaciones de la biotecnologa en ambientes marinos y acuticos.

MULTIDISCIPLINARIDAD DE LA BIOTECNOLOGA
BIOLOGA CELULAR BIOLOGA MOLECULAR GENTICA MOLECULAR

INDUSTRIAS: FARMACEUTIC AS, ORRAJERA, ALIMENTARIA FERMENTACIN DE L Y QU MICA F A

BIOTECNOLOG A

INGENIERA DE PROCESO S DIAGNSTIC OS MDICOS

QUMICA BIOLOGA MICROBIOLOG A BIOQUMIC A

IMPACT DE LA BIOTECNOLOGA O APLICADA EN DIVERSOS SECTORES

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9.

L a L a L a L a L a L a L a L a L

biotecnolog y los a la industria textil y alimentos biotecnolog y la salud a y la industria del biotecnolog y el papel medio a energa y la ambiente biotecnolog y la a y qumica biotecnolog y el agro a los biotecnolog animales a biotecnolog a biotecnolog a biotecnolog

POSIBLES APLICACIONES EN OTROS SECTORES

Desarrollo de diversos tipos de enzimas y microorganismos genticamente modificados que pueden producir productos qumicos en un solo paso, algunos de ellos identificados a travs de modernos mtodos de bioprospeccin.

Biosensores para el monitoreo en tiempo real de contaminantes ambientales y tcnicas biomtricas para identificacin de personas. Biocombustibles la de alta densidad de energa producidos a partir de caa de azcar y fuentes celulsicas de biomasa. Mayor proporcin de mercado para biomateriales como los bioplsticos, especialmente en nichos en los que pueden ofrecer algunas ventajas .

MARCO NORMATIVO DE LA BIOTECNOLOGA.

Un aspecto muy importante del negocio de la biotecnologa lo constituyen los procesos de regulacin que rigen la industria para maximizar la seguridad la mayora de los productos deben examinarse cuidadosamente , antes de aprobar su uso. El proceso de regulacin conlleva dos aspectos importantes: 1. El control de calidad y 2. Aseguramiento de la Calidad

Los productos biotecnolgico estn regulados por:and Drug a. FDA (Food b. Administration) c. EPA (Environmental Protection Agency) USDA (U.S. Department of Agriculture)

TECNOLOGIAS APLICADAS
1. 2. 3. 4. PCR FINGERPRI NT CLONACI N 5. BACTERIAS 6. GENETICAMENTE MODIFICADAS GENMINA PROTEMICA

TCNICAS BASE DE LA BIOTECNOLOGA

Proceso de bioseparacin

Definicin: Recuperacin, aislamiento, purificacin y refinamiento de productos sintetizados por procesos biotecnolgicos. Definicin extendida: Etapas de refinamiento final de procesos tales como tratamiento de efluentes y purificacin de agua por biotecnologa.

Necesitamos aplicar mtodos de bioseparacin para:

Enriquecimiento del producto objetivo. Reduccin de volumen. Remocin de impurezas especficas. Mejoramiento de la estabilidad del producto. Alcanzar las especificaciones del producto. Prevencin de la degradacin del producto. Prevencin de otras catlisis diferentes a las deseadas. Prevencin de envenenamiento del catalizador.

RETOS EN INGENIERA DE BIOSEPARACIONES

Bajas concentraciones de producto. Gran nmero de impurezas. Termolabilidad de bioproductos. Estrecho margen de operacin de pH y fuerza inica. Baja solubilidad de bioproductos en solventes orgnicos. Inestabilidad de bioproductos en solventes orgnicos. Estrictos requerimientos de calidad. Porcentaje de pureza. Au sencia ideal de impurezas especficas Un proceso de bioseparacin debe combinar alta capacidad con alta selectividad, y debe asegurar estabilidad del producto.

PRODUCTOS BIOLGICOS
Producto Bebidas alcohlicas: destilacin. Cerveza, vino, licores cidos orgnicos: adsorcin, cido actico, cido ctrico Vitaminas: adsorcin, Vitamina C, vitamina B12, riboflavina Amino cidos: adsorcin, Lisina, glicina, fenilalanina Antibiticos: adsorcin, Penicilinas, Noemicita, Bacitacina Carbohidratos: Naturaleza de la bioseparacin requerida Clarificacin, Precipitacin, filtracin, extraccin con solventes Precipitacin, filtracin,

extraccin con solventes Precipitacin, filtracin,

extraccin con solventes Precipitacin, filtracin, extraccin con solventes Precipitacin, filtracin, adsorcin Precipitacin, filtracin, extraccin con solventes

Almidn, azcares, dextrinas

Lpidos: adsorcin, Glicerol, grasas, cidos grasos

PRODUCTOS BIOLGICOS Producto Protenas: Alimentos y sus aditivos adsorcin, Nutracuticos separaciones Enzimas industriales membranas Hormonas Enzimas farmacuticas Productos derivados de plasma Anticuerpos monoclonales Factores de crecimiento Trombolticos Protenas derivadas de rDNA Protenas de diagnstico Vacunas Naturaleza de la bioseparacin requerida Filtracin, precipitacin,

centrifugacin,
cromatografa, basadas en

PRODUCTOS BIOLGICOS

Producto

Productos basados en DNA: precipitacin, Pruebas de DNA, plsmidos, centrifugacin, adsorcin, nucletidos, oligonucletidos cromatografa, separaciones Un buen proceso de separacin: basadas en membranas Asegura la pureza deseada del producto. Asegura la estabilidad del producto. Mantiene costos bajos. Es reproducible. Es escalable. Cumple con las regulaciones establecidas.

Naturaleza de la bioseparacin requerida Filtracin,

La economa del proceso est determinada por:

Capital invertido Costos de operacin Otros factores Eficiencia de las operaciones unitarias individuales

Perdidas en cada etapa

Destruccien o degradacien del producto durante el proceso Estado fisico del producto al final de cada etapa. Costo del tratamiento del efluente

ESTRATEGIAS PARA BIOSEPARACIN La estrategia est basada en como estos mtodos pueden ser utilizados para una separacin dada. mejo r

Se necesita tomar en cuenta lo siguiente: El volumen de la corriente de proceso

La abundancia relativa del producto en esta corriente de proceso. El uso que se le intenta dar al producto, esto es, requerimientos de pureza. El costo del producto. Requerimientos de estabilidad.

ESTRATEGIA CONVENCIONAL Recuperacin, aislamiento, purificacin y refinamiento.

Las tcnicas de baja resolucin, alta capacidad (por ejemplo, precipitacin, filtracin, centrifugacin, cristalizacin) se usan primero para recuperacin y aislamiento

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Las tcnicas de alta resolucin (por ejemplo, adsorcin, cromatografa, electroforesis) son entonces usadas para purificacin y aislamiento

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MTODOS DE BIOSEPARACIN

BAJA RESOLUCIN ALTA CAPACIDAD Ruptura celular Precipitacin Centrifugacin Extraccin lquidolquido Percolacin Filtracin Extraccin con fludos supercrticos Microfiltracin Dilisis

ALTA RESOLUCIN BAJA CAPACIDAD Ultracentrifugaci n Adsorcin Cromatografa de lecho empacado Separacin por afinidad Electroforesis

MTODOS DE BIOSEPARACIN

ALTA RESOLUCIN-ALTA CAPACIDAD Ultrafiltraci n Cromatografa de lecho fluidizado Cromatografa de membrana Cromatografa de columna inica

PROPIEDADES DE LAS TCNICAS DE PURIFICACIN COMNMENTE USADAS

Tcnica Propiedad Composicin explotada producto Carga Capacidad Resolucin Rendimiento Costo Composicin

promedio alta MUY BAJA MEDIA BAJO

muestra >1 mg/ml

Precipitacin Volumen por pH pequeo Precipitacin con (NH4)2SO4

Hidrofobicidad

ALTA

MUY BAJA

ALTO

BAJO

Extraccin en MEZCLA Concentracin dos fases BIOAFINIDAD polmero Cromatografa CARGA acuosas de diferente intercambio inico Cromatografa Hidrofobicidad de diferente interaccin hidrofbica

ALTA ALTA MEDIO

MUY BAJA ALTA MEDIO

ALTO VARIABLE MEDIO

BAJO ALTO

Concentraci >1 mg/ml I alto n Volumen alta pequeo Concentraci n Puede alta contener de

MEDIO I Bajo slidos pH correcto

alta I alto pH

MEDIO

MEDIO

MEDIO

MEDIO

I alto pH

I Bajo

PROPIEDADES DE LAS TCNICAS DE PURIFICACIN COMNMENTE USADAS Tcnica Propiedad Capacidad Resolucin Rendimiento Costo Composicin Composicin explotada promedio muestra CromatoCarga / pI BAJA ALTO MEDIO ALTO I BAJO producto Presencia de enfoque anfolitos Cromatogra- Mezcla fa de diferente afinidad de teido Cromatogra- Bioactividad Condiciones fa de afinidad de desnaturaliza ligando Cromatogra- Tamao Diluido fa de permeaci n en gel MEDIA ALTO MEDIO MEDIO pH neutral

pH

MEDIA-BAJA

MUY ALTA

BAJO

ALTO

Dependiente
de

sobre el ligando MUY BAJA BAJA ALTO MEDIO

cin Volumen bajo potencial

MANEJO DE MICROORGANISMOS
Todos los paquetes que contengan cepas microbianas deben ser abiertos en un laboratorio equipado para trabajar con microorganismos. Por tanto, los cultivos han de ser manejados por personal entrenado y competente en tcnicas microbiolgicas o hacerlo bajo supervisin del mismo. Antes de material microbiolgico, el usuario ha de ser manejar las regulacione consciente a nive naciona para el trabajo existente de s s l l con microorganismo s cumplirla Elycultivo y el manejo de microorganismos estn restringidos a laboratorios que s. cumplan los requerimientos de contencin establecidos por la autoridad nacional para evitar el escape o dispersin del agente biolgico.

1. IDENTIFICACIN DEL AGENTE BIOLGICO

El material proporcionado es de uso exclusivo de y laboratorio viene identificado con el nombre cientfico de la cepa, el nmero de catlogo de la coleccin y la forma de presentacin (lifilo, cultivo activo u otras).

2. IDENTIFICACIN DE LA PELIGROSIDAD
Cada microorganismo suministrado est clasificado de acuerdo con la legislacin. Cualquier del grupo de riesg al que independientemen te o determinada microorganismo, pertenezc pued se patgen en a, e o s r condicione s. Conocer que microorganismos tienen la capacidad de producir Toxinas. Se debe evitar cualquier contacto directo con el microorganismo o sus aerosoles, en especial la inhalacin o el contacto con piel y ojos.

3. PRIMEROS AUXILIOS

En caso de contacto, lavar bien la piel contaminada con jabn antisptico y agua abundante. Si se sospecha la contaminacin de heridas, o se ha producido una ingestin o informar al facultativ del inhalacin fortuita, se deber o nombre buscar inmediatamente del microorganism atencin o. mdica, y se

4. MEDIDAS EN CASO DE VERTIDO O DERRAME DEL CONTENIDO DEL ENVASE SUMINISTRADO. PRECAUCIONES AMBIENTALES
Descontaminar/esterilizar/autoclavar todo el material que haya podido estar en contacto con el cultivo microbiano. Mantener los cultivos alejados de desages, agua superficial o subterrnea y suelo. Si se rompe accidentalmente el lifilo/envase que contiene los microorganismos, empapar el rea contaminada con un desinfectante apropiado. Los fragmentos de vidrio han de ser eliminados con pinzas, para evitar cortes accidentales.

5. MANEJO Y ALMACENAMIENTO

o envase Lo lifilo s s s ha conteniend lo cultivo o s n de se s abierto r s por manejado persony s entrenado en un al laboratorio del nive adecuad de l o seguridad .

6. CONTROLES DE EXPOSICIN.
Depend del grupo de riesg al e o que pertenezca el microorganismo y la est regulad por o Se legislacin la naciona l. minimiza exposicin trabajadore combinand de por los de recinto el ejempl o o s uso como cabinas s controlados, tales de seguridad co otras biolgica, n medida de precauci com s n, guantes protectores, gafas o y bata de laboratorio. s

PROTECCI DE PERSON N L AL

7. ELIMINACIN DEL MATERIAL

Todos los recipientes que contienen cultivos deben esterilizarse una vez utilizados. La esterilizacin se llevar a cabo mediante tratamiento por calor hmedo en autoclave a 121C durante 20 minutos. Esto es aplicable tambin a las batas de laboratorio u otros materiales resistentes al calor. El material inerte (vidrio, metal) puede ser esterilizado tambin en estufa de calor seco a 170180C durante 2 horas.