Integrantes:

Gutirrez Ostos Eunice

Ledesma Angeles Nallely
Quezada Rodrguez Elsa Herminia
Rodrguez Rodrguez Angelica
Los cidos nucleicos son
sustancias que como su
nombre lo indica, fueron
aisladas en el ncleo celular,
pero sean encontrado cidos
nucleicos en citoplasma as
como en mitocondrias y en
cloroplastos.
El Aislamiento del ADN es el principio
de muchos mtodos de:
Ingeniera gentica


Medicina forense
Bioinformtica
Nanotecnologa de ADN
Historia y antropologa


Transformacin
Secuenciacin
Mapeo fsico
Mutagnesis
Homogenizacin
Lisis celular
Disociacin
Extraccin
Precipitacin
Redisolucin
Donde se intenta realizar un
proceso que retrase la
separacin.
Una mezcla uniforme de las
sustancias con similares fases.
La lisis celular es la rotura de la
membrana celular
MTODOS FSICOS
MTODOS QUMICOS

Tratamiento con alcalis
Tratamiento con lisozima + EDTA
Empleo de detergentes


Sonicacin
Choque osmtico
Congelacin/descongelacin
Homogeneizacin con abrasivos
Cizalla liquida
Cizalla solida

La protelisis es la
degradacin de protenas ya
sea mediante enzimas
especficas, llamadas
proteasas , o por medio de
digestin intramolecular , que
catalizan la ruptura de slo
una o de pocas uniones
peptdicas.
Se utilizan enzimas proteolticas como la pronasa, la cual es activa
contra un amplio espectro de protenas naturales. La pronasa se
debe auto digerir a 37C por lo menos una hora antes de utilizarla
Una vez concluida la digestin con
proteasa, se realiza una digestin
de Rnasa para eliminar la
presencia de RNA.
Se eliminan las protenas de la muestra
utilizando solventes orgnicos como el
fenol.
El fenol utilizado en la extraccin de las
protenas debe ser bidestilado o ultra puro
, y se utiliza a una relacin 1:1 volumen
por volumen con la muestra que se
pretende limpiar.
Generalmente se
recomienda realizar 1
extraccin con fenol seguida
de 1 extraccin de
fenol:cloroformo (1:1), y por
lo ultimo una ultima
extraccin con cloroformo
para limpiar toda traza de
fenol.
Para poder concentrar el ADN despus de
la eliminacin de las protenas, se utiliza
una serie de sales entre las que se
encuentra el acetato de sodio, acetato de
potasio acetato de amonio y cloruro de litio
entre las mas usadas .
Una vez que el ADN ha estado en
contacto con los cationes seleccionados
se precipita con 2 volumenes de etanol
absoluto o 1 volumen de isopropanol
bajo las siguientes condiciones :mayor a
2 h a 20 centgrados de 15 a 30 min a
menos 70 centgrados, o 10 o 15 min en
hielo seco con etanol.
Se re suspende en un Tapon que puede ser de
tris-EDTA

El EDTA ayuda al agotamiento de iones que se
utiliza comnmente para inactivar enzimas
dependientes de metal que podran daar el
ADN o las protenas