UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO

VILLAREAL
Facultad : ing. Ciencias alimentarias
INTEGRANTES :
La Torre Rueda, Danter
Mayorga Morales , Daniel
Ordoez Julca, Grecia
Vicharra Roncal, Xiomi
Alejandra

FOPCA - UNFV
I. OBJETIVOS
Aprender a determinar como influyen algunos factores fsico y
qumico del medio ambiente en la velocidad de crecimiento
de los microorganismos.
Conocer cuales son los factores fsicos y qumicos que influyen
en este proceso.

Factores ambientales y crecimiento
microbiano.
Nutrientes
Tiempo
Oxgeno
Disponibilidad
de agua
pH
Temperatura
Factores ambientales y el crecimiento
Temperatura
Las temperaturas cardinales son caractersticas de cada organismo
La temperatura ptima est
ms cerca de la mxima que
de la mnima.
Temperaturas cardinales:
- mnima
- ptima
- mxima
El rango de temperaturas en
que puede vivir un organismo
es de 25 a 40 grados.

Temperatura
Cada microorganismo es capaz de crecer en un rango muy determinado de
temperatura. Este rango es conocido como temperaturas cardinales y
establece las temperaturas mnimas, mximas y ptimas de crecimiento en
funcin de la velocidad de crecimiento y la temperatura de incubacin.

La temperatura mnima es a la que el microorganismo ya no se detecta
crecimiento a valores ms bajos de temperatura. La actividad metablica
es mnima, las membranas se hacen ms rgidas y los procesos de
transporte son limitados o inexistentes.

La temperatura optima es cuando el microorganismo registra la mxima
velocidad de crecimiento y las reacciones enzimticas ocurren a la mxima
velocidad posible.

La temperatura mxima es en la que el crecimiento no existe y se hace
insostenible todo proceso bioqumico por la desnaturalizacin de protenas
y enzimas.
Temperatura
Distintas especies tienen una tasa mxima (ptima) de crecimiento a
diferentes temperaturas.
Clases de organismos de acuerdo a la temperatura
Bajas temperaturas
Psicrfilo: organismo cuya temperatura ptima de crecimiento es <15C.
Psicrotolerante: organismo que puede vivir a 0C pero cuya
temperatura ptima de crecimiento es 20-40C.

Adaptaciones de los psicrfilos:
Enzimas con estructura secundarias que les permiten funcionar a bajas
temperaturas y que se desnaturalizan a bajas temperaturas.
Las membranas tienen mayor contenido de cidos grasos insaturados,
para que sea fluida a bajas temperaturas.
El lmite inferior es -12C, si hay an pequeos microhabitats con agua
lquida.
Altas temperaturas
A temperaturas > 65C, solo procariotas se han encontrado.
Termfilos: con temp. ptima de crecimiento >45C.
Hipertermfilos: con temp. ptima de crecimiento >80C.
Hbitats con altas temperaturas estn asociados a fenmenos
volcnicos: fuentes hidrotermales terrestres o submarinas.
Existen Bacteria y Archaea hipertermfilas.
pH
Cada organismo tiene un pH ptimo de crecimiento. Al igual que
con la T cada microorganismo tiene un rango de pH dentro del
que se puede desarrollar. A diferencia de la temperatura, el pH
ptimo de desarrollo suele ser un valor muy bien definido para
cada microorganismo

Acidfilos: pH ptimo <6
Ej. Hongos, bacterias.
Acidfilos obligados: no pueden crecer a pH=7.
Factor importante: estabilidad de la membrana
Alcalfilos: pH ptimo de crecimiento >9.
Factor importante: fuerza protn motriz es reemplazada
por Na+.
Aunque algunos organismos sean
capaces de vivir a pH alto o bajo,
el pH interno de todas las clulas
es ~ pH neutro.
pH
HABITAT
Neutrfilos
Disponibilidad de Agua
Efecto del sodio (Na) en el crecimiento de los microorganismos.
Halfilos extremos: tasa ptima
de crecimiento a concentraciones
de NaCl 15-30%.
3% 15-30%
Depende del contenido de agua en el ambiente y de la
concentracin de solutos.
Cuando la concentracin de sales aumenta, la disponibilidad de agua es limitante.
En un medio hipertnico, el agua tiende a salir de las clulas.
Halfilos: tasa ptima de
crecimiento a concentraciones
de NaCl 3%.
Halotolerantes: tasa ptima en
agua pura, pero toleran cierta
concentracin de NaCl.
Los organimos halfilos acumulan solutos intracelularmente para mantener un
balance positivo de agua.
Deben tomar solutos del ambiente, sintetizarlos o concentrar un soluto orgnico.
Disponibilidad de Agua
Ejemplos: azcares, alcoholes, amino cidos, iones
Oxgeno
- No todos los organismos necesitan oxgeno para vivir.
- Muchos habitats naturales son anxicos y hay microorganismos que
viven de forma ptima.
Clases de organismos en relacin al oxgeno:
Anaerobios: no pueden utilizar el oxgeno.
III. PARTE EXPERIMENTAL
- Materiales
Mechero
Gradilla
Aza de col y agujas
Tubos de ensayos
Termmetro
- Muestra
agar nutritivo
Caldo nutritivo
Cepa Bacilus Subtillis
- Equipo
Refrigeradora
Estufa (previamente graduado)
Horno bacteriolgico

PROCEDIMIENTO
Factores fsicos que influyen en el crecimiento microbiano
1) Temperatura

- Desinfectar la aguja de crom hasta que
llege al rojo vivo, antes de introducirlo
en el cultivo joven

- Sembrar en multiples tubos de agar con
un pequeo inculo de un cultivo joven con
ayuda de una aguja de crom


- Incubar por separado en estufas reguladas a temperaturas perfectamente
controladas (5C, 15C, 37C, 43C). Dejarlo en las estufas por 24h






2) EL pH
- Desinfectar el asa de crom hasta que
llege al rojo vivo, antes de
introducirlo en el cultivo joven



























- Tomar con el asa de crom la muestra patron
Una ves sembrado los tubos hay que acondicionar,
rotular los tubos a evaluar con pH de: 4 pH (acido),
5 pH (acido),6pH,7 pH (neutro),8 pH (alcalino) y
9 pH (alcalino).




- Incubarlo a 37C por un tiempo de 24 horas

- Leer la turbidez










3) Resistencia al calentamiento
- Desinfectar el asa de crom hasta que
llege al rojo vivo y luego sembrar el cultivo
patrn en los tubos de caldo nutritivo.
Repetir el mismo procedimiento 4 veces
en el caldo nutritivo
- Calentar en baos de agua, regulados
a temperaturas controladas, cada uno
de los tubos por un periodo de 10 min.
Las temperaturas sugeridas son :
( 50C, 60C, 70C, 90C, 100C)
- Enfriar en agua corriente.
- Incubar a 37 C, durante 24 horas.
- Leer la turbidez.

LECTURA DE MICROORGANISMOS DESPUES DE LAS 24 HORAS
- Crecimiento de m.o a temperatura


Temperatura

Caracteristicas Formacion de
colonias
Equipo Medio de
cultivo
Temperatura de
incubacion

5C

Agar
completamente
libre de m.o

No

Refrigeradora

Agar nutritivo
5C

20C
Formacion de
colonias
minimas en el
agar

Si
Estufa Agar nutritivo
20C

37C
Mayor
formacin de
colonias

Si
Estufa Agar nutritivo


37C

60C
Se observa en
todo el agar

Si
Horno
bacteriologico
Agar nutritivo
60C
5C 20C 37C 60C
Crecimiento de m.o en pH
pH CARACTERISTICA EQUIPO MEDIO DE CULTIVO T DE INCUBACION

4
Cristalino, presenta
m.o y no tiene
turbidez
Horno bacteriologico Caldo nutritivo 37 C / 24h

5
Presenta turbidez y
crecimiento m.o
Horno bacteriologico

Caldo nutritivo

37 C / 24h


6
Presenta turbidez y
crecimiento m.o
Horno bacteriologico

Caldo nutritivo

37 C / 24h


7
Presenta turbidez y
crecimiento m.o
Horno bacteriologico

Caldo nutritivo

37 C / 24h


8
Cristalino, no
presenta
crecimiento de m.o
Horno bacteriologico

Caldo nutritivo

37 C / 24h


9
Cristalino no
presenta
crecimiento de m.o
Horno bacteriologico

Caldo nutritivo

37 C / 24h

pH 4 pH 5 pH 6 pH 7 pH 8 pH 9
RESISTENCIA AL CALENTAMIENTO
TEMPERATURA CARACTERISTICA EQUIPO MEDIO DE CULTIVO TC DE
INCUBACION
50C Presenta turbidez y
un anillo color
marron en la
superficie
Horno
bacteriolgico
Caldo nutritivo 37C /24h
60C Presenta turbidez y
un ligero anillo
marron
Horno
bacteriolgico

Caldo nutritivo

37C /24h

70C Presenta turbidez y
un ligero anillo
color marron
Horno
bacteriolgico

Caldo nutritivo

37C /24h

90C Critalino, no
presenta turbidez
Horno
bacteriolgico

Caldo nutritivo

37C /24h

100C Cristalino no
presenta turbidez
Horno
bacteriolgico

Caldo nutritivo

37C /24h

50C 60C 70C 90C 100C
1.CLCULO DE TEMPERATURAS
CEPA 5C 20C 37C 60C
Salmonella
Typhi
- + ++ +++
E.Coli - + ++ +++
Staphylococus
Saurios
- + ++ +++
Bacillus
Subtillis
- + ++ +++
IV. CLCULOS
2.CLCULOS DEL pH
CEPA pH=4 pH=5 pH=6 pH=7 pH=8
pH=9

Salmonella
Typhi
- ++ ++ +++ ++ ++
E.Coli - ++ + +++ ++ +
Staphyloco
cus Saurios
- - + ++ ++ +++
Bacillus
Subtillis
- - ++ +++ + +
3.CLCULOS DE LA RESISTENCIA AL CALENTAMIENTO
CEPA 50C 60C 70C 90C 100C
Salmonella
Typhi
+++ - - - -
E.Coli +++ - - - -
Staphyloco
cus Saurios
+++ + ++ - -
Bacillus
Subtillis
+++ ++ + + -
V. DISCUSIONES
-Segn Negroni en Microbiologa estomatolgica menciona que el pH ptimo de
desarrollo bacteriano es el neutro entre 6,5 y 7,5. Sim embargo hay bacterias que pueden
crecer con un pH de hasta 4,0, a estas se denominan acidfila.
En nuestra prctica se observ que hubo mayor desarrollo microbiano entre lo pH de 6 y 7
-Segn Gerard en Introduccin a la microbiologa menciona que segn la temperatura
optima de desarrollo de microorganismos pueden ser: Sicrfilas (que se desarrollas de 10C
a 20C), Mesfilas (que se desarrolla de 20C a 40C) y las Termfilas (que se desarrolla de
40C a60C). Y en casos especiales se pueden presentar los Hipertermfilos (que se
desarrolla entre los 60 y 110 C).
En nuestra prctica se observ que hubo mayor desarrollo a la temperatura de 20 y 37 C.
-Segn Barreiro en Operaciones de conservacin de alimentos por bajas temperaturas
menciona que los microorganismos mesfilos tienen temperaturas ptimas de crecimiento
intermedias, normalmente entre 20 y 45 C; debido a que la temperatura que la
temperatura del cuerpo humano (37C) se encuentra en este rango, la mayora de los
microorganismos patgenos al hombre pertenecen a esta categora.
En nuestra prctica los microorganismos que desarrollaron a esa temperatura a la que
menciona el autor, pueden ser perjudiciales al ser humano.

VI. CONCLUSIONES:
Se logro concluir que el Bacillus subtilis a temperaturas
mayores de 20C hay crecimiento microbiano en el agar nutritivo y
a un pH de 5,6,7 hay crecimiento microbiano en el caldo nutritivo.
Adems a temperaturas mayores de 90C no hay turbidez en el
caldo nutritivo.
Logramos reconocer que los factores mas importantes que influyen
en el proceso del crecimiento microbiano es la temperatura, pH y
al resistencia al calentamiento.
VII. BIBLIOGRAFA
- Marta Negroni (2006), Microbiologa Estomatolgica. EDIT: Mdica
Panamericana S.A. Buenos Aires-Argentina.

- Gerard J. (2007) Introduccin a la Microbiologa EDIT: Mdica Panamericana
S.A. Buenos aires-Argentina.

- Barreiro A. J. (2006) Operaciones de conservacin de alimentos por bajas
temperaturas EDIT: Equinoccio. Venezuela.