PRODUO DE VACINAS

FARMCIA E BIOQUMICA 10SEMESTRE

ENZIMOLOGIA E TCNICAS DE FERMENTAO
PROF ENILENE

GRUPO
ADRIANA VIOLA
CLAUDIA DOMINGUES
GUSTAVO GERALDI
MARCO BOTACINI
NANCI RIBEIRO

APRESENTAO

VANDERLEI PRADO

MARCO BOTACINI
NANCI RIBEIRO
VANDERLEI PRADO

I. INTRODUO
A vacinao tornou-se ao longo do tempo uma maneira
eficaz de combater vrias doenas e mediante a este quadro,
implicou

necessidade

da

produo

industrial

no

desenvolvimento de tecnologias adequadas para atender a

demanda.

II. OBJETIVO
Este trabalho mostra a produo em larga escala
de algumas vacinas bacterianas por processo fermentativo
e informaes gerais sobre imunidade e vacinas virais.

III. PRINCIPAIS TIPOS DE IMUNIDADES

Imunidade Passiva a transferncia de anticorpo produzidos por um
indivduo a outro e este ter proteo imediata. Existe duas formas de
aquisio: Natural e Artificial.
III.I Imunidade Passiva Natural: a transferncia de anticorpos
maternos pela placenta.
III.II Imunidade Passiva Artificial: Os anticorpos so injetados no
organismo, proporcionando a proteo imediata contra o patgeno.

IV. VACINAS BACTERIANAS

As vacinas bacterianas podem ser produzidas a partir de microorganismos atenuados
ou mortos, toxinas neutralizadas, ou simplesmente utilizando componentes de
cpsula, membrana ou parede bacterianas. Vejamos alguns exemplos:
O BCG produzida a partir do Mycobacterium bovis atenuado.
A vacina contra a clera produzida a partir de bactrias mortas.
Existem vacinas conjugadas que so na verdade molculas, em geral
polissacardeos conjugados com toxides tetnico, diftrico, protenas de membranas
externas ou membranas capsulares.
A conjugao tem por objetivo aumentar a capacidade imunognica da vacina.

V. ALGUNS TIPOS DE VACINAS BACTERIANAS PARA HUMANOS

PROTEO CONTRA
Ttano
Meningite meningoccia C
Peste
Tuberculose
Cncer da bexiga
Clera
Coqueluche (pertussis)
Difteria
Febre tifide
Pneumonia lobar, broncopneumonia,
otite e mastoidite

MICRORGANISMO EMPREGADO
NO PREPARO

COMPOSIO BSICA DA VACINA

Clostridium tetani

Exotoxina inativada (toxide)

Neisseria meningitidis (sorogrupo C)

Polissacardeos capsulares

Yersinia pestis

Bactria inativada

Mycobacterium bovis

Microrganismo atenuado

Vibrio cholerae

Microrganismo inativado ou atenuado

Bordetella pertussis

Microrganismo inativado

Corynebacterium diphteriae

Exotoxina inativada (toxide)

Salmonella typhi

Microrganismo inativado

Diplococcus pneumoniae

Polissacardeos capsulares

VI. TIPOS MAIS COMUNS DE VACINAS VIRAIS PARA USO HUMANO

MICRORGANISMO EMPREGADO
NO PREPARO

COMPOSIO BSICA DA VACINA

Poliomelite

Poliovirus

Vrus inativado e vrus atenuado

Varola

Poxvirus

Vrus atenuado

Raiva

Lyssavirus

Vrus Inativado

Rubola

Rubivirus

Vrus atenuado

Caxumba

Paramyxovirus

Vrus atenuado

Influenza

Influenzavirus

Vrus vivo ou inativado

Sarampo

Morbillivirus

Vrus atenuado

PROTEO CONTRA

As vacinas produzidas contra os vrus podem ser de dois tipos: Atenuada e Inativada
A vacina atenuada aquela em que o vrus encontra-se vivo porm, sem capacidade de produzir a doena.
(caxumba, febre amarela, poliomielite, rubola, sarampo, trplice viral, varicela e varola).
A vacina inativada contm o vrus inativado por agentes qumicos ou fsicos, ou subunidades e fragmentos obtidos
por engenharia gentica.

VII. PROCESSO FERMENTATIVO NA PRODUO DE VACINAS

VII a) Alguns fatores so importantes na produo especfica de algumas vacinas:
Volume de cultivo necessrio para a produo de uma dose humana total de vacina;
Conduo dos processos fermentativos correspondentes (ex: pH, temperatura)
Concentrao de microrganismos ou antgenos obtidos;
Vias de aplicaes das vacinas (tifo e clera via parenteal e oral), pois possuem valores distintos de volume de cultivo.
Etapas de purificao do antgeno posterior fermentao: quanto maior o nmero requerido para uma pureza
especificada, tanto maior ser o volume de cultivo destinado uma dose humana total.

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IMAGENS RETIRADAS DO INSTITUTO BUTANT PRODUOD DE VACINAS

VII b) Tabela com valores aproximados de volumes de cultura para o preparo de uma
dose humana total (dht) de algumas vacinas bacterianas e virais.
Tipo de vacina

Inoculaes por dht

mL de cultura por dht

Pertussis

1,0

Difteria

0,3

Tifo (via oral)

2,0

Tifo (via parenteral)

0,02

B.C.G.

0,02 a 0,1

Ttano

0,3

Varola

0,03

Clera (via parenteral)

0,2

Clera (via oral)

2,0

Sarampo (atenuada)

0,003

Sarampo (inativada)

1,0

VIII. PRODUO EM GRANDE ESCALA POSSVEIS OBSTCULOS

No incio a produo de vacinas era realizadas em escala laboratorial, o que permite pequenas quantidades. Muitas
vezes o processo laboratorial fica com custo elevado quando a demanda grande e ainda, em muitos processos, no
possvel realizar uma produo em grande escala pelos seguintes motivos:
A maior parte do desenvolvimento so feitos em organizaes sem fins lucrativos ou com apoio governamental;
Requer profissional capacitado com conhecimentos em produes de grande escala e isto custa caro;
Enquanto o volume de cultivo em outros processos fermentativos (antibiticos), compreendem vrias dezenas de
milhares de litros em uma s batelada, na produo de vacinas requer apenas o emprego de fermentadores das
dimenses de um piloto, o que aumenta o tempo e o custo da produo. Portanto, torna-se invivel;

Vacinas virais preparadas rotineiramente com matria-prima (pele de bezerro e ovos

de galinha), tornam-se problemticas quando preparadas em grande escala;
Condies complexas de cultivo de bactrias patognicas e vrus;
A produo de vacinas necessita estar paralelamente ligada cincia;
Automao industrial um fator que ajudaria a ampliao destes processos.

IX. PROCESSO UNITRIO DA PRODUO DE VACINAS

Operaes Unitrias (tratamento posterior fermentao) tanto para produo de vacinas bacterianas como virais
acometem:
Meios de cultura com composio complexa;
Os volumes de meio de cultivo utilizados na produo industrial de vacinas (25 a 3.500 L) so pequenos em relao a
outros processos;
Temperatura de cultivo: para bactrias e clulas de tecidos se situam ao redor de 37C;
pH timo das fermentaes (geralmente 7,5);
Temperatura favorvel proliferao dos microrganismos;

Assepsia na conduo do processo;

Patogenicidade dos microrganismos envolvidos no preparo de vacinas;
Proteo especial do operador para evitar infeces acidentais;
Efeitos colaterais decorrentes da aplicao da vacina devem ser minimizados,
pois vacina medicamento preventivo;
Os primeiros efeitos so observados em animais de laboratrios, portanto
impossvel avaliar a potncia da vacina durante o processo de cultivo;
Curva de crescimento do microrganismo de interesse (obtidas pelas leituras de
densidade ptica);

X. VACINAS BACTERIANAS
CLASSIFICAO E PROCESSOS DE PRODUO
Classificao: dada de acordo com a localizao do antgeno como:
PARTICULADA
NO-PARTICULADA
Processos: Durante a produo da vacina, os tratamentos finais da cultura do microrganismo correspondente diferem, de
acordo com o grupo ao qual pertence o imunobiolgico. Vejamos abaixo a classificao das vacinas bacterianas quanto
localizao do antgeno, com alguns exemplos:

VACINAS
PARTICULADAS:

VACINAS
NO-PARTICULADAS:

Pertussis (coqueluche)
Clera
Febre tifide
B.C.G.

Toxides

Diftrico
Tetnico
Estafiloccico
Pertussis (celular)

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XI. ESQUEMA DA PRODUO DA VACINA BACTERIANA PERTUSSIS

Bortella pertussis o microrganismo causador da coqueluche;
Bacilo gram-negativo;
Meio cultivo semi-slido complexo contendo sangue de carneiro;
Este meio usado durante os estgios iniciais de preparo do inculo
seguido do cultivo em suspenso ou profundidade;
O processo de produo da vacina pertussis celular compreende as etapas
citadas abaixo:

ETAPAS DO
PROCESSO DE
PRODUO DA
VACINA

PREPARO DO
INCULO

FERMENTAO

FILTRAO E
DESTOXIFICAO

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XII. PROCESSO FERMENTATIVO DA VACINA PERTUSSIS

XII a) INCULO
Inicialmente preparado pela ressuspenso do microrganismo liofilizado em soro fisiolgico, seguido de um espalhamento
da suspenso resultante sobre o meio contendo sangue de carneiro (Bordet-Gengou);
A incubao realizada a 35C durante 96 horas;
As colnias formadas so novamente suspensas com o soro citado e um novo cultivo realizado em outros tubos
contendo o meio de Bordet-Gengou durante 48 horas a 35C;
Existe ainda para o preparo do inculo duas etapas de cultivo de bactria em erlenmeyers agitados com meio que no
contm sangue ( Stainer-Scholte) durante 24horas a 35C;
A relao entre o volume de meio e a capacidade do frasco sempre est entre 0,2 e 0,25
fermentador ou do pr-fermentador.

5%, dependendo do

Pode acontecer a proliferao de bactrias e fungos que podero contaminar de

vrias formas. Adiciona-se os meios tioglicolato (detecta contaminantes
anaerbios) ou Brewer e casena de soja (detecta possveis fungos);
Amostras do fermentador e da vacina final (0,5 mL) so colhidas aps cada
etapa de preparo do inculo. So adicionados meios citados e se no apresentar
turvaes aps incubao 35C = ausncia contaminantes e so chamados:
TESTES DE ESTERILIDADE;
A Bortella pertussis no prolifera nestes meios citados;
Provas importantes para liberar a vacina so: Toxidez e Potncia (ratos).

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XII b) FERMENTAO
O cultivo submerso da Bordetella pertussis em fermentador apresenta um problema, pois as bactrias tendem a se
adsorver nas superfcies das bolhas de ar e com isso o microrganismo arratado para a superfcie livre do meio e para de
se reproduzir;
No recomendada a utilizao de antiespumante na produo da vacina pertussis, pois aumenta a toxidez no produto
final;
pH do meio apresenta um aumento constante entre 7,0 e 7,5, at 8,0 a 8,6. Esta a fase estacionria de crescimento.
Remover as chicanas ou defletores da parede da dorna (fig. A).
Trata-se de um sistema que evita a flotao de bactrias, pois a aerao reduzida eficientemente;
Deve-se evitar a turbulncia do meio (fig. B);
Dispensa antiespumante;
Boa homogeneidade.

LEGENDA DA FIGURA
Sistema de agitao e aerao para o cultivo
submerso de Bordetella pertussis (A) e para cultivos
com anti-espumante (B).
e = entrada s = sada de ar esterilizado
respectivamente

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XII c) FILTRAO E DESTOXIFICAO

A etapa de filtrao tangencial, no processo de produo, visa separar as
bactrias do meio de cultura. Estas esto ressuspensas em soro fisiolgico e
destoxificadas com formaldedo;

www.netzsch.com.br/filtros/imagens/fotomaq2a.jpg

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XIII. IMAGENS DE ALGUNS SISTEMAS DE AGITAO E BIORREATORES

USADOS NO CULTIVO DE CLULAS ANIMAIS

Sistemas de agitao para biorreatores de

cultivo de clulas animais:
a = vibromixer, b= agitador tipo palheta, c=
agitador com hlice martima, d= agitador tipo
cela, e= agitador de cesto com fibras ocas, f=
tubo de aspirao.

Biorreator com dorna de vidro e sistema de agitao Cell-Lift

(capacidade total de 5 litros).

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XIV. CONCLUSO
Conclumos que a produo de vacinas, seja ela de origem bacteriana
ou viral, possui rigorosos procedimentos que devem ser cumpridos
pelos laboratrios. Estes, necessitam de recursos financeiros do
governo e profissionais com slidos conhecimentos, tanto para a
produo quanto para o desenvolvimento de novas tecnologias
conforme os surtos patognicos, endmicos e pandmicos que a
populao apresentar. Porm, nem sempre esta necessidade
suprida devido ao baixo investimento nesta rea e a produo em
grande escala fica a desejar, principalmente nos pases em
desenvolvimento.

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LEVEM AS CRIANAS PARA SEREM

VACINADAS EM TODAS AS
CAMPANHAS E PERMITA QUE ELAS
VIVAM O AMANH DE MANEIRA
SAUDVEL E SEM SEQUELAS.

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XV. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

1.

BIER, O. Microbiologia e Imunologia. 24. ed. So Paulo. Melhoramentos. 1985.

2.

COHEN, S.M.; WHEELER, M. Pertussis Vaccine Prepared with Phase-I Cultures Grow in Fluid
Medium. American Journal of Public Health. V.36, p. 371-376, 1946.

3.

CHISTI, Y.; MOO-YOUNG,M. Aeration and Mixing in Vortex Fermenters. J. Chem. Tech.
Biotechnol., vol.58, p.331-336, 1993.

4.

LIMA ALMEIDA, U.; AQUARONE, E.; BORZANI, W.; SCHMIDELL, W. Biotecnologia Industrial
Processos Fermentativos e Enzimticos, Editora EDGARD BLUCHER LTDA. vol. 3, cap. 13, p. 307345, 2001.

5.

www.butantan.gov.br

6.

www.netzsch.com.br

7.

www.unimedjp.com.br

8.

www.vacinas.org.br

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