Produccin sustentable de Microalgas

Fototrficas para la Extraccin de

Aceite rico en DHA y otros compuestos
para aplicaciones Alimenticias
Roles
Fundacin Chile: Rol articulador para potenciar el
desarrollo de proyectos de innovacin tecnolgica,
experiencia de desarrollo de productos y nuevos
negocios para la industria alimentaria.

AEON Biogroup: Know how y Experiencia en
tecnologas y biotecnologa de produccin de
microalgas.
Equipo de Trabajo
Luis Merino (AEON)
Alfonso Navarro (AEON)
Gabriel Castro (AEON)
Francisco Ateca (AEON)
Felipe Martinez (AEON)
Carlos Canales (AEON)
Andrs Barros (FCH)
Claudia Razeto (FCH)

Gabriel Leyton (FCH)
Ral Vsquez (FCH)
Graciela Urrutia (FCH)
Cristin Medina (FCH)
Antonio Vlez (FCH)
Andrs Leschot (FCH)
Alejandro Saldas (FCH)
Roberto Duchens (FCH)
Daygoro Gaytan (FCH)
Objetivo General Inicial
Produccin controlada y sustentable de microalgas fototrficas
para la extraccin de aceites ricos en cidos grasos esenciales
PUFAs (DHA y EPA), y otros componentes bioactivos
destinados a la formulacin de productos para la alimentacin
humana y animal especializada.

Cultivo Raceway
Objetivo General
Produccin controlada y sustentable de Microalgas
fototrficas para la extraccin de aceites con cidos
grasos esenciales (Omega 3), y otros componentes
para la industria alimentaria
Sistema Algae Circles
Objetivos Iniciales vs Finales
Objetivo Inicial Objetivo Final
Determinacin de
Especies
Determinacin de
Especies

Compuestos Bioactivos Protenas y PUFAs
Aceites PUFAS DHA
Extraccin de aceite Determinacin de
biomasa alta en aceite
Produccin de microalgas Produccin de microalgas
Desarrollo de alimentos Desarrollo de alimentos
humanos
Difusin Difusin
Resultados Esperados
Vigilancia Tecnolgica
Propsito
Identificar las
amenazas
Aumentar el
conocimiento
del entorno
Minimizar los
riesgos de
inversin
Sentido estratgico: Anticipacin
Identificar las
oportunidade
s tecnolgicas
Identificar
socios o recursos
Facilitar la toma
de decisiones

Acelerar la
Innovacin
Vigilancia Tecnolgica
Metodologa:
Base de datos de patentes : temtica es de gran novedad
uso de secreto industrial
Apoyo de expertos sectoriales
Base de datos especializadas en estudios y artculos
especializados.
Centros Tecnolgicos enfocados en la materia
Vigilancia Tecnolgica
Estado del arte
Potenciales ingredientes funcionales en microalgas
Composicin nutricional de alimentos y algas
Efectos de las microalgas en la salud humana
(hipertensin, insuficiencia renal, desarrollo intestinal,
supresin de glucosa)
EPA/DHA: reduccin de riesgos coronarios y actividad antiviral
Mercado de las microalgas en Chile
Bajo nivel productivo
Bajo desarrollo tecnolgico
Gran mercado en el extranjero (US$4.000 millones)
Vigilancia Tecnolgica
Situacin Mundial
Mercado de alimentos saludables con microalgas
Empresas internacionales interesadas en invertir en
tecnologas de extraccin de ingredientes y produccin
de suplementos
Empresas destacadas en el desarrollo de microalgas para
el desarrollo de alimentos saludables y aceites.
Exigencias del mercado
Vigilancia Tecnolgica
Tecnologas aplicadas a la produccin de
microalgas, concentracin y purificacin de aceites
y protenas.
Clasificacin de Tecnologas predominantes
Evolucin en el tiempo de las tecnologas
Pases lderes
Tendencias de las tecnologas identificadas
Tecnologas de cultivo
Tecnologas en cosecha de microalgas
Extraccin de componentes
Vigilancia Tecnolgica
Usos de microalgas en la industria alimentaria
Anlisis de patentes
Casos prcticos
Estudios de mercado sobre produccin de
microalgas para alimentacin humana
Seleccin de especies en base a literatura (Etapa 1)
Contenido omega 3
Tecnologas de produccin
25 especies
Seleccin en base a disponibilidad de cepas
11 especies

Seleccin de Especies
Produccin de 11 especies seleccionadas (Etapa 2)
Referencias del proceso productivo
Anlisis a las 11 especies
Anlisis proximales de c. Grasos (aceites totales)
Perfiles de ac. Grasos
Seleccin de especies: f(contenidos de ac grasos +
capacidad de escalamiento productivo)
4 especies seleccionadas

Etapa 1: Lista de Especies Evaluadas
01.- Nannochloropsis gaditana
02.- Nannochloropsis oculata
03.- Pavlova sp.
04.- Phaeodactylum tricornutum
05.- Chaetocero calcitrns
06.- Rhodomonas salina
07.- Thalassiosira pseudonana
08.- Chaetocero muelleri
09.- Isochrysis sp.
10.- Tetraselmis suecica
11.- Isochrysis galbana
12.- Monoraphidium griffithii.

Seleccin de Especies y
Determinacin de Compuestos
Composicin Nutricional
Biomasa de Microalgas verus produccin
Grafico
Seleccin de Especies y
Determinacin de Compuestos
Cuadro Resumen Seleccin Especies


Se trabajo en torno a los antecedentes bibliograficos existentes (Anexo I), a la
experiencia de ambos grupos en cuando al cultivo de microalgas a nivel laboratorio y
escalamiento productivos (anexo II) y a los resultados obtenidos por los distintos
laboratorios subcontratados por el proyecto (Anexo ???).
Los resultados obtenidos en esta etapa del proyecto concluyo en la determinacin de 4
especies, las cuales se estandarizaron por el grupo Aeon Biogroup en la siguientes
etapas




Cuadro de Valores 1 Cultivos Preliminares

En base a unidades de cultivo basicas se otubieron 10 litros de cada especie (Anexo
III) para ser luego cosechas por centrifugacin y obtenidos sus rendimiento tanto en
peso humedo como seco, para luego ser analisasa por laboratorio CIDTA (Anexo??)


Especies *Disp.
cepa
Desarrollo
cultivo
Produccin
Biomasa
*Prod.
Lipidos
*Prod.
PUFAs
TOTAL
N. gaditana 3 4 3 3 1 14
N. oculta 4 4 4 3 2 17
Pavlova sp 2 1 1 2 4 10
P. tricornotum 3 3 2 4 4 16
Ch. calcitrns 2 2 1 1 2 8
R. salina 1 1 3 1 3 9
T. pseudonana 1 3 1 1 3 9
Ch. muelleri 2 2 4 2 3 13
Isochrysis sp 1 1 2 3 1 8
T. suecica 3 2 2 4 2 13
I.galbana 4 4 3 2 4 17
M. griffithii 4 3 4 4 1 16
30 30 30 30 30

La table de valores califica de 4 a 1 los distintos items por especie, los cuales fueron
analizados en base a los informes Anexo (I , II y III).


Especies calificadas Etapa Preliminar

Tabla clasificacin especies

Phylum Clase Especie
Heterokontophyta Eustigmatophyceae Nannochloropsis oculata
Haptophyta Prymnesiophyceae Isochrysis galbana
Heterokontophyta Bacillariophyceae Phaeodactylum tricornotum
Chlorophyta Chlorophyceae Monoraphidium griffithii

La tabla informa sobre lase species calificadas para la etapas experimentales a
realizarce en las dependencias de Aeon Biogroup, Laboratorio Alage Circles de
Santiago.

Tabla Seleccin Especies
Produccin de 4 especies seleccionadas (Etapa 3)
Estandarizacin de produccin de cultivos (escala
laboratorio):
Produccin de medios
Determinacin de variables y monitoreo
Productividad
Estandarizacin de procesos de cosecha y secado (escala
laboratorio)
Separacin
Secado
Extraccin
Produccin de 4 especies seleccionadas (Etapa 3)
Extraccin de cidos grasos
Mecnica
Enzimtica
Electromagnetismo**
Anlisis de biomasa (Ac. Grasos)
Proximales
Perfiles
Resultados
Se seleccionan 3 sps para prototipaje experimental (1.200 lts)
Seleccin de Especies y
Determinacin de Compuestos
Inicio del Escalamiento (4 especies)
Produccin de 3 especies seleccionadas (Etapa 4)
Prototipaje experimental (1.200 lts x unidad)
Produccin de inculos
Determinacin de medios de cultivo
Cosecha y secado determinados en etapa 3
Electromagnetismo
Qumica
Mecnica*
Screening (anlisis bromatolgico)
Proximal
Perfiles
Microbiolgicos
Metales pesados
Tecnologas de Separacin de
Biomasa
Produccin de 3 especies seleccionadas (Etapa 4)
Resultados: seleccin de 2 especies para prototipaje
industrial (2.000 lts)
Seleccin de Especies y
Determinacin de Compuestos
Produccin de 2 especies seleccionadas (Etapa 5)
Prototipaje industrial (2.000 lts x unidad)
Produccin continua de cepas e inculos
Produccin de medios de cultivo estandarizados en Etapa 4.
Proceso continuo (cosecha y secado)
Mecnico (Centrifuga industrial)
Screening (anlisis bromatolgico)
Proximal
Perfiles
Microbiolgicos
Metales pesados

Especie Clasificada


12 de Diciembre de 2011

Prepar: AEON BIOGROUP. CONFIDENCIAL Pgina 8

PRODUCCION SUSTENTABLE DE MICROALGAS FOTOTROFICAS
PARA LA EXTRACCION DE ACEITE RICO EN DHA, Y OTROS
COMPUESTOS BIOACTIVOS PARA APLICACIONES ALIMENTICIAS.





Isochrysis galbana Parke 1949

El gnero Isochrysis se caracteriza por poseer dos flagelos y un rudimentario haptonema.
Especficamente las clulas de esta especie son alargadas con forma variada, posee
un haptonema visible. La Clulas tienen una longitud 5-6 m. Dos flagelos de 7 m de
longitud. Coloracin amarilla marrn de los cloroplastos. Se presenta espordicamente
en aguas poco profunda a lo largo de la costa. Si distribucin es cosmopolita.


Clasificacin taxonmica de Isochrysis galbana.
Dominio Eucariota
Reino Chromista
Subreino Hacrobia
Divisin Haptophyta
Clase Prymnesiophyceae
Subclase Prymnesiophycidae
Orden Isochrysidales
Familia Isochrysidaceae
Genero Isochrysis









Especie Clasificada


12 de Diciembre de 2011

Prepar: AEON BIOGROUP. CONFIDENCIAL Pgina 7

PRODUCCION SUSTENTABLE DE MICROALGAS FOTOTROFICAS
PARA LA EXTRACCION DE ACEITE RICO EN DHA, Y OTROS
COMPUESTOS BIOACTIVOS PARA APLICACIONES ALIMENTICIAS.





Nannochloropsis oculata (Droop) D.J.Hibberd 1981
Son pequeas microalgas planctnicas o pueden crecer sobre distintos sustratos. Son
nicos debido a la falta d pigmentos cloroflicos exceptuando la clorofila a. Son algas
pequeas con dimetro que vara entre 1-2 y morfologa simple. Crecen en aguas
salobres. Su nombre proviene del latn con un ojo.

Clasificacin taxonmica de Nannochloropsis oculata
Dominio Eucariota
Reino Chromista
Subreino Harosa
Infrareino Heterokonta
Divisin Ochrophyta
Subdivisin Phaeista
Clase Eustigmatophyceae
Orden Eustigmatales
Familia Monodopsidaceae
Genero Nannochloropsis











Resultados
Seleccin de 1 especie con DHA
Protocolo de cultivo
Consolidacin tecnologa Algae Circle a nivel de
prototipo industrial
Estandarizacin de los anlisis
Seleccin de Especies y
Determinacin de Compuestos
Tabla Nutricional Porcentual
Barbosa 2005 (*)
Isocrysis galbana
EPA(%) 2**
DHA (%) 25 **
AA (%)
Lipidos Totales
(%)
35**
Proteinas (%) 45**
Carbohidratos
(%)
18**
Proyecto Omega 3, 2014 (**)
Escalamiento
Compound number (#) RT (min) Scan number (#) Area (Ab*s)
1 7,559 482 4713280
2 8,901 921 2813590
C14:0 3 10,535 1456 4,83E+08
4 10,664 1498 24082549
5 11,006 1610 796823
6 11,583 1799 16600858
7 11,965 1924 3942016
C16:0 8 12,912 2234 4,88E+08
9 13,239 2341 3826560
10 13,334 2372 10963883
C16:1 11 13,474 2418 2,35E+08
12 13,795 2523 6671043
13 14,095 2621 8901254
14 14,55 2770 7914654
15 15,152 2967 13865242
16 16,569 3431 5995569
C18:1 17 17,382 3697 6,62E+08
18 17,529 3745 56924413
19 18,293 3995 6211734
20 18,763 4149 53913959
C18:3 21 20,813 4820 84268941
C18:4 22 21,987 5204 1,83E+08
C22:6? doconexent 23 23,658 5751 34200956
24 25,06 6210 6637453
25 31,25 8236 8755047
26 32,179 8540 5288671
C22:5 27 37,532 10292 8324479
C22:6 DHA 28 40,795 11360 48362107
ID#
NOMBRE
(Acidos Grasos)
Tiempo de
retencin
(min)
Concentracin
(%)
1 C6:0 - 0.000
2 C8:0 - 0.000
3 C10:0 - 0.000
4 C11:0 - 0.000
5 C12:0 - 0.000
6 C13:0 - 0.000
7 C14:0 - 0.000
8 C14:1cis9 10,661 15,650
9 C15:0 - 0.000
10 C15:1cis10 - 0.000
11 C16.0 - 0.000
12 C16:1cis9 14,025 24,143
13 C17.0 14,988 2,560
14 C17.1cis10 15,781 3,200
15 C18:0 - 0.000
16 C18.1trans9 17,378 8,837
17 C18.1cis9 - 0.000
18 C18.2trans9,12 18,183 12,419
19 C18:2cis9,12 - 0.000
20 C20.0 19,487 10,528
21 C18.3cis6,9,12 - 0.000
22 C18:3n3 - 0.000
23 C21:0 21,000 8,093
24 C21:1 - 0.000
25 C20:2cis11,14 - 0.000
26 C22:0 - 0.000
27 C20:3n6 - 0.000
28 C20:3n3 - 0.000
29 C22:1n9+C20:4n6 - 0.000
30 C23:0 24,295 1,525
31 C22:2cis13,16 - 0.000
32 EPA (C20:5n3) 25,548 2,642
33 C24:0 - 0.000
34 C24:1cis15 - 0.000
35 DHA (C22:6n3) 29,037 10,403

2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 min
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
5.0
5.5
6.0
uV(x1,000)
Chromatogram
1
/
C
1
4
:
1
c
i
s
9
2
/
C
1
6
:
1
c
i
s
9
3
/
C
1
7
.
0
4
/
C
1
7
.
1
c
i
s
1
0
5
/
C
1
8
.
1
t
r
a
n
s
9
6
/
C
1
8
.
2
t
r
a
n
s
9
,
1
2
7
/
C
2
0
.
0
8
/
C
2
1
:
0
9
/
C
2
3
:
0
1
0
/
E
P
A
1
1
/D
H
A
Perfil de cidos Grasos I. galbana
Equipo AEON
Equipo FCH
Desarrollo de Productos
Materia Prima Utilizada
Aceite de microalgas con alto nivel de DHA (mn 22,5%) y
EPA (mn 10%).
Biomasa, corresponde a la especie Spirulina maxima, la
cual posee cerca de 60% de protenas.
Desarrollos en FCH
Hamburguesa vegetal
Kanikama
Pastas
Brownie


Desarrollos FCH
Hamburguesa vegetal
Objetivo: Hamburguesa vegetal alta en protenas, sin
gluten, reemplazando parcialmente soya con spirulina
seca.
Actividades: Incorporacin de 2 dosis (2 y 5%) de
spirulina.
Resultado:
Hamburguesa alta en protena (22g/ porcin)
Aporte de ms del 50% de la DDR de spirulina.
Present deficiencias organolpticas (color, sabor y aroma a
microalgas).


Sin espirulina, Con espirulina

Desarrollos FCH
Kanikama:
Actividades: Incorporacin de distintas dosis (2-10%) de
spirulina.
Uso de saborizante
Resultado:
Dosis de 4% tuvo los mejores resultados (firmeza y apariencia)
Calidad organolptica insuficiente (color, sabor y olor).


Desarrollos FCH
Pastas:
Objetivo: Desarrollar pasta tipo fetuccini, con buena
fuente de protenas, adicionando spirulina seca.
Actividades: Incorporacin de 4 dosis de spirulina (2 a
10%) y evaluacin de saborizantes y aromas (espinaca y
albahaca).
Resultados:
Pasta con buena fuente de protenas (9,2g/porcin) con adicin
de 1,9% de spirulina.
Los mejores resultados sensoriales, se obtuvieron utilizando
sabor/ aroma a albahaca.



Desarrollos FCH
Brownies:
Objetivo: Desarrollar brownies enriquecidos con biomasa
de spirulina y aceite alto en DHA.
Actividades: Reemplazo de harina de trigo por biomasa
de microalga (3 a 6%) y reemplazo de materia grasa por
aceite de microlaga (0,4 a 1,5%).
Resultado Test de Calidad:
Con aceite de microalga: muy buena calidad sensorial, similar al
control,.
Con biomasa: present una calidad inferior calificada como
deterioro tolerable.

Desarrollos Empresas y CT Red de
Colaboracin FCH
Galleta horneada Aceite alto en DHA
Snack extruido Biomasa spirulina

Desarrollo Centro Tecnolgico en
colaboracin con FCH
Galleta horneada:
Objetivo: Desarrollar una galleta organolpticamente
aceptada, que contenga 100 mg DHA/ porcin (30g).
8 ensayos variando frmula y dosis de aceite de
microalga incorporado (1,2 a 4%).
Ensayo con 1,2% de aceite (130mg DHA/ porcin) fue
seleccionado, presentando excelente caractersticas
sensoriales, sin diferencia con el control.
Desarrollo Centro Tecnolgico en
colaboracin con FCH
Snack extruido:
Objetivo: Desarrollar un snack enriquecido con biomasa
de microalga, entre 1,5 a 3 g/ porcin (30g).
8 ensayos, variando frmula, saborizacin y dosis de
biomasa de microalga (2 a 6%).
Selecciona ensayo con 6% de microalga (1,8g spirulina/
porcin).
Microalga aporta color y sabor.


Desarrollo Empresas en
colaboracin con FCH
Barra de Cereales:
Objetivo: Desarrollar un snack enriquecido con DHA
proveniente de aceite de microalga.
Se incorpor a tres tipos de barras con 100 mg de DHA
por porcin (300 mg aceite).
Todos los productos fueron sensorialmente aceptados.
Variedad Mix cereales y Barra de Arndanos: base de
avena y crispines de arroz
Variedad qunoa- manzana

Desarrollo Universidad en
colaboracin con FCH
Micro encapsulacin de aceite
Objetivo: enmascaramiento de sabor y aroma del
aceite de microalgas para su aplicacin en
alimentos.
Se evaluaron 10 frmulas de soporte de secado,
variando el % de aceite y recubrimiento (1:2 a 1:5).
Se cuantific una prdida de 26% de DHA posterior
al proceso.
Se logr adicionar hasta 1% del aceite
microencapsulado en yogurt (eq. 175 mg DHA/
porcin) con una aceptacin media.





Brechas Identificadas con el Proyecto
Falta de tecnologa para
Mejorar la produccin
Mejorar el proceso para:
No deteriorar la calidad nutricional de la biomasa
La extraccin de aceite sin utilizar solventes.
Falta analtica estandarizada para determinacin de perfiles de
cidos grasos.
Uso limitado de ingredientes derivados de la microalga para la
industria alimentaria: aporte de color, sabor y/o aroma.
Avanzar en una normativa que d mayor claridad respecto al uso
de microalgas en alimentos.


Proyectos 2014/2015?

UNIDAD PESIMISTA BASE OPTIMISTA
PRECIO
US$/Kg
11 12 14
PRODUCTIVIDAD
T/ha/ao
33,8 39 41,6
CAPEX
MUS$/ha
1.100 1.000 900
TIR
%
0,79% 21,2% 42,5%
VAN @ 15%
MUS$
(9.315) 1.764 18.486
PRODUCTO: BIOMASA RICA EN DHA

DISTRIBUCIN: DISTRIBUIDORES
EVALUACIN DE ESCENARIOS