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Análisis Microbiológico de
Alimentos
- 3 a 4 días (o mas)
- Tiempo=$$$
*Métodos Rápidos Modernos. Dra. Norma Heredia Rojas. RESPYN/ Revista de Salud
Pública y Nutrición. No. 5 2004
Los métodos rápidos de acuerdo a lo que se
busca*:
*Métodos Rápidos Modernos. Dra. Norma Heredia Rojas. RESPYN/ Revista de Salud
Pública y Nutrición. No. 5 2004
Martes, 6 de marzo
Actualizado a las 12:51:19 a.m.
de 2007
Más de 50 personas se intoxican con mayonesa en Ica
Una de las salsas que acompaña al pollo a la brasa, la mayonesa, fue la causa de la
intoxicación de más de 50 personas, entre niños, adultos y ancianos, que acudieron la noche del
domingo…
FDA News
Media Inquiries:
Mike Herndon, 301-827-6242
FOR IMMEDIATE RELEASE Consumer Inquiries:
P07-41 888-SAFEFOOD
March 9, 2007
BIOFILM O BIOCAPA
Para qué muestreamos?
Plástico
Madera
Tubería Manos
Mesas Charolas
Cadenas Etc.
Cómo muestrear?
RAYAR LA SUPERFICIE
GIRAR EL HISOPO
Cómo muestrear?
IDENTIFICAR EL HISOPO
RAYAR LA SUPERFICIE
NO UNA SOLA LINEA
GIRAR EL HISOPO
NO UN LADO DEL HISOPO
INSERTAR DE INMEDIATO EN
NO GUARDAR HISOPO
MVP
NO REVOLVER HISOPOS
IDENTIFICAR EL HISOPO
LLEVAR DE INMEDIATO A LAB.
La herramienta real
en HACCP
Que es ATP?
Adenosin Trifosfato
“Paquete de energía” que usan todas las
células
Animales
Vegetales
Bacterias, levaduras y Hongos
Reacción de Bioluminiscencia
Luz
Luciferasa
Luciferin
Quimiluminiscencia Bioluminiscencia
Luciferin Reducida
Luciferasa
Luciferin
Luz Luz
Prevención de Interferencias
Un Instrumento
Multiples Pruebas
Un Reporte
Tecnologia de ultima generación
Mecanismo
Teclado sellado exclusivo de
Microprocesador de ultima inserción del
generación hisopo.
Camara de lectura
con estabilizador Bateria de Litio
optico.
Multiples Pruebas
Higiene de superficies usando el dispositivo de
muestreo de ATP
Cámara de mezcla y
disolución
Cámara seca
Buffer Enzimas
Luciferina
Luciferasa
Punta vortex
La solución Buffer
disuelve la enzima y
pasa por dentro del
tubo del hisopo.
LIGHTNING MVP Dispositivo de Muestreo
Area de lectura de
luz.
MVP ATP
Dispositivo de muestreo de liquidos
El dispositivo MVP para ATP en líquidos permite recolectar
la muestra sin el uso de pipetas.
Cámara de Lectura con
estabilizador de luz.
El equipo MVP puede detectar niveles
muy bajos de ATP
15x10-12 gramos de ATP
(15 picogramos o 0.000,000,000,015
gramos of ATP)
El aislador fotométrico elimina la
posibilidad de exponer el PMT a luz
externa.
Mejor precisión y mejor vida útil del PMT.
Como Leer los Resultados
Pantalla del Luminómetro
Lectura de ATP
Punto de Prueba 01
Codigo 10
(nombre del punto de prueba)
Busqueda < >
Falla
Zona 3.5
Alerta Falla
2.5 3.0
Como interpretar los Resultados
140
120
100
Precaución
Número de
Zona de
hisopos
80
60
40
20
0
1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9 2.0 2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 2.6 2.7 2.8 2.9 3.0
9 80
8
70
7
pH limit 60
6
50 temp limit
40
30
ATP limit 3
20
2
ATP Result
10 pH
1
Temp (F)
0 0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Test Points on Conveyer
TRAX Tendencia en un
parametro
TRAX
Tendencias en multi parámetros
14.0 100
13.0
90
Zone/pH
12.0
11.0 80
Temp
10.0 70
9.0
60
8.0 Zone
7.0 50 pH
Temp
6.0
40
5.0
4.0 30
3.0 20
2.0
10
1.0
0.0 0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Test Points
FLASH®
Analisis de Proteina
Pruebas de Proteina fueron historicamente usadas en el
área clinica y aplicaciones de R&D
Ventajas
Proteina es un buen indicador de eficiencia de limpieza:
• Gran parte de los alimentos tienen proteina en su composición
• Residuo muy dificil de eliminar
No es necesario equipos para hacer la prueba
• Excelente costo beneficio
• Puede ser usado por personal no técnico
Resultos Rapidos
• Resultados en “real time” permite acciones immediatas
Tecnologia Detección
Proteina
Restricciones
No especifica
• Otras estructuras quimicas pueden generar reacciones cruzadas
Proteina Detectada
Detected Protein
Soluble Protein
Proteina Soluble
Insoluble Protein
Proteina No Soluble
Tecnología de Sustrato
Cromogénico aplicado a Análisis de
Alimentos y Monitoreo Ambiental.
Preparación de la Muestra
Homogenizar.
Procedimiento de la Prueba
Prueba Individual
Cuenta Total 35 ºC ± 2 ºC 24 h – 28 h
(TPC-CI y TPC)
Hongos y Levaduras 22 ºC – 25 ºC 72 h ± 2 h
(Y&M-CI y Y&M) 30 ºC ± 2 ºC 48 h
INTERPRETACIÓN DE
RESULTADOS
SimPlate – Color Indicador
Cuenta Total y Hongos y Levaduras
8 Pocillos (+) = 16
INTERPRETACIÓN DE
RESULTADOS
SimPlate – Color Indicador
Coliformes Totales y E. coli
Utilizar la tabla de
conversión SimPlate para
determinar el Número de
microorganismos por placa.
Si la muestra es 0.1 ml
se multiplica el No. de
microorganismos por 10.
Si se realizan diluciones
se multiplica el No. de
microorganismos por el
factor de dilución.
Pocillos (+) = 9
Sin Dilución:
18 UFC o NMP.
9 = 18
TPC-CI
Dilución 1:10 :
No. de Microorganismos = (Población) x (Factor de
dilución)
No. de Microorganismos = (18) x (10)
COLOR
MORADO
ORIGINAL
Cuenta Total (TPC)
8 Pocillos (+) = 16 UFC
Coliformes Totales (Cec) E. coli (Cec)
10 Pocillos (+) = 22 UFC 10 Pocillos (+) = 22 UFC
VIP
Tecnología que tiene como base
científica la técnica de Flujo Lateral
InmunoPrecipitación Visual para
detección de patógenos en muestras
de alimentos y ambientales.
La prueba VIP tiene reactivos exclusivos que
forman un Complejo antígeno-anticuerpo-
cromogénico si el microorganismo patógeno
esta presente en la muestra, asegurando altos
niveles de sensibilidad y especificidad
exigidas por AOAC, FDA y USDA.
Antigeno M1 EHEC
Latex +
Resultado Control
Anticuerpos
Positivo
FUNDAMENTO
VIP Listeria AOAC 997.03
Procedimiento
1) 2) 3) 4)
VIP Listeria AOAC 997.03
Procedimiento
1) 2) 3) 4)
VIP EHEC AOAC 996.09
Procedimiento
A. 8 h de Enriquecimiento
Prueba
Preparación Enriquecimient Inactivación
Transferir 0.1 ml
del Medio o Mezclar la del Caldo
Precalentar 225 Agregar 25 g de muestra enriquecido
ml de agua muestra a 225 ml enriquecida y inactivado en el
destilada estéril del medioMuestra
mEHEC transferir 4 ml a pocillo del
a 42°C, durante preparado. un tubo de Dispositivo VIP
la noche antes ensayo. EHEC.
del uso.
Agregar 7.1 g de
medio mEHEC Homogenizar
en 225 ml de durante 2 min.
agua estéril
Incubar a 15–25
precalentada y
°C durante 15–20
Disolver. Incubar a 42°C min.
durante 8 h. Inactivar a 100 °C
VIP EHEC AOAC 996.09
Procedimiento
B. 18 - 28 h de Enriquecimiento
Prueba
Enriquecimiento
Transferir 0.1 ml de
Agregar 25 g de Caldo Soya
muestra a 225 ml Tripticasa en el
de Caldo Soya pocillo del
Tripticasa Dispositivo VIP
modificado con EHEC.
novobiocina
(mTSB+n)Muestra
y
Mezclar.
Incubar a 15–25 °C
durante 10 min.
VIP
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Prueba Inválida
1-2 TEST
Prueba rápida cualitativa para la detección de Salmonella
móvil en alimentos, ingredientes y muestras ambientales.
FUNDAMENTO
Pesar 25 g de muestra.
Homogenizar.
Enriquecimiento Selectivo
B) Procedimiento de la Prueba
Tapar y Agitar.
1-2 TEST
PROCEDIMIENTO
B) Procedimiento de la Prueba
B) Procedimiento de la Prueba
3) Inoculación
* Para productos Procesados
3) Inoculación
* Para Carne Cruda y Productos altamente Contaminados
B) Procedimiento de la Prueba
B) Procedimiento de la Prueba
5) Agregar el Anticuerpo
B) Procedimiento de la Prueba
6) Incubación
C) INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
C) INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
C) INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
D) CONFIRMACIÓN
Inmunbanda en Inmunbanda de
forma de forma
Menisco Asimétrica
Inmunobanda Inmunbanda
asimétrica hacia asimétrica hacia
la derecha. la izquierda.
Polymerase Chain Reaction (PCR)
GRACIAS