GENETICA BACTERIANA

Curso de Microbiologa I
Departamento de Microbiologa
Dra. Virginia de Corzo
FMVZ
Estructura y funcin del
genoma bacteriano
El material gentico de las bacterias se
encuentra en el citoplasma, se le
denomina como nucleoide, cuerpo
nuclear, regin nuclear.

Esta compuesto de alrededor de 80% de
DNA, 10% de RNA y 10% de protenas
(RNA polimerasa).
En 1963 se logro aislar y extender el
cromosoma de E. coli, determinado que
tiene una longitud de 1 mm. Es una tira
circular doble y que se encuentra super
enrollado.
El termino genoma se refiere al conjunto
completo de elementos genticos (genes)
dentro de la clula.
Los procesos genticos requieren tres
tipos de polmeros:
Acido Desoxirribonucleico (DNA).
Acido Ribonucleico (RNA)
Protenas.
DNA:
El cromosoma bacteriano nico contiene
dos tiras complementarias de DNA que
estn enrolladas alrededor una de la otra
en patrn helicoidal, con los extremos
unidos para formar una molcula circular.
Las molculas de DNA son de doble
cadena con bases complementarias. Esta
caracterstica le permite a una de las
cadenas proporcionar la informacin para
el copiado de la informacin en la otra
cadena.
Cada par de bases esta compuesto por
una purina y una pirimidina.
Las purinas de una cadena forman
puentes de hidrogeno con las pirimidinas.
El par A-T con 2 uniones puente de H.
El par G-C con tres uniones.
Cada una de las cuatro bases esta unida a
una fosfo-2-dexosirribosa para formar un
nucletido.
La longitud de una melecula de DNA se
expresa en miles de pares de bases o en
kilobases (kb).
El cromosoma de una bacteria, E. coli, es
una molcula circular nica que contiene
alrededor de 4,500,000 pares de bases o
4500 kb. Con una longitud aproximada de
1 mm.
RNA:

Existen 3 diferencias entre la qumica
del DNA y la del RNA:
1. Las macromolculas del RNA
contienen el azcar ribosa en lugar de
desoxirribosa.
2. El RNA tiene la base uracilo en lugar
de timina.
3. El RNA no es una molcula de tira
doble
Las bacterias contienen 3 tipos de RNA:

1. RNAm: (mensajero), su funcin es copiar el
cdigo gentico del gen (DNA cromosmico)
y llevar este mensaje al sitio de sntesis de
protenas (Ribosomas).

2. RNAt (transferencia), traduccin del mensaje
de RNA en una secuencia especifica de
aminocidos.

3. RNA (ribosomal) sntesis de protenas.
ENZIMAS
1. Toposisomerasa II: promueve el
superenrollarmiento (DNA girasa)
2. Toposisomerasa I: controla el
desenrrollamiento.
3. RNA polimerasa: hace que las dos
tiras de DNA se desenrollen de modo
que se pueda transcribir la
informacin.
RNAt
4. DNA ligasa: une los fragmentos
sintetizados.

5. Primasa: inicia la sntesis de un
fragmento roto.
RECOMBINACION GENETICA
Es el proceso por el que los elementos
genticos contenidos en dos genomas
separados se juntan en una unidad.

Trae como consecuencia un cambio.

Se transfieren genes completos, grupos
de genes o cromosomas completos.
Formas de Recombinacin
Transformacin: el DNA libre se
incorpora a una clula.
Transduccin: La transferencia del DNA
donador esta mediada por un virus.
Conjugacin: la transferencia de DNA
implica contacto clula clula y la
presencia de un plasmido y de una
estructura llamada pili.
TRANSFORMACION
Este descubrimiento fue uno de los
hechos mas relevantes, pues condujo a
experimentos que probaron que el DNA
es el material gentico. Fred Grifth
(1920).
Trabajos con Streptococcus
pneumoniae.

No todas las bacterias tienen esta
capacidad, sino clulas competentes que
son capaces de tomar una molcula de
DNA y lo integran a su cromosoma.

Intervienen: protenas especiales que
intervienen en el trasporte e incorporacin
del DNA.
Transformacion: Etapas
1. Unin del DNA: protena asociada a la
membrana: autolisina y nucleasas.
2. Incorporacion del DNA:
Primero se fija reversiblemente, luego
se vuelve irreversible.
3. Integracion del DNA: protena de unin,
en el cromosoma protena RecA
Cuando una clula es capaz de tomar una
molcula o un fragmento de DNA y
transformarse se denomina clula
competente.
Solo algunas cepas poseen esta
caracterstica, parece ser una propiedad
hereditaria.
Experimento de Griffith
Neumococo vivo
capsulado. (S)
Ratn muerto
Se aslan cepas lisas
Neumococo muerto
por calor
Ratn vivo.
Neumococo vivo
rugoso (R) no
capsulado
Ratn vivo.
Neumococo (R)
vivo +
Neumococo muerto
Ratn muerto: se aslan
cepas S
TRANSDUCCION
El DNA se transfiere de una clula a otra
por medio de un virus: bacterifago.


Transduccion

Transduccin
Cuando un fago infecta a una bacteria,
capta fragmentos del genoma de la clula
hospedadora.
Al infectar a otra bacteria el fago
transductor puede transferir sus propios
genes y tambin los de la clula
hospedadora de la cual procede.
Transduccin
Puede ocurrir de 2 formas:
1. Transduccin generalizada:
Cualquier porcin del genoma
bacteriano pasa a formar parte del
genoma de la partcula vrica.


Transduccin
2. Transduccion especializada:
El DNA de una regin especifica del
cromosoma del hospedador se integra
directamente en el genoma del virus.

No todos los fagos pueden transducir, ni
todas las bacterias son transducibles.
Transduccin
El mecanismo de transduccin fue
descubierto por Zinder y Lederberg
(1952).
Estudiando la recombinacin gentica
entre diferentes cepas de Salmonella
typhimurium.
CONJUGACION
Implica el contacto clula clula.
El material gentico transferido puede ser
un plasmido, o una porcin del
cromosoma.
Una clula donadora trasmite la
informacin gentica a otra clula, la
receptora.
La clula donadora posee el pili o pelo
sexual.
conjugacion
La capacidad de la clulas para actuar
como donantes se debe a la presencia de
factor f o factor de fertilidad.
Las clulas que carecen de factor f, son
receptoras.
PLASMIDOS
Son elementos genticos que se replican
independientemente del cromosoma.
Se encuentran dentro de la clula.
Existen varios tipos de plasmidos.
En E coli, se han aislado mas de 300
Tipos de plasmidos
P. conjugativos: codifican pili sexuales y
protenas necesarias para la transferencia
de DNA.
P. R (resistencia a los antibiticos,
mercurio).
P. Produccin de bacteriocinas y
antibiticos.

Tipos de plasmidos
Plasmidos de funciones fisiolgicas:
Utilizacin de urea,
Fermentacin de carbohidratos.
Produccin de pigmentos.
Plasmidos de virulencia: produccin de
toxinas, enzimas, tumores.

E coli, posee un plasmido conjugativo
llamado Factor F:
- Capacidad para sintetizar pili.
- Movilizacin del DNA para su
transferencia.
- Alteracin de receptores de la superficie
de la clula.

Terapia genica

MUTACION
Es un cambio hereditario en la secuencia
de bases del acido nucleico que constituye
el genoma de un organismo.
Fenotipo: las caractersticas observables
de un organismo.
Genotipo: constitucin gnica precisa de
un organismo. (conjunto de genes)

MUTACIONES
Cepa silvestre: cepa aislada de la
naturaleza.

Se pueden obtener mutantes de una cepa
silvestre o de una derivada de esta.

Pueden ocurrir cambios perjudiciales,
neutros o beneficiosos.


MUTACIONES
M. Espontneas.
Ocurren en la naturaleza, sin ser
provocadas.
Ej: efectos de la radiacin natural, que
alteran la estructura de las bases de DNA.
Errores en el apareamiento de bases.
Tipos de mutantes: No capsulado,
inmvil, fermentacin de azucares.
MUTACION
Mutaciones inducidas por mutgenos,
sustancias que inducen a mutaciones.
Mutgenos qumicos: reaccionan
directamente con el DNA, ocasionando
cambios qumicos, en las bases.
Acido nitroso, bromuro de etidio etc.
Mutgenos fsicos: rayos UV, rayos X.