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Gluconeognesis.

Descarboxilacin
oxidativa del piruvato. Ciclo de Krebs.
Va de las Pentosas. Lanzaderas. Balance
energtico
Gluconeognesis
Es la sntesis de glucosa a partir de grasas o protenas.
Por principio, gluconeognesis y gliclisis son vas
opuestas en el metabolismo.
Existen en la gliclisis tres etapas que por su desnivel
energtico deben sobrepasarse mediante procedimientos
alternos.
La gluconeognesis usa cuatro reacciones diferentes para
sobrepasar esas tres etapas.

Gliclisis y gluconeognesis
Hgado y rin tienen todas las enzimas de
la gluconeognesis, pero 80% se realiza en
el hgado.
La 1ra. etapa se realiza en la mitocondria,
transformando piruvato en oxalacetato.
Las siguientes en el citosol y la ltima en
el retculo endoplasma
Para una mol de glucosa se requiere 4 ATP
y 2 GTP y 2 NADH
De dnde provienen los precursores
de la gluconeognesis?
Del tejido adiposo, el glicerol
(Glicerol fosfato-DHAP-glu-
cosa) de los triglicridos.
Del tejido muscular y los he-
mates, el cido lctico (ci-
do lctico-piruvato-glucosa).
De la protena muscular, la ala-
nina que se transamina a piru-
vato.
Otros aminocidos, llamados
glucogenticos.
Glucosa
PEP
Oxalacetato
Alfa
cetoglutarato
Succinil
CoA
Fumarato
amino
cidos
amino
cidos
amino
cidos
Aminocidos
precursores
de glucosa
Enzimas de la gluconeognesis
Piruvato carboxilasa, enzima que transporta al grupo carboxilo,
mediada por la biotina


Fosfoenolpiruvato carboxiquinasa: fuera de la mitocondria trans-
forma al oxalacetato en fosfoenolpirvico. Requiere de GTP.


Fructosa difosfatasa: enzima citoslica


Glucosa 6 fosfatasa
Pi ADP o Oxalacetat ATP HCO Piruvato
Biotina

3
2 CO GDP iruvato Fosfoenolp GTP o Oxalacetat
Pi P F O H PP Fructosa 6 6 , 1
2
Glucosa 6 fosfato + H
2
O Glucosa + Pi
Glucosa 6 fosfatasa
Esta reaccin sobrepasa la catalizada por la hexoquinasa o
la glucoquinasa.
La enzima est localizada en el retculo endoplasma y
tiene cinco subunidades.
G6P
G6P Glucosa+Pi
Luz del retculo
endoplasma
Citosol
T1
T2
T3
G6Fos.asa
Pro.Regula
con Ca++
Metabolismo del piruvato
El piruvato ocupa una posicin central y fundamental entre
los metabolismos de carbohidratos, grasas y protenas, a
travs de su vinculacin con lactato, alanina, acetil CoA y
oxalacetato.
PIRUVATO
Glucosa Aminocidos
Lactato Alanina
Acetil CoA Oxalacetato
CO2+H2O Ac.grasos Acetona Krebs Gluconeognesis
Piruvato deshidrogenasa
La piruvato deshidrogenasa une la Gliclisis con el Ciclo
de Krebs, mediante el procedimiento de Decarboxilacin
Oxidativa, en el cual el grupo carboxilo del piruvato es
liberado como CO2 y los dos carbonos remanentes forman
acetil CoA.


La PDH es un complejo multienzimtico formado por tres
enzimas y cinco coenzimas.
De las coenzimas, dos de ellas CoA y NAD, se asocian al
sustrato, mientras que las otras, TPP (pirofosfato de
tiamina) , c.lipoico y FAD se asocian al complejo.
El complejo tiene adems una quinasa y una fosfatasa que
desactivan y activan a la PDH, respectivamente.

H NADH CO CoA S CO CH NAD SH CoA COOH CO CH


2 3 3
Complejo PDH
La Decarboxilacin es iniciada por E1 en presencia de
TPP, luego E2 en presencia de c.lipoico oxida al
compuesto y lo prepara para unirse a la CoA. El
c.lipoico es reoxidado por el FAD y E3
Enzimas y coenzimas de la
Decarboxilacin Oxidativa.
Enzimas Coenzimas Participacin
E1-Piruvato dehidrogenasa TPP Decarboxilacin
E2-dihidrolipoil transacetilasa Ac.lipoico Oxidacin-Transferencia de acilo
E3-dihidrolipoil deshidrogenasa CoA-SH Regeneracin de cido lipoico
Piruvato DH quinasa FAD Fosforilacin e inactivacin de E1
Piruvato DH fosfatasa NAD Defosforilacin y activacin de E1
Regulacin de la
actividad de la PDH
PDH PDH P
AcetilCoA, NADH, ATP
quinasa
Fosfatasa
Insulina, PEP, AMP
(+)
NAD
+
ADP
CoASH
Piruvato
(-)
(+)
Activa
Inactiva
Otros destinos del piruvato
Transformacin de piruvato en lactato, con reoxidacin
del NADH a NAD (LDH).


Transaminacin del piruvato a alanina (ALT).



Carboxilacin de piruvato a oxalacetato, paso inicial de
la neoglucognesis.
NAD COOH CHOH CH H NADH COOH CO CH 3 3
ato cetoglutar alanina Glutamato Piruvato
Ciclo de Krebs
Importancia Fisiolgica
Mitocondrias: organelos
Organelos del tamao de una
bacteria (1x2um) especia-
lizados en mecanismos oxida-
tivos y en sntesis de ATP.
Una clula eucariota puede
contener hasta 2000 mito-
condrias, aproximadamente
25% de su volumen.
Constan de una membrana
externa, una interna y un
espacio intermembranoso.
La membrana interna tiene el
ms alto contenido proteico
que ninguna otra membrana
en la clula.
Membrana
interna
Membrana
externa
Matriz
La membrana externa se puede separar y
asislar mediante la digitonina, shock
osmtico o radiacin ultrasnica seguida
de centrifugacin en gradiente de
densidad.
Mitocondrias:membranas
Diferentes tejidos tienen diferen-
te nmero y cantidad de crestas,
de acuerdo a la oxidacin.
La membrana externa tiene unas
protenas integrales llamadas po-
rinas ,formando poros para el in-
greso de molculas menores de
10 000 de peso molecular.
La membrana interna es imper-
meable a la mayora de mol-
culas salvo agua, O
2
o CO
2
.
La membrana interna tiene 75%
de protenas como protenas
transportadoras, cadena respi-
ratoria, ATP sintetasa.
Transportador
ATP sintetasa
Cadena
respiatoria
Enzimas del
Metabolismo
oxidativo
Nucletido
quinasas
Poro
Enzimas del
Metabolismo de
lpidos
Funciones metablicas de la
mitocondria
Piruvato
Piruvato
3 CO
2
3 CO
2
Acetil CoA
Krebs
NAD
FAD
Ca
2
+
Ca
2+
nH
+
nH
+
nH
+
4e(-)
O
2
2H
2
O
P
A
P P P
H
+
H
+
A
P P
+
A
P P P
B-oxidacin
Acil CoA
Acil CoA
Ciclo de la Urea
Urea
HCO
3
+
NH
3
Partes de la mitocondria

Membrana externa: Porosa y permeable a iones y pequeas molculas.
Membrana interna: altamente impermeable. Las molculas requieren de
transportadores proteicos. Gracias a sus pliegues aumenta su superficie.
En la membrana hay transportadores proteicos, deshidrogenasas FAD
dependientes, y todas las enzimas de la Fosforilacin Oxidativa.
Espacio intermembranoso contiene dos enzimas fundamentales : la
adenilatoquinasa y la nuclesido difosfato quinasa.






Matriz: contiene muchas enzimas, como las del Ciclo de Krebs, la pirvico
deshidrogenasa, la glutamato deshidrogenasa, y las de la b oxidacin.

AMP ATP ADP
uinasa adenilatoq
2
ATP XDP ADP XTP
uinasa difosfatoq muclesido

Ciclo de Krebs y los macronutrientes
CARBOHIDRATOS PROTENAS GRASAS
GLUCOSA AMINOCIDOS CIDOS GRASOS
Acetil CoA
Ciclo
de
Krebs
CO
2
ATP
Ciclo de Krebs:energa
El Ciclo de Krebs es un conjunto de reacciones qumicas
que se efecta en las mitocondrias, para catabolizar los
residuos de Acetil CoA producidos en el metabolismo de
carbohidratos y grasas.
Este Ciclo libera energa que se guarda como ATP y
molculas de CO2 que se eliminan con la respiracin.
Esas funciones se llevan a cabo en todos los tejidos pero
con ms importancia en el hgado.
Es responsable de 2/3 de la produccin calrica del
organismo.
Ciclo de Krebs: principio general
Oxalacetato(C4) Citrato(C6)
Acetil CoA(C2) CoA
CO2
CO2
Ciclo de Krebs: valor calrico
Durante la oxidacin del Acetil CoA se forman
equivalentes reductores como H
+
o electrones en la
matriz mitocondrial adyacente a la membrana interna.
As, la transferencia a la cadena respiratoria que est en
la membrana mitocondrial interna se realiza con
facilidad.
Todo el proceso es
aerbico, luego sin
oxgeno se inhibe
total o parcialmente.
Partes del
Ciclo de Krebs
A partir de un acetil
CoA se producen dos
molculas de CO2.
Se generan cuatro
pares de hidrgenos
que son captados por
3 NAD y 1 FAD.
Adems se produce
una fosforilacin a
nivel del sustrato.
Piruvato
AcetilCoA
Citrato
Isocitrato
Alfa cetoglutarato
Succinato
CoA
Oxalacetato
Malato
Fumarato
Succinato
GTP
GDP +Pi
O=C--COO
-

H--C--COO
-

H
HO--C--COO
-

H--C--COO
-

H
H

H--C--COO
-

H--C--COO
-

OH--C--COO
-

H
H

H--C--COO
-

H--C--H


O=C--COO
-
H

H--C--COO
-

H--C--H


O=C~SCoA

H

H--C--COO
-

H--C--H


COO-

COO-

H--C--H


H--C


COO-

COO-

C--H


H--C--H


COO-

COO-

HO-C--H


H
2
O
CoA-SH
NAD
+

NADH+H
+

NAD
+
NADH+H
+
CO
2

GDP+Pi
GTP
FAD
FADH
2
H
2
O
Fumarasa
H
H-C-CO~SCoA
H
+
NAD
NADH+H
+
Oxalacetato
Citrato
Isocitrato
cetoglutarato
Succinil CoA
Succinato
Fumarato
Malato
Ciclo de Krebs
CO
2
Ciclo de Krebs: etapas 1 y 2
1.- Condensacin inicial del Acetil CoA con el Oxalacetato con
liberacin de energa del enlace tioester por accin de la citrato
sintetasa.
CoA Citrato O H o Oxalacetat AcetilCoA
2
2.- Conversin de citrato en isocitrato. Se forma transito-
riamente cis aconitato. La realiza la enzima aconitasa.
Isocitrato aconitato Cis Citrato
H2O H2O
Ciclo de Krebs: etapas 3 y 4
3.- Dehidrogenacin del isocitrato, formando oxalsuccinato. Existen tres
isoenzimas: la NAD especfica de las mitocondrias, y las NADP espec-
ficas de mitocondrias y citosol. La NAD especfica se acopla a la cadena
respiratoria.
H NADH CO ato cetoglutar ato oxalsuccin NAD Isocitrato
enzima la a unido


2

Esta reaccin requiere Mg++ y genera 3ATP por Mol de acetilo


4.- El alfa ceto glutarato pasa por una decarboxilacin oxidativa seme-
jante a la del piruvato. Requiere los mismos cofactores y vitaminas tales
como, difosfato de tiamina, c.lipoico, NAD,FAD y CoA. La enzima es
la cetoglutarato dehidrogenasa y forma Succinil CoA.
H NADH CO A SuccinilCo CoA NAD ato cetoglutar 2
Esta reaccin genera 3ATP por Mol de acetilo.
Ciclo de Krebs: etapas 5 y 6
5.- La succinil CoA se convierte en succinato por accin de una
tioquinasa. En esta reaccin la energa liberada por la unin con la
CoA permite la sntesis de una mol de ATP. A nivel del sustrato.
CoA ATP succinato ADP Pi A succinilCo
6.- El succinato es metabolizado por una deshidrogenasa, unida a la
superficie interna de la membrana mitocondrial. En la nica
deshidrogenasa que transfiere hidrgeno al FAD sin pasar por el NAD.
Genera fumarato.
2
FADH Fumarato FAD succinato
Esta reaccin slo genera 2 ATP en la cadena respiratoria.
Ciclo de Krebs: etapas 7 y 8
7.- La fumarasa cataliza la incorporacin de una mol de agua para
formar malato.Se elimina la doble ligadura anterior.
malato O H fumarato
2
8.- El malato es convertido a oxalacetato por una deshidrogenasa en
presencia de NAD.
H NADH o oxalacetat NAD malato
Esta reaccin genera 3ATP por mol de acetilo, en la cadena respi-
ratoria y proporciona el oxalacetato necesario para reiniciar el ciclo
con una molcula ms de acetil CoA.
Ciclo de Krebs : balance calrico
Se producen tres molculas de
NADH y una de FADH2 por
cada molcula de acetil CoA.
En la membrana mitocondrial
interna se recibe estos equiva-
lentes reductores por la cadena
respiratoria.
Cada paso por la cadena genera
3 ATP a partir del NAD pero a
partir de FAD slo 2.
Un enlace de alta energa se
genera a nivel del sustrato.
En total se forman 12 ATP por
ciclo de Krebs.

Enzi m a
ATP
Deshid r ogenasa isoct r ica
3
Deshid r ogenasa d el cet oglut ar at o
3
Succinat o t ioq uinasa
1
Deshid r ogenasa d el succinat o
2
Malat o d eshid r ogenasa
3
Tot al
12
Generacin de ATP por Ciclo
Vitaminas en el Ciclo de Krebs
Riboflavina como FAD : cetoglutarato
deshidrogenasa y succinato deshidrogenasa.
Niacina como NAD: isocitrato cetoglutarato
deshidrogenasa y malato deshidrogenasa
hidrogenasa.
Tiamina como difosfato de tiamina: para de-
carboxilacin y cetoglutarato deshidrogenasa.
cido pantotnico como Coenzima A.
Control del ciclo de Krebs
Principal funcin del ciclo de Krebs : produccin de ATP.
Una dieta promedio genera 2000 a 3000 kcal por da.
Si ello provee un 50% de generacin de ATP, se debe pro-
ducir aproximadamente 120 moles de ATP o 65 kg del
mismo.
Como el organismo slo tiene 3 a 4 g de nucletidos (ATP
ADP,AMP ) cada molcula debe ser refosforilada miles
de veces al da.
Si una clula no usa el ATP no habr ADP disponible,
luego el NADH no podr ser reoxidado y la relacin
NADH/NAD se elevar y esto detendr al ciclo de Krebs.
Accin de la relacin NADH/NAD
sobre el ciclo de Krebs
El incremento de NADH inhibe a la:
cetoglutarato deshidogenasa
citrato sintetasa
isocitrato sintetasa
piruvato deshidrogenasa.
Estas enzimas tambin se inhiben por el
producto.
Aprovechamiento de los NADH en
la cadena respiratoria
El NADH producido en el citosol por efecto de la gliclisis
(gliceradehido 3P deshidrogenasa) no puede atravesar la
membrana mitocondrial.
En condiciones anaerbicas se aprovecha en la transforma-
cin de piruvato a lactato.
En condiciones aerbicas se aprovecha por la cadena
respiratoria.
El ingreso a la mitocondria est regido por un mecanismo
llamado de lanzadera de equivalentes reductores.
Va de la pentosa fosfato
No es una va esencialmente energtica.
Esta va oxida 30% de glucosa en el hgado y 10% en el
eritrocito.
Tiene dos funciones importantes: generar NADPH para la
sntesis de cidos grasos y de esteroles. Adems provee
ribosa para sntesis de cofactores nucletidos (ej. NAD),
RNA, DNA.
Genera tres molculas de CO2 y 3 pentosas las cuales pro-
ducen dos hexosas y una triosa. Dos triosas pueden regene-
rar una hexosa que se metaboliza por la va glicoltica.
Es una va citoslica , usa NADP como receptor de H y
tiene dos fases: oxidativa (irreversible) y no oxidativa
(reversible).
Va de las pentosas: caractersticas
La va es activa en hgado, tejido adiposo, suprarrenal, tiroides,
eritrocitos, testculos y glndulas mamarias durante la lactancia.
Su actividad es baja en el msculo.
En todos los tejidos se necesita ribosa, luego el msculo puede
producirla por va inversa de la pentosas a partir de fructosa 6P.
El NADPH se utiliza:
En reaccin de biosntesis de cidos grasos, esteroides y c. biliares.
En el eritrocito regenerar glutatin reducido y la reduccin de la
hemoglobina oxidada
Deficiencia:
De G6PD anemia hemoltica.
De transcetolasa (por falta de fosfato de tiamina)
sndrome de Wernicke-korsakoff
Fructosa
Las dietas abundantes en sacarosa incrementan los niveles
de fructosa.
La fructosa se metaboliza ms rpidamente que la glucosa
por no requerir a la fosfofructoquinasa de control.
Favorece entonces la sntesis de c. grasos y estimula la
secrecin de insulina.
La fructoquinasa es independiente del ayuno y la insulina
por lo que la fructosa si se aprovecha en la diabetes.
La afinidad (Km) de la fructoquinasa heptica es alta, es
decir tiene una Km baja.
Fructosa : metabolismo
Galactosa : metabolismo
Proviene de la hidrlisis de la lactosa. El hgado la convierte en
glucosa
No es esencial, la glucosa se transforma en galactosa
Galactosa
Galactoquinasa
ATP
ADP
Galactosa 1P
Glucosa 1P
UDPGlc
UDPGal
Uridin transferasa
Epimerasa
Glucgeno
Glicemia
La glucosa sangunea vara entre 40 y 140 mg/dl durante el
da, dependiendo del balance entre ingresos (alimentos) y
gasto por trabajo (fsico o el del propio del organismo).
Cuando se valora tras 8 horas nocturnas de ayuno vara entre
60 y 110 mg/dl.
Los procedimientos de medida son corrientemente
enzimticos (glucosa oxidasa).
Gliclisis
C.Krebs
V.pentosas
Glucgeno
Glicemia : su relacin
Glucosa y Glucgeno
Glucosa 1-fosfato
UDP glucosa
glucgeno
Glucosa 6-P
UDPg pirofosforilasa
Glucgeno sintetasa
Fosforilasa +
glucano transferasa
glucosa
AMPc
(-)
(+)
INSULINA
GLUCAGON
(-)
(+)
REGULACION ENZIMATICA DE LA
GLICEMIA
La regulacin de la glicemia la
llevan a cabo algunas ENZI-
MAS en el hgado.
El hgado es permeable a la
glucosa va el transportador
GLUT2 que tambin lo tienen
las clulas b del pncreas, el in-
testino delgado y el rin .
La hexoquinasa se autocon-
trola por la glucosa 6 P pero la
glucoquinasa del hgado no .
La glucoquinasa tiene menos a-
finidad (Km mayor) . Por lo que
slo se activa a alta concentra-
cin de glucosa en sangre .
50
100
0 5 10 15 20 25
Glucoquinasa
heptica
Hexoquinasa
muscular
Lanzadera del glicerofosfato
Lanzadera del malato
La piruvato carboxilasa es una enzima mitocondrial, por lo
tanto el oxalacetato que se forma en la matriz mitocondrial
debe salir al citosol para continuar la gluconeognesis.
La membrana interna mitocondrial es impermeable al oxal-
acetato por lo que debe transformarse en malato para el
cual existe un transportador en la membrana y volverlo a
transformar en oxalacetato afuera.
Dicho mecanismo llamado lanzadera, consiste en una pro-
tena transportadora de malato y dos isoenzimas de malato
deshidrogenasa, una dentro y otra fuera de la mitocondria.
Lanzadera del malato
MITOCONDRIA
CITOSOL
Oxalacetato Oxalacetato
Malato
Malato
Malato
deshidrogenasa
Malato
deshidrogenasa
NADH
NADH
NAD
NAD