De acuerdo al rbol de la Vida de Woese, microbilogo creador de la nueva taxonoma molecular basada en la comparacin entre especies de la fraccin 16s del ARN ribosomal, se proponen 3 dominios Archaea, Bacteria y Eucarya, en los que se incluye a todos los seres vivos, aunque existen controversias. rbol de la vida segn Carl Woese. J. Deacon. University of Edinburgh IMPORTANCIA DE LAS BACTERIAS
A pesar de su menor complejidad en relacin a Eucarya, los integrantes de los dominios Archeae y Bacteria pueden vivir en hbitats extremos:
Se les encuentra en las profundidades de la Tierra, sobreviviendo gracias al lento catabolismo del carbono orgnico depositado en los sedimentos, y en las profundas fuentes hidrotermales submarinas.
Por otra parte, las bacterias presentan un metabolismo tan diverso que les permite llevar a cabo funciones tales como: La fijacin de nitrgeno (conversin de nitrgeno gaseoso a amonio), la fijacin de una cantidad importante de CO2, la metanognesis (produccin biolgica de metano), la reduccin de azufre y fierro.
IMPORTANCIA DE LAS BACTERIAS
Hay bacterias con capacidad para metabolizar los plaguicidas clorados e hidrocarburos. Actualmente se trabaja en la produccin de polmeros bacterianos biodegradables para sustituir a los plsticos sintticos. Mediante procesos vigentes a nivel industrial, las bacterias se utilizan en la produccin de antibiticos: (bacitracina, cefalosporina, cloranfenicol, cicloheximida, lincomicina, nistatina, penicilina, polimixina B, estreptomicina, son algunos de ellos); vitaminas tales como la vitamina B12 y la riboflavina, cuya sntesis es ms fcil por fermentacin; aminocidos, por fermentacin directa o sntesis enzimtica, entre ellos el cido asprtico y la fenilalanina (ingredientes del aspartame), el cido glutmico (empleado como saborizante bajo la forma de glutamato monosdico), la lisina (aditivo alimentario). Enzimas microbianas, se producen comercialmente y se emplean en la elaboracin de jarabes edulcorantes, detergentes, ablandadores de carnes.
IMPORTANCIA DE LAS BACTERIAS
Las aplicaciones prcticas de las bacterias en la ingeniera gentica incluyen: vacunas virales (citomegalovirus, hepatitis B, sarampin, rabia); protenas y pptidos (insulina, factor estimulante del crecimiento, interfern alfa, interfern beta, factor de necrosis tumoral y otros que an no se encuentran en el mercado); vegetales y animales transgnicos; regulacin y terapia gnicas. CELULA PROCARIOTA Organismos unicelulares que se reproducen por fisin binaria, la mayora vive libremente y contienen toda la informacin gentica, sistemas productores de energa y biosintticos necesarios para el crecimiento y la reproduccin. Este grupo incluye las eubacterias o bacterias verdaderas y las arqueobacterias. Las caractersticas clave de las clulas procariticas (significa prencleo en griego) son las siguientes: Su material gentico (DNA) no est encerrado dentro de una membrana. Carecen de otros orgnulos rodeados de membranas. Su DNA no est asociado a protenas de la clase de las histonas. Sus paredes celulares contienen casi siempre pptidoglucano. Suelen dividirse por fisin binaria. los fsiles ms antiguos conocidos, de casi 3500 millones de aos, son organismos semejantes a bacterias.
Evolucin en la tierra Tamao de las bacterias Son los microorganismos de vida libre de menor tamao que existen en la naturaleza, algunas son tan pequeas que se considera que tienen el mnimo tamao posible para ser una forma de vida independiente.
El tamao se mide en micrmetros, m, para microorganismos mas pequeos se usa el nanmetro, nm.
Las bacterias esfricas se miden por el dimetro, y la gran mayora tienen un dimetro que vara entre 0,2 y 2 m.
Las bacterias alargadas se miden por el largo y el ancho y la mayora de ellas tienen un ancho de 0,2 a 2 m por 1 a 15 m de largo.
Las bacterias espiraladas se miden por la longitud total, la amplitud de la espira y la profundidad de la misma.
Existen bacterias cuyo tamao est en el extremo inferior de la escala, son las rickettsias, clamidias y micoplasmas, su tamao es similar al de los virus ms grandes, los poxvirus
En el otro extremo de la escala, hay algunas bacterias alargadas que tienen una longitud semejante al dimetro de una clula eucariota, por ejemplo, los lactobacilos tienen un largo que puede superar al dimetro de un eritrocito.
Clula bacteriana Funciones de tas estructuras procariotas Membrana plasmtica Barrera permeable selectiva, lmite mecnico de la clula, transpone de nutrientes y residuos, localizador de muchos procesos metablicos (respiracin, fotosntesis), deteccin de seales ambientales quimiotcticas. Vacuola de gas Hincha la clula para flotar en un medio acutico. Ribosomas Sntesis de protenas. Cuerpos de inclusin Almacenamiento de carbono, fosfato y otras sustancias. Nucleoide Lugar del material gentico (ONA). Espacio periplsmico Contiene enzimas hidrolticas y protenas quedantes para el procesamiento y la captacin de nutrientes. Pared celular Confiere a las bacterias una forma y las protege frente a la lisis en soluciones diluidas. Cpsulas y slime Resistencia frente a la fagocitosis, adherencia a superficies. Fimbrias y pili Fijacin a superficies, conjugacin bacteriana. Flagelos Movimiento. Endospora Supervivencia en condiciones ambientales adversas. PARTES DE LA CELULA ESTRUCTURA INTERNA Matriz citoplasmica ADN: ADN Cromosmico. plsmidos Ribosomas. Membrana celular.
ESTRUCTURA EXTERNA Pared celular Glucocalix Flagelo. Pilis Clula Bacteriana ESTRUCTURA INTERNA. a. Citoplasma
Todo lo que hay en el interior de la membrana citoplasmtica. Est formado por un 80% de agua y contiene principalmente protenas (enzimas), azcares, lpidos, iones inorgnicos y muchos compuestos de bajo peso molecular. Los iones inorgnicos estn presentes en el citoplasma en concentraciones mucho ms altas que en la mayora de los medios. Las principales estructuras que se encuentran en el citoplasma son DNA, partculas llamadas ribosomas y depsitos de reserva llamados inclusiones.
b.-Nucloide Los cromosomas bacterianos no estn rodeados por una cubierta nuclear. Las bacterias contienen a menudo, adems del cromosoma bacteriano, pequeas molculas circulares de DNA bicatenario llamadas plsmidos.
c. Plsmidos Los plsmidos son elementos genticos constituidos por secuencias de ADN cortas circulares que se replican en forma autnoma
Generalmente son circulares, pero tambin hay algunos lineales.
Suelen contener de 5 a 100 genes, que no son cruciales para el crecimiento de la bacteria bajo las condiciones ambientales normales.
Pueden albergar genes que determinen actividades como la resistencia a antibiticos, tolerancia a metales txicos, produccin de toxinas y sntesis de enzimas. Ribosomas:
En una clula procaritica hay miles de ribosomas, que dan al citoplasma un aspecto granuloso. La clula bacteriana presenta ribosomas libres en el citoplasma con coeficiente de sedimentacin de 70S a diferencia de la clula eucariota que es de 80S. La letra S corresponde a unidades Svedberg, que indican la velocidad relativa de sedimentacin durante la centrifugacin a velocidad ultraelevada. Se presentan tambin como polirribosomas que son cadenas de ribosomas asociados a ARN mensajero y en parte en relacin con el ADN cromosmico. Contienen todos los componentes que permiten la sntesis proteica. Las clulas poseen ms ribosomas si estn creciendo en medios ricos. El alto contenido de ARN determina gran afinidad por los colorantes bsicos.
e. Inclusiones Depsitos de reserva. Corpsculos metacromticos Reserva de fosfato inorgnico (polifosfato) que puede utilizarse en la sntesis de ATP.
Grnulos de polisacridos Tpicamente de glucgeno y almidn. En presencia de yodo los de glucgeno aparecen marrn rojizo y azules los de almidn.
Carboxisomas. inclusiones polidricas o exagonales que contienen la enzima ribulosa-1, 5-dfosfato carboxilasa
Bacuolas de gas. Formadas por filas de vesculas gaseosas individuales, que son cilindros huecos cubiertos por protenas. Su funcin es mantener la flotabilidad.
f. Membrana celular Delimita la clula y controla el contenido qumico
La membrana est constituda de lpidos y protenas.
La parte lipdica de la membrana est formada por una pelcula biomolecular que le da estructura y constituye una barrera que impide el paso de substancias hidrosolubles
Las protenas de la membrana estn suspendidas en forma individual o en grupos dentro de la estructura lipdica, formando los canales por los cuales entran a las clulas, en forma selectiva, ciertas substancias. Estructura de la membrana TRANSPORTE A NIVEL DE MEMBRANA g. Mesosonas Plegamientos de la membrana. Generalmente se ven asociados a la zona nuclear o prximos al lugar de divisin de la clula. Su funcin es desconocida. Podran jugar un papel en la reproduccin y el metabolismo. Cuando se divide una clula bacteriana se forma una pared llamada septo transverso y el material gentico de la clula parental se reparte entre las dos clulas hijas idnticas. Los mesosomas podran iniciar la formacin del septo transverso y unir el DNA bacteriano a la membrana citoplasmtica Los mesosomas podran ayudar tambin a separar el DNA en cada clula hija despus de la fisin binaria. g. Mesosonas ESTRUCTURA EXTERNA: Pared celular Es una matriz extracelular de bacterias, hongos, algas y plantas. Protege los contenidos de la clula, y da rigidez a la estructura celular. Determina la forma de la clula. bacilo, coco, vibrin, etc. Sin ella todas las clulas tienen forma esfrica Morfologa de las bacterias
La microscopa ptica permite reconocer bacterias de distintas formas: Las bacterias esfricas o ligeramente ovoides se denominan cocos. Las bacterias con forma de bastn se denominan bacilos. Los bacilos de corto tamao que pueden confundirse con un coco se denominan cocobacilos. Algunos bacilos tienen extremos afinados y reciben el nombre de bacilos fusiformes, mientras que otros poseen forma de clava o garrote. Los bacilos cortos curvos, con forma de coma reciben el nombre de vibrios. Las bacterias espiraladas se llaman comnmente espirilos cuando son rgidas y espiroquetas si son ms flexibles y ondulantes.
Tipos de bacterias segn la forma Agrupacin bacteriana
Algunos gneros bacterianos se agrupan de una manera caracterstica. Esta agrupacin se debe a la tendencia de las clulas hijas a permanecer parcialmente adheridas despus de la divisin celular.
Los cocos pueden disponerse: de a pares y se los llama diplococos si se disponen en cadena se llaman estreptococos cuatro clulas esfricas conforman una tetrada en forma de racimo o irrregular se llaman estafilococos en paquetes cbicos se denominan sarcinas Los bacilos pueden disponerse: aislados adosados a lo largo, de forma paralela formando una agrupacin en empalizada (Haemophilus) pueden quedar adheridos por sus extremos y tomar apariencias de letras chinas (Corynebacterium)
Agrupacin bacteriana
Morfologa y agrupacin bacteriana La morfologa y agrupacin bacteriana se ponen de manifiesto por la observacin microscpica de frotis teidos. El mtodo de coloracin mas utilizado en bacteriologa es la coloracin de Gram. Las bacterias se clasifican en dos grandes grupos teniendo en cuenta el comportamiento de las mismas frente al procedimiento de coloracin de Gram:
Gram positivas: G (+), se tie de color violeta. Gram negativas: G (-), se tien de color rojo o fucsia.
De izq. a der.: cocos Gram positivos, bacilos Gram negativos, vibrio, espiroqueta.
Bacilos forma recta en bastn, pueden presentarse separadas o en largas cadenas. Ej: Escherichia coli y Mycobacterium tuberculosis (causante de la tuberculosis).
Cocos De forma esfrica si se unen de a pares forman diplococos si forman cadenas se denominan estreptococos si forman racimos estafilococos. Estos ltimos son los responsables de muchas infecciones. Espirilos espirilos: varillas largas en hlices. Ej: Treponema pallidum, causante de la sfilis Vibriones Como una coma ortogrfica. Vibrion cholerae Causa el clera. Tienen forma de curva o de bastoncillo. Pared celular: Composicin La pared celular bacteriana est hecha de peptidoglicano. Que est formado por: cadenas de polisacrido entrecruzadas por tetrapptidos. Segn el tipo de pared celular las bacterias pueden ser de dos tipos: Gram (+) retienen el tinte violeta Gram (-) no retienen el tinte violeta Peptidoglucano La unidad disacardica repetitiva: consiste en N- acetilglucosamina (NAG) unida por enlace (14) a N-acetilmurmico (NAM). Las distintas unidades disacardicas se van uniendo entre s por enlaces (14) entre el NAM de una unidad y la NAG de la siguiente. Este enlace es susceptible a la rotura catalizada por el enzima lisozima. El nmero de repeticiones (n) puede oscilar entre 10 y 100. Uniones peptdicas La cadena tetrapeptdica: Desde el grupo carboxilo de cada cido NAM, y mediante un enlace amido, se encuentra unido el tetrapptido.
Un tetrapptido tpico de muchas bacterias es: L-alanina--- D-glutmico---meso-diaminopimlico---D-alanina.
Los tetra pptidos se enlazan a travs de pentaglicina.
De este modo, la estructura global es una sola macromolcula gigante que envuelve al protoplasto, formando un sculo rgido, a modo de tejido continuo, que tiene el volumen y la forma de la bacteria respectiva Estructura del peptidoglicano Bacterias Gram (+) y Gram (-) Diferencias de tincin: Gram (+) mantienen el teido con cristal violeta Gram (-) Se destien con alcohol. Esta diferencia en la tincin se debe a diferencias estructurales de las paredes Las gram(+): tienen pared gruesa de peptidoglucano adems de cidos teicoicos, que son polmeros de glicerol o ribitol fosfato. Las gram(-): poseen una capa fina de peptidoglucano revestida de una capa gruesa de lipoprotenas y lipopolisacridos que impiden la llegada del colorante. Pared celular en Gram (+) y Gram (-) PG EN GRAM POSITIVAS El PG de Gram-positivas se caracteriza por la existencia de mltiples capas, existiendo entrecruzamientos tanto entre cadenas adyacentes en el mismo nivel como entre niveles distintos.
El resultado es una red tridimensional gruesa (hasta 50 capas en algunos Bacillus), y ms compacta que en Gram-negativas.
De todas formas, el grado de compacidad vara entre especies. Cubierta celular Gram (+)
Al tratar los preparados con cristal violeta y Lugol, se forman agregados entre el colorante y el mordiente que durante el proceso de decoloracin, no pueden ser extrados de las bacterias Gram (+) debido a la gruesa capa de peptidoglicano.
En las bacterias Gram (-), la mezcla decolorante puede atravesar fcilmente la capa de lpidos de la membrana externa y la delgadez de la capa de peptidoglicano presente, permite la extraccin de los agregados y, por consiguiente, del color violeta.
Al ser tratadas con fucsina o safranina, las bacterias Gram (-) tomarn el color del contracolorante. FUNDAMENTO DE LA COLORACION GRAM En esta coloracin, el paso crtico es la decoloracin, ya que si se prolonga demasiado resultarn decoloradas an las bacterias Gram (+).
Debe tenerse en cuenta asimismo, que como la integridad de las envolturas celulares resulta fundamental para lograr una buena diferenciacin, debe trabajarse en lo posible con cultivos jvenes.
Es importante mencionar, que la clasificacin en Gram (+) y Gram (-) no puede aplicarse a todas las bacterias ya que hay algunas que no pueden colorearse con esta tcnica o para las cuales no tiene sentido esta clasificacin.
Tcnica. 1- Extender, secar y fijar a la llama. 2- Cubrir durante 2 minutos con solucin de cristal violeta al 1%. 3- Escurrir y cubrir con solucin de Lugol* durante 30 segundos. 4- Escurrir y cubrir nuevamente con Lugol durante 30 segundos. 5- Decolorar con alcohol acetona y lavar con abundante agua. 6- Cubrir con solucin diluda de fucsina 0,1 % o safranina 0,5 % durante 2 minutos. 7- Dejar secar o secar entre papeles de filtro y observar con objetivo de inmersin.
*Lugol: Iodo, 1g; KI, 2g; agua, 300 ml.
FUNDAMENTO DE LA COLOPRACION GRAM Papel de la membrana externa Acta como tamiz molecular, que permite la difusin nicamente de molculas relativamente pequeas. Esto supone una proteccin frente a muchos agentes antibacterianos: colorantes, cidos biliares, antibiticos, enzimas (lisozima). Las porinas slo permiten el paso de sustancias hidroflicas por debajo del tamao especificado por el dimetro de los canales. PERIPLASMA. Cumple una funcin de osmorregulacin: Es una solucin densa, con alta concentracin de macromolculas, y que participa en la regulacin de la osmolaridad celular Papel de la membrana externa Esta diferencia afecta a algunas caractersticas de las bacterias como su susceptibilidad a los antibiticos.
Las grampositivas son ms susceptibles a algunos antibiticos que las gramnegativas
Sus paredes son digeridas rpidamente por la lisozima, una enzima que se encuentra en las secreciones nasales, saliva y otros fluidos corporales.
Muchos patgenos importantes pertenecen al grupo de bacterias gramnegativas, por ejemplo el causante de la gonorrea Neisseria gonorrhoeae, y Haemophilus influenzae que produce infecciones en las vas respiratorias, odo y meningitis b. Cpsula Es una envoltura externa, ubicada por fuera de la pared celular, mucosa, que forma un gel que se adhiere a la clula. Es una estructura variable que la pueden producir tanto bacterias Gram positivas como Gram negativas. La gran mayora son polisacardicas. No es una estructura vital para la clula, su prdida no se relaciona con la prdida de viabilidad de la clula, pero s se relaciona con cambios en la morfologa colonial y en la prdida de la virulencia bacteriana. La virulencia de algunos patgenos se correlaciona con la presencia de cpsula, como por ejemplo: Streptococcus pneumoniae y Haemophilus influenzae tipo b. La cpsula protege a la bacteria de la fagocitosis, principal mecanismo de defensa que pone en juego el husped ante la presencia de bacterias capsuladas. Bacterias encapsuladas. c. Apndices Flagelos y pelos: sirven a la movilidad de las bacterias.
FLAGELO. Es un nico apndice, compuesto de flagelina. Protena que forma una triple hlice con una zona central hueca.
El mecanismo del flagelo bacteriano es rotatorio, con un motor reversible (funciona en los dos sentidos de giro).
PILI, armados a partir de monmeros de una protena llamada pilina, son ms cortos y ms finos que los flagelos y a menudo existen en gran cantidad, sirven para unir las bacterias a fuentes alimenticias.
FLAGELOS Los flagelos bacterianos son apndices celulares que estn asociados a funciones de locomocin. En cuanto a su estructura y composicin qumica, son similares en una gran variedad de bacterias.
FLAGELOS Estos apndices, estn unidos a la clula a travs de un cuerpo basal conectado a un gancho, que se contina con un filamento helicoidal. El cuerpo basal est constituido por un cilindro central y 2 4 anillos segn se trate de bacterias Gram (+) o Gram (-) respectivamente. Qumicamente, el cuerpo basal y el gancho estn compuestos por una variedad de polipptidos pero el filamento est formado por subunidades proteicas de flagelina que se disponen formando una helice alrededor de un centro hueco.
FLAGELOS: disposiciones La coloracin de flagelos se realiza fundamentalmente en los casos de bacterias mviles para las cuales la determinacin del nmero y posicin de estos apndices contribuya a su identificacin. En la figura se ilustran las diferentes disposiciones encontradas.
FLAGELOS Funciones de reproduccin en bacterias Normalmente las bacterias se reproducen asexualmente por biparticin, formndose un tabique transversal que divide la clula madre en dos clulas hijas.
En ocasiones, el tabique no es completo y las clulas permanecen unidas durante mucho tiempo.
En algunos grupos la reproduccin asexual se lleva a cabo por gemacin.
Hacia el ao 1952 se descubri que las bacterias tambin podan reproducirse sexualmente, comportndose uno de los ejemplares como macho y el otro como hembra.
Reproduccin Sexual Este comportamiento sexual, que implica transferencia de material gentico de una bacteria a otra, se puede realizar por tres mtodos distintos:
* Conjugacin: Las bacterias se unen a travs de un puente por el que se produce el paso del material gentico. Las bacterias donantes se consideran machos y las receptoras, hembras. * Transformacin: Se produce en bacterias capaces de captar un DNA exgeno procedente de otra bacteria. * Transduccin: La transferencia del material gentico de una a otra bacteria se produce a travs de un vector que normalmente es un virus.
Conjugacin La cantidad de AND cromosmico que es transferida depende de cuanto tiempo permanezcan las dos bacterias en contacto. En cadenas corrientes de laboratorio de Escherichia coli la transferencia del cromosoma bacterial crompleto demora alrededor de 100 minutos. La transferencia de ADN puede ser integrado en el genoma receptor por recombinacin homloga Conjugacin Esquema de la conjugacin bacteriana. 1.La clula donante genera un pilus. 2. El pilus se adhiere a la clula receptora y ambas clulas se aproximan. 3. El plsmido mvil se desarma y una de las cadenas de ADN es transferida a la clula receptora. 4. Ambas clulas sintetizan la segunda cadena y regeneran un plsmido completo. La clula receptora sintetiza el pilus. Ahora ambas clulas son potenciales donantes Transformacin En biologa molecular , transformacin es la alteracin gentica de una bacteria resultante de la absorcin directa, incorporacin y expresin del material gentico exgeno (ADN exgeno). El ADN exgeno se encuentra en el ambiente y se introduce a travs de la membrana de la clula bacteriana. La transformacin ocurre de forma natural en algunas especies de bacterias, aunque tambin se puede efectuar por medios artificiales. La transformacin es uno de los tres procesos por los que el material gentico exgeno se puede introducir en una clula bacteriana. Los otros dos son la conjugacin y la transduccin. A la transformacin de clulas eucariotas se le llama transfeccin. Transformacin Transduccin Los genes tambin se pueden transferir por un proceso de transduccin mediante el cual un bacterifago introduce ADN extrao en el cromosoma bacteriano. Reproduccin Asexual La mayora de los procariotas se reproducen por divisin celular simple, tambin llamada fisin binaria ENDOESPORA BACTERIANA Diversas bacterias gram(+) pueden formar una estructura especial inactiva
Se desarrollan dentro de clulas bacterianas vegetativas; gneros: bacillus, Clostridium (bacilos),Sporosarcina (cocos)
Son resistentes a condiciones ambientales estresantes: calor, radiacin UV, desinfectantes qumicos y desecacin ESPORULACION Algunas bacterias, son capaces de producir formas de resistencia a travs de un proceso llamado esporulacin.
Este proceso de diferenciacin, est codificado genticamente y permite a los microorganismos sobrevivir hasta que las condiciones exteriores sean favorables para el desarrollo.
Los gneros de bacterias capaces de esporular hasta ahora descriptos son Bacillus, Clostridium y Sporosarcina por lo cual la presencia de esporos en una bacteria es de gran utilidad taxonmica. ESTRUCTURA DE UNA ENDOESPORA Estructuralmente, los esporos bacterianos estn rodeados por gruesas envolturas y tienen muy bajo contenido de agua. El crtex o corteza, est compuesto por un peptidoglicano que contiene menos enlaces cruzados que el correspondiente a la pared celular. La cubierta est formada por una protena del tipo de la queratina con gran cantidad de puentes disulfuro. Esta capa es fundamental para la resistencia del esporo a los agentes fsicos y qumicos. El exosporium es de naturaleza lipoproteica. Asimismo poseen en su composicin qumica, una alta concentracin de dipicolinato de calcio, que es una sustancia que no se encuentra en las clulas vegetativas, y que estara involucrada en la eliminacin de agua durante el proceso de esporulacin.
ESPORULACIN O ESPOROGNESIS. En la primera fase, el crecimiento de una invaginacin de la membrana citoplasmtica llamada septo esporal aisla una pequea porcin del citoplasma y un cromosoma bacteriano recin replicado. El septo esporal se transforma en una membrana doble que rodea al cromosoma y al citoplasma. Esta estructura totalmente encerrada dentro de la clula original se conoce como prespora. Entre las dos membranas se depositan capas de pptidoglucano y a continuacin se forma una gruesa cubierta de la espora de protena alrededor de la membrana ms externa. Pueden permanecer latentes durante largos perodos de tiempo, incluso cientos de aos y volver al estado vegetativo por un proceso denominado germinacin.
15% peso seco de la espora consiste en cido dipicolnico que forma complejos con iones calcio La termorresistencia de las endoesporas se debe probablemente a varias razones: estabilizacin del DNA por el dipicolinato clcico y protenas cido solubles deshidratacin del protoplasto mayor estabilidad de las protenas celulares Clasificacin EUBACTERIAS (Manuel de Berger, 500 generos en 33 secciones) Fototrofas anaerobias, - Purpura sulfurosas Purpura no sulfurosas - Litotrofas nirtrificantes Litotrofas oxidantes de Fe y S - Litotrofas oxidantes del H Metanotrofas y metolotrofas - Reductoras de sulfato Homoacetognicas - Rickettsias Clamidias - Pseudomonas Espirilos - Bacilos Gram(-). Bacterias encapsuladas - Bacterias fijadoras del N Bacterias del acido lactico - Gram (+) formadores de esporas - Actinomycetos Corineformes - Mycobacterium ARQUEOBACTERIAS ARQUEOBACTERIAS Dentro de las arqueobacterias nos encontramos con dos reinos: Euriotas y Crenotas. Los euriotas estn adaptados a diferentes metabolismos y ecosistemas, y son ms evolucionados. Comprenden las metanobacterias, los halfitos extremos, Termoplasma y Thermococcus. Los crenotas son menos evolucionados y todas son hipertermfilas
Las arqueobacterias son organismos que pueden usar el azufre y crecer a grandes temperaturas. No tienen ncleo ni cido murmico en su pared celular. Sus paredes celulares son, de hecho, muy variables, y pueden contener estructuras de tipo proteico, lipoproteico y polisacardico.
ARQUEOBACTERIAS Algunas tienen pseudopeptidoglicano: sin cido murmico y con L- aminocidos en el puente peptdico. Adems, los lpidos se forman con enlaces de tipo ter, los ribosomas son 70S y tienen intrones en el ARN de transferencia. Sus lpidos no tienen cidos grasos sino cadenas isoprenoides ramificadas. Estas cadenas isoprenoides pueden estar unidas a dos molculas de glicerol, una en cada extremo. Pueden tener dos tipos de lpidos: glicerol diter y diglicerol tetrater. La fluidez, que normalmente se regula por cidos grasos saturados e insaturados, en este caso se controla por procesos de ciclacin, es decir, vara la longitud de las cadenas isoprenoides. Las membranas pueden estar formadas por una bicapa lipdica de glicerol diter, una monocapa lipdica de diglicerol tetrater, o bien una mezcla de ambas, que suele ser el caso ms frecuente.
CARACTERSTICAS GENERALES Reciben este nombre por la gran variedad de hbitat que ocupan y la diversidad de patrones metablicos que presentan ( del griego eurus, amplio y archaios, antiguo o primitivo ) Muchas de las especies que incluye habitan en ambientes extremos Incluye bacterias Metanognicas, anaerobias estrictas, y Halobacterias , aerobias, muy ligadas desde el punto de vista filogentico Igualmente incluye bacterias Hipertermfilas y Termoacidfilas Existe un grupo de Euryarchaeota marinos no cultivables, que son los mas evolucionados, como indica su posicin en las ramas mas altas del rbol filogentico del Dominio.
CARCTERES COMUNES
CON EUKARYA Paredes Celulares sin Peptidoglucano Presentan varias ARN polimerasas no sensibles a Rifampicina La Metionina es el aminocido iniciador en la sntesis de protenas. No es inhibida por antibiticos y si lo es por la toxina diftrica
CON BACTERIA Presentan ARNm policistrnicos Ausencia de orgnulos verdaderos Modalidades especiales de metabolismo:Quimiolitotrofa y fijacin de Nitrgeno CARCTERES DISTINTIVOS
Lpidos de membrana con enlace ter y sin cidos grasos. Pared celular con pseudopeptidoglucano o de otra naturaleza ( Polisacrido, Protenas o Glucoprotenas) Presencia de histonas t-RNA iniciador con Metionina Requieren factores de transcripcin RNA polimerasas muy complejas
Archaea. Grupo variado en cuanto a morfologa, reproduccin, fisiologa y ecologa. Crecen en hbitats anaerobios, hipersalinos y de elevadas temperaturas. Diferencias estructurales con bacterias: - composicin de la pared celular - composicin de la membrana - metabolismo ARQUEOBACTERIAS 1. Diferencias en la pared celular Las paredes celulares arqueobacterianas no contienen peptidoglucano. Pueden estar compuestas de pseudomurena, polisacridos, glucoprotenas, o protenas no modificadas.
Estructura de pseudomureina Los componentes entre parentesis no siempre estan presentes 2. Diferencias en la membrana Los lpidos difieren en la presencia de hidrocarburos de cadena ramificada conectados a glicerol mediante enlaces ter. Los lpidos eubacterianos y eucariticos contienen glicerol unido a cidos grasos mediante enlaces ster. Ester bacteria eter archea
Bacterias con diversa morfologa:cocos, bacilos, formas raras Requieren elevadas concentraciones de NaCl (1,5M ) para crecer Coloreadas por la presencia de Carotenoides Viven a pH neutro y alcalino Aerobios estrictos. Unas pocas especies son anaerobias Quimiorganotrofos (Aminocidos o cidos orgnicos) Algunas especies contienen Bacteriorrodopsina y usan la luz para obtener energa Gneros representativos: Halobacterium, Halococcus, Natronobacterium Natronomonas..
MORFOLOGIA DE HALOBACTERIAS
Halobacterium salinarum
Halococcus morrhuae
PC glucoproteca
Halfilos alcalfilos HBITAT HIPERSALINOS NATURALES
Salinas
Depsitos de Carbonato Sdico en la orilla
ARTIFICIALES
Superficie de alimentos en salazn EURYARCHAEOTA METANGENOS
CARACTERISTICAS GENERALES Morfologa diversa : formas cocoideas y bacilares Anaerobios estrictos Producen Metano a partir de diversos sustratos Poseen enzimas y coenzimas nicos para dicho proceso Contiene especies termfilas e hipertermfilas, entre ellas Methanopyrus, la ms antigua de los Euryarchaeotas Se encuentran en ambientes anaerobios ricos en materia orgnica: Sedimentos marinos y de agua dulce, pantanos, cinagas, fuentes termales, rumen e intestino de los animales.. Son uno de los principales grupos de microorganismos responsables de la digestin anaerobia de fangos en las EDAR De gran importancia prctica porque: el metano es una fuente de energa excelente y poco contaminante Favorecen el efecto invernadero Gneros representativos: Methanospirillum, Methanobacterium, Methanopyrus, Methanocaldococcus, Methanosarcina...
MORFOLOGA DE METANGENOS SUSTRATOS PARA LA PRODUCCIN DE METANO
I. SUSTRATOS DE TIPO CO 2
DIXIDO DE CARBONO , CO 2 ( H 2 ) FORMATO , HCOO MONXIDO DE CARBONO, CO II- SUSTRATOS METLICOS METANOL, CH 3 OH METILAMINA, CH 3 NH 3 + DIMETILAMINA, (CH 3 ) 2 NH 2 +
TRIMETILAMINA, (CH 3 ) 3 NH +
METILMERCAPTANO, CH 3 SH SULFURO DE DIMETILO, (CH 3 ) 2 S III. SUSTRATOS ACETOTRFICOS ACETATO, CH 3 COO -
PIRUVATO, CH 3 COCOO -
HBITAT DE LOS METANGENOS
I. SEDIMENTOS ANXICOS: Fangos pantanosos Sedimentos de lagos II . TRACTO DIGESTIVO DE ANIMALES : Rumen de vacas, ovejas, camellos etc ( Rumiantes) Intestino grueso de animales monogstricos Intestino de insectos celulolticos (termitas). III.FUENTES HIDROTERMALES SUBMARINAS
Incluye tres gneros que viven a elevada temperatura y pH cidos (acidez extrema) : Ferroplasma , Picrophilus y Thermoplasma Ferroplasma Carece de Pared Celular Quimiolitotrofo. Oxida el in ferroso a frrico Acidfilo extremo Crece en las minas de pirita junto a T. ferrooxidans y L. ferrooxidans generando mayor acidez (Minas cidas) Picrophilus Posee una capa S Es el mas acidfilo del grupo ( tolera pH 0,06) y muere a pH moderados Presenta una distribucin atpica de los lpidos de membrana Se encuentra en sulfataras
Thermoplasma : CARACTERSTICAS Y HBITAT Forma su propio linaje filogentico Quimiorganotrofos Aerobios facultativos Crece a 60 C y pH 2 Genoma pequeo (1,5 mb) DNA asociado a protenas similares a histonas Recuerda a los Micoplasmas por la ausencia de pared celular. En la MP contiene un Lpido tetrater con Manosa y Glucosa. Viven en pilas de carbn y de pirita autocombustibles y Sulfataras volcnicas
EURYARCHAEOTA HIPERTERMFILOS
Contiene arqueas que se ramifican muy cerca de la base del rbol: Pyrococcus, Thermococcus y Methanopyrus Pyrococcus Bola de fuego Anaerobio Fermentador Requiere para crecer 106 C Genoma pequeo, 1,73 mB Proporciona Pfu (ADN Polimerasa ) Thermococcus Anaerobio estricto. Azufre como aceptor de e- Quimiorganotrofo (Protenas y azcares) Crece a temperaturas entre 75-90 C Vive en aguas termales anxicas Methanopyrus
Es un Euryarchaeota hipertermfilo que produce Metano, slo a partir de H2 y CO2 Su temperatura ptima de crecimiento son 100 C. Contiene concentraciones elevadas de 2,3 difosfoglicerato disuelto en el citoplasma (Termoestabilidad) M. kandleri posee en la membrana un tipo exclusivo de lpido, con enlace ter y cadenas laterales insaturadas de geranilgeraniol (denota antigedad) Vive en sedimentos submarinos y chimeneas negras (2000 m de profundidad) Explica el origen de los hidrocarburos en sedimentos ocenicos con elevadas temperaturas OTROS EURYARCHAEOTAS HIPERTERMFILOS: Archaeglobus y Ferroglobus Archaeoglobus fuligdis Hipertermfilo Oxidante del in ferroso en anaerobiosis FeCO 3 + NO 3 - Fe(OH) 3 + NO 2 - Reductor de Nitrato Vive en chimeneas hidrotermales submarinas
Anaerobio, el sulfato es el receptor de electrones (nico reductor de Sulfato) Vive en sedimentos marinos caliente, 83 C Contiene trazas de coenzimas de Metanognesis y puede producir metano en cantidades pequeas Filogenticamente muy relacionado con los metangenos Puente entre 2 mecanismos generadores de energa: reduccin de azufre y Metanognesis Su genoma contiene 2400 genes , muchos parecidos a los metangenos, otros nicos
Metabolismo caractersticas metablicas Las Arqueobacterias presentan las siguientes peculiaridades: - No tienen gliclisis. En su lugar, siguen la ruta de Etner Dondorof. - Tienen ciclo de Krebs. - DNA circular de pequeo tamao, cerca de la mitad del de Escherichia coli. - Genes organizados en operones. - Las secuencias promotoras, es decir, aquellas que controlan la expresin de un gen, poseen una mezcla de caractersticas de bacterias y de eucariotas.
Metabolismo Presenta diferencias en el catabolismo de la glucosa, las vas de fijacin del CO 2 y la capacidad de algunas bacterias de sintetizar metano. Las metanognicas Hay por lo menos diez sustratos que se convierten en metano por la accin de metangenos. son los nicos seres vivos capaces de obtener energa acoplando la oxidacin del hidrgeno molecular con el uso de CO 2 como aceptor de electrones. Los metangenos que crecen sobre H 2 + CO 2 son autotrficos y el CO 2 , sirve tanto de fuente de carbono como de aceptor de electrones. Adems del CO 2, hay una variedad de otros compuestos que algunas especies metanognicas convierten en metano. La formacin de metano a partir de H 2 + CO 2 se considera del tipo respiracin anaerbica, donde el CO 2 , es el aceptor de electrones. Quimiolitotrofos: 4H2 + CO2 CH4 + 2H2O Etapas involucradas en la formacin de CH 4 a partir de CO 2 :
1. Activacin del CO 2
2. Reduccin a formil 3. Reduccin de hidroximetil-S-CoM a metil-S-CoM 4. Formacin de metano Bacterias metanognicas Metanognicas: Bacterias metanognicas reductoras (auttrofos) H 2, CO 2
cido actico (Acetato) CO 2 CO 2
CH 4
Metanognicas: Bacterias metanognicas acetoclasticas Caractersticas de metanogenos a) Methanospirillum hungatel (contraste de fases x2000) b) Methanobrevibacter smithii d) Methanosarcina mazei e) Mathenobacterium marismigri Grupos archaea Sulfolobus brierleyi: a) diametro aprox 1 um, capa amorfa en lugar de pared, se observa la membrana (M). SEM de sulfolobus en MoS2, a 60C y pH= 1.5-3.0 Thermoproteus tenax.