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1
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Anlise e monitoramento da produo da bactria Herbaspirillum seropedicae
BR11417 em biorreator agitado mecanicamente.
Wagner Scheidt
1
, Paula Citelli Coutinho
2
, Luiz Augusto Meleiro
3
, Lus Henrique de Barros Soares
4
(1) Mestrando em Engenharia Qumica, UFRRJ; (2) Bolsista PIBIC na Embrapa Agrobiologia,UFRRJ; (3) Docente em Engenharia Qumica, UFRRJ; (4) Pesquisador na Embrapa Agrobiologia.
Para o bom desenvolvimento de uma cultura agrcola muitos nutrientes
so exigidos, e os solos do pas, em geral, no so capazes de fornecer
estes nutrientes de forma que atenda a planta em seu mximo potencial
produtivo. Sendo o Nitrognio um dos mais importantes, em 2013 foram
utilizadas na agricultura 1,25 milhes de toneladas de fertilizantes
nitrogenados industriais. Como alternativa para suprir a demanda de
fertilizantes nitrogenados existem tecnologias baseadas no uso de
bactrias capazes de realizar a fixao biolgica de nitrognio (FBN),
processo que consiste na quebra do Nitrognio estvel do ar
combinando-o com o Hidrognio e gerando compostos que so
assimilveis por plantas, reduzindo assim a necessidade de nitrognio
industrial. Entre estas bactrias encontra-se a Herbaspirillum
seropedicae. Alm da FBN, identificou-se que o gnero H.
Seropedicae apresenta a produo de fitohormnios promotores do
crescimento, entre eles o composto indlico cido indol-3-actico (AIA).
Introduo
Este trabalho, apresenta o objetivo de se obter as melhores condies
de cultivo para a bactria H. Seropedicae BR11417, atravs da
mxima produo de biomassa celular, alta converso de nutrientes e
menor custo de produo, tem-se realizado o cultivo desta bactria em
meios otimizados a partir dos meios tradicionais em biorreator. Busca-
se ainda a melhor fonte de carbono, as melhores condies de
agitao, volume de ar e temperatura, controlando o pH e monitorando
o crescimento celular, consumo do substrato, oxignio dissolvido e
produo de metablicos de interesse


Objetivo
Resultado e Discusso
Material e Mtodos
Fermentaes em biorreator
Inicialmente, adicionou-se 5 mL da soluo estoque de microrganismos
em erlenmeyers de 500 mL com 95 mL de meio Dygs modificado,
incubou-se em shaker a 35C e 150 RPM por 24h. Transferiu-se o
inculo para o biorreator contendo 1,9 L de meio Dygs modificado
totalizando 2 L de meio de cultura presentes no biorreator. A
fermentao ocorreu at que se observa-se a ausncia de crescimento
celular , realizando amostragem a cada 2 horas.
Parmetros analisados
Crescimento celular (DO 600nm);
Concentrao de compostos indlicos (g/l);
Consumo da fonte de carbono (g/l);
Oxignio dissolvido (%).
Design Composto Central Rotacional
Buscando-se a otimizao das condies de fermentao elaborou-se
uma matriz de dados empregando um DCCR 2
3
para a aerao,
agitao e temperatura, propondo a realizao de 17 experimentos,
sendo 8 combinaes distintas, 6 nos pontos axiais e 3 no ponto central
(Tabela 1).


Referncias Bibliogrficas
BALDANI, J. I.; BALDANI, V. L. D.; SELDIN, L.; DOBEREINER, J. Characterization of Herbaspirillum seropedicae gen. nov., sp. nov., a root-associated nitrogen-fixing
bacterium. International Journal of Systematic Bacteriology, Washington, v. 36, p. 86-93, 1986.
FERNANDES, V. H. Otimizao dos Parmetros de Produo de Biomassa de Azospirillum amazonense (BR-11145) para Incorporao em Inoculantes Agrcolas. Dissertao
(Mestrado) - Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropdica, 2013.
FERREIRA, JOILSON SILVA. Inoculao de Herbaspirillum seropedicae em duas variedades de arroz irrigado: qualidade do inoculante e necessidade da reinoculao. Tese de
Doutorado, UFRRJ, Seropdica, Brasil. 85 f. : il., 2008.






Atravs da variao das condies experimentais como proposto na
Tabela 1 pode-se observar a influencia da aerao, agitao e
temperatura sobre o crescimento da biomassa e produo de
metablicos. At o momento foram realizadas 3 fermentaes,
apresentando os resultados obtidos nas Figuras 1:



Ensaios Temp (C) Agit(RPM) Ar (LPM)
1 30,8 105,4 2,2
2 30,8 105,4 5,8
3 30,8 194,6 2,2
4 30,8 194,6 5,8
5 39,2 105,4 2,2
6 39,2 105,4 5,8
7 39,2 194,6 2,2
8 39,2 194,6 5,8
9 28 150 4
10 42 150 4
11 35 75 4
12 35 225 4
13 35 150 1
14 35 150 7
15 35 150 4
16 35 150 4
17 35 150 4
Tabela 1: Matriz de ensaios do DCCR
Figura 1: Analise do crescimento da H. Seropericae . a) Ensaio 1;
b) Ensaio 2; c) Ensaio 3.


Atravs da figura 1, pode-se observar que o Ensaio 1 obteve o
melhor desempenho, fornecendo uma DO de 6,1 para a biomassa e
concentrao de AIA de 14,8 mg/l seguido pelo Ensaio 2 com DO de
5 e AIA de 9,5 mg/l e Ensaio 3 com DO de 4,8 e sem a identificao
da produo de AIA. Concluindo que com agitao e volume de ar
maiores, reduz-se a produo de biomassa e inibe a produo de
compostos indlicos.