III Curso de Segunda especializacin

en Gentica y Biologa Molecular

TEMA N 4:
PERSISTENCIA DE LA MICROBIOTA INTESTINAL INMADURA
EN NIOS MALNUTRIDOS DE BANGLADESH

Sathish Subramanian, et al.

POR:BONIFACIO BRICEO, Juan Jos.

DAZ ABANTE, Cesar Antonio.
RUELAS ZEA, Mximo.
RIVERA SERRANO, Edwart Rogger.

Bangladesh: UNICEF y PMA alertan

sobre alto nivel de desnutricin
infantil

-Causa directa de muerte en la infancia y que afecta el desarrollo de los

nios que la sobreviven.
-Slo en Bangladesh, ms del 40 por ciento de los nios menores de cinco
aos se ven afectados por retraso en el crecimiento.
-Los nios que han sido desnutridos en sus primeros aos, no crecen normalmente,
incluso despus del tratamiento. La desnutricin en los nios puede llevar a
problemas que afectan al paciente mucho tiempo despus de la infancia, tales
como problemas cognitivos y sistemas inmunolgicos vulnerables.

-Caracterizar la microbiota intestinal es perturbado en

malnutricin
-Caracterizar la microbiota intestinal a travs de la maduracin
no relacionadas nios de bangladesh sanos que viven en hogares
separado
-Probar la medida en que se podra aplicar este modelo
escasa
-Estudiar la influencia de los factores genticos y ambientales en
estos ndices de maduracin microbiota
-Investigar los efectos de la SAM en la madurez microbiota, 64
nios con SAM que haban sido ingresados en la Unidad de
Rehabilitacin Nutricional del Centro Internacional para la
Investigacin de Enfermedades Diarreicas, Bangladesh

COHORTE DE NACIMIENTO UNICO

- 25 nios
medidas antropomtricas (Shannon)
Trimestral
> -2 ds
Diarrea
ATB

- 33 nios
Transversal
WHZ < -2 ds
Algunos MAM

COHORTE DE GEMELOS Y TRILLIZOS

- Madres con embarazos mltiples (Dx. clnica o ecografas )
Estudio prospectivo
11 madres de gemelos
01 madre de trillizos
- Estudio de cigotos
ADN plasma, 96 polimorfismo (SNP)
8 gemelos: monocigotos
12 gemelos: dicigotos
01 trillizos: 02 dicigotos y 01 fraternal
OBS: 01 de gemelos fue indeterminado por falta de mx

ESTUDIOS DE MALNUTRICION AGUDA SEVERA (SAM)

- 64 nios
WHZ -3 ds
-Comparacin RUTF con Knichuri-Halva +suji

ESTUDIO ANTROPOLOGICO
- 30 individuos
encuestas
Practicas del hogar
investigadores definen Interferencia con metagenomica

COMPONENTE BACTERIANO DE LA MICROBIOTA INTESTINAL

PCR

MADURACION DE LA MICROBIOTA INTESTINAL EN NIOS

Ramdon Forest

PREUBAS ENTEROPATOGENAS
Microscopia deteccin de parsitos y observacin de la microbiota
En casos de diarreas persistente: cultivos para Vibrio, Shiguella y Salmonella

PRUEBAS ESTADISTICAS
T Studen
Anova
Spearman
Indice de Shannon
Post-hoc Dunnett

Extraccin con
tcnica: fenol y
cloroformo

Infantes entre
0 a 12 meses

996 muestras fecales

cada mes

Secuenciador Illumina Miseq

Preparacin de la muestra

Purificacion con Kit de Qiagen

Generacin de cluster

Tratamiento de
heces

Recuperar la
fase acuosa

Secuenciamiento

Homogenizacion
con bead beater

Anlisis de data

INDICADORES PARA MEDIR LA MADURACION MICROBIANA INTESTINAL

Se utilizan para comparar la madurez de la microbiota fecal
observada de un nio con su edad cronolgica.
ndice de madurez relativa de la microbiota

permite estudiar las fluctuaciones o

variaciones en el tiempo.

Microbiota para la edad Z -score (MAZ)

0= la media es igual entre grupos.

+= por enzima de la media.
-= `por debajo de la media.

DISEO DEL ENSAYO

Suplemento Diettico: alimento teraputico (RUTF)

fase aguda de
Desnutricin Aguda
Severa (SAM)

Suplementos Dietticos: khichuri y halva

ABUNDANCIA DE LA MICROBIOTA IMPORTANTE EN NIOS SANOS DE

BANGLADESH (n=272)

UTILIZACION DE LOS INDICADORES EN NIOS SANOS

MAPA DE LAS ABUNDANCIAS RELATIVAS DE LOS TAXONES DE BACTERIAS

MADURACIN DE LA MICROBIOTA DURANTE LAS FASES DEL TRATAMIENTO

0= la media es igual entre

grupos.
+= por enzima de la media.
-= por debajo de la media.
*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001

PLOT DEL DESARROLLO DEL TRATAMIENTO PARA CADA NIO CON SAM

TRANSICIN DE LA INMADUREZ MICROBINA

REDUCCIN EN LA DIVERSIDAD ASOCIADO A LA DIARREA

VARIACIN DE LA MICROBIOTA INTESTINAL

MEDIDA ANTROPOMTRICA DEL ESTADO NUTRICIONAL: PESO Y ALTURA

MEDIDA ANTROPOMTRICA DEL ESTADO NUTRICIONAL: PESO Y EDAD

MEDIDA ANTROPOMTRICA DEL ESTADO NUTRICIONAL: ALTURA Y EDAD

PERSISTENTE REDUCCIN DE LA DIVERSIDAD EN LA FLORA INTESTINAL DE

LOS NIOS CON SAM

*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001

Mapa de taxa
bacteriana
significativamente
alterada
durante la fase aguda
del tratamiento y la
rehabilitacin
nutricional en el
microbiota de nios
con SAM en
comparacin con la
edad parecida nios
sanos.

EFECTOS DE LOS ANTIBITICOS SOBRE LA MICROBIOTA DE LOS NIOS CON SAM

CORRELACIN INVERSA CON LA MADUREZ MICRIOTA RELATIVA

Score-Z para microbiota y edad (MAZ)

Score-Z para peso y talla (WHZ)

ABUNDANCIA RELATIVA DE LA MICROBIOTA

desnutricin aguda moderada (MAM)

desnutricin aguda severa (SAM)

ABUNDANCIA RELATIVA DE LA MICROBIOTA

Evaluacin transversal de madurez microbiota a los 18 meses de edad en nios

de Bangladesh con y sin MAM, adems de la extensin del modelo basado en
Bangladesh de madurez microbiota a Malawi