FOSFORILACIN OXIDATIVA

Proceso mediante el cual se genera ATP como

resultado de la transferencia de electrones desde el
NADH o el FADH2 al O2 a travs de una serie de
transportadores de electrones.
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La fosforilacin oxidativa genera 26 de las 30 molculas de

ATP a partir de la oxidacin completa de la glucosa a CO 2
y H2O
La fosforilacin oxidativa constituye la culminacin de una
serie de transformaciones energticas que en conjunto se
denomina respiracin celular
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La fosforilacin oxidativa requiere transferencia

de electrones.

Un agente reductor como el NADH cede electrones y tiene un

potencial de reduccin negativo.
Un agente oxidante como el O2 acepta electrones y tiene un potencial
de reduccin positivo.
La reduccin de O2 molecular por NADH y FADH2 es un proceso
exergnico.
El incremento de energa libre estndar G est relacionada con el
incremento de potencial de reduccin E0 mediante la expresin:
G = -nFE0
n = nmero de electrones
transferidos
F= cte. de Faraday = 23.06 kcal/mol,v = 96.48kJ/mol,v
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La fosforilacin oxidativa requiere transferencia

de electrones. Cunta energa se libera durante la
reduccin del O2 por el NADH?
O2 + NADH + H+ H2O + NADH+
O2 + 2H+ + 2e- H2O

E0 = + 0.82 v

NAD+ + H+ + 2e- NADH E0 = - 0.32 v

Potencial de reduccin de la reaccin:
E0 = + 0.82 - (- 0.32) = + 1.14
La energa libre estndar de la Rx:
G = -2 x 23.06 x 1.14 = -52.6 kcal/mol
Energa asociada a un gradiente de protones:
G = RTln(c2/c1) + zFv = 2.303 Rtlog (c2/c1) + zFv
z = carga elctrica de la sustancia trasportada
v = potencial a travs de la membrana
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La fosforilacin oxidativa requiere transferencia

de electrones. Cunta energa se libera durante la
reduccin del O2 por el NADH?
G = RTln(c2/c1) + zFv = 2.303 RTlog (c2/c1) + zFv
En la membrana mitocondrial interna el pH externo es 1.4
unidades menor que el interno (log (c2/c1) = 1.4), el potencial de
membrana es 0.14v positivo en el exterior, z = +1.
G = (2.303) (1.98x10-3 kcal/mol,K) (310K) (1.4) + [(+1) (23.06
kcal/mol,v) (0.14v) = 5.2 kcal/ml

Cada protn transportado desde la matriz al lado citoslico

representa una energa libre de 5.2 kcal/mol
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Secuencia de transporte de electrones en la cadena respiratoria

Tres bombas de protones activadas

por electrones:
NADH-Q oxidorreductasa
Q-citocromo c oxidorreductasa
Citocromo c oxidasa
Contienen
reduccin:

centros

de

oxidacin

Quinonas, Flavinas
Complejos hierro-azufre
Grupos hemo, iones cobre
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En las quinonas las reacciones de transferencia de e -s estn acopladas

a la unin y liberacin de protrones.
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NADH-Q oxidorreductasa (complejo I)

Unin de NADH transfiere sus dos electrones al FMN FMNH2

Transferencia de e- desde del FMNH2 a una serie de complejos Fe-S,

grupo prosttico de la NADH-Q oxidorreductasa.
Reduccin de Q QH2 provoca la captura de 2 protones procedentes
de la matriz.
Los 2e- del QH2 se transfieren a un centro 4Fe-4S liberacin de
protones al lado citoslico.
Los 2e- se transfieren a un Q mvil del interior de la membrana, se
capturan otros 2 protones.
Resultado = bombeo de 4H+ hacia el exterior de la matriz de la
mitocondria.
Los e- se transfieren desde FADH2 a complejos Fe-S de la Succinato
Q-Reductasa (complejo II) y de all a Q.

Transferencia de electrones
oxidorreductasa (complejo I)

del

NADH

por

NADH-Q

NADH + Q + 5H+MATRIZ NAD+ + QH2 + 4H+CITOSOL

Q-citocromo c oxidorreductasa (complejo III)

Q-citocromo c oxidorreductasa contiene tres grupos hemo distribuidos

en dos citocromos: dos hem de tipo b (bL y bH), localizados en el
citocromo b y un hem tipo c, en el citocromo c1.
Contiene adems una protena con un complejo 2Fe-2S, denominado
centro de Rieske, en el que el Fe est coordinado con dos residuos de
His en vez de Cys.
Tambin dos sitios distintos para la unin de ubiquinona, llamados Q o
y Qi .
El mecanismo que acopla la transferencia de electrones desde Q hasta
el citocromo c con el transporte de protones a travs de la membrana
de denomina ciclo Q.
Al final del ciclo Q: dos molculas de QH2 se oxidan para formar 2 Q,
una molcula de Q se reduce a QH2, se reducen 2 citocromos c, se
liberan 4 protones hacia el lado citoplasma y se capturan 2 protones de
la matriz mitocondrial.
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Transferencia desde el ubiquinol a travs de Q-citocromo c

oxidorreductasa (complejo III)

CICLO Q
QH2 + 2Cyt cox + 2H+MATRIZ Q + 2Cyt cred + 4H+CITOSOL

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Citocromo c oxidasa (complejo IV)

Contiene dos grupos hemo de tipo A y 3 iones de Cu distribuidos en

dos centros de cobre, llamados A y B.
Uno de los centros, CuA/CuA presenta dos iones Cu conectados
mediante dos residuos de Cys.
Otro centro, CuB est coordinado con 3 residuos de Hys, uno de los
cuales forma un enlace covalente con Tyr.
Las dos molculas hem tipo A son: hemo a que transporta electrones
procedentes de CuA/CuA y hemo a3 que cede electrones al centro CuB
adyacente.
El hemo a3 y CuB forman en centro activo donde el O2 se reduce a
H2O.
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Reduccin del oxgeno a agua por la Citocromo c oxidasa (complejo IV)

4Cyt cred + 4H+MATRIZ + O2 4 Cyt cox + 2H2O

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Reaccin final:
4Cyt cred + 8H+MATRIZ + O2
4Cyt cox + 2H2O +
4H+CITOSOL

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La enzima superxido dismutasa neutraliza los radicales

superxido al catalizar la conversin de dos de estos radicales en
oxgeno molecular y perxido de hidrgeno, ste se transforma en O 2
y H2O por accin de la catalasa.
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La hiptesis quimiosmtica describe a la sntesis de ATP mediante la ATP

sintasa dirigida por una fuerza protn motriz.
El transporte de electrones genera un gradiente de protones a travs de la
membrana mitocondrial interna.
El pH externo es 1.4 < interno y el potencial de membrana es 0.14V
positivo en el exterior, ste genera un energa libre de 5.2 kcal/mol
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ATP SINTASA
Subunidad F1 se proyecta hacia la matriz
y posee actividad cataltica de la sintasa.
F1 formada por 5 tipos de cadenas
polipeptdicas: 3 3 .
Las subunidades y se disponen en
forma alternada en un anillo hexamrico,
las dos se unen a nucletidos pero solo
las participan directamente en la
catlisis.
El tallo central est formado por dos
protenas: y . La subunidad contiene
un superhelicoide que llega hasta el
centro del hexmero 3 3.
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ATP SINTASA
Subunidad F0 es un segmento hidrofbico
que atraviesa la membrana mitocondrial
interna, contiene el conducto de protones
del complejo.
El conducto est formado por un anillo de
10 a 14 subunidades c incrustadas en la
membrana y una unidad a localizada en
la periferia del anillo.
F0 y F1 estn conectadas de dos formas
mediante el tallo central y mediante
una columna externa formada por una
subunidad a, dos b y una .

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SNTESIS DE ATP

La ATP sintasa cataliza la formacin de ATP a partir de ADP y

ortofosfato:
ADP-3 + HPO4-2 + H+ ATP-4 + H2O

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SNTESIS DE ATP

Paul Boyer propuso el mecanismo de cambio de unin para la sntesis

de ATP dirigida por protones.
Cambios en las propiedades de las tres subunidades permiten la
unin secuencial del ADP y del Pi, la sntesis de ATP y su liberacin.
La interconversin de las tres formas: T, L y O est dirigida por la
rotacin de la subunidad .
El mecanismo se basa en las estructuras de las subunidades a y c de F0.
Entre 9 y 12 subunidades c se ensamblan para dar lugar a un anillo
simtrico que atraviesa la membrana.
La subunidad a contiene dos semiconductos de protones que no
pueden atravesar completamente la membrana.
El gradiente de protones provoca la rotacin del anillo c.
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Cada giro de 360 da lugar a

la sntesis de y liberacin de 3
molculas de ATP.
Si el anillo est formado por
10 subunidades c, cada ATP
formado requiere el transporte
de 10/3 = 3.33 protones.
Se considera que 3 protones
deben fluir hacia la matriz por
cada ATP formado.

Ruta de protones a travs de la membrana

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ATP-ADP traslocasa mitocondrial

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LANZADERAS para transporte de electrones

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Lanzadera malato-aspartato
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Transportadores mitocondriales
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Control respiratorio: los electrones se transfieren hasta el O slo

si el ADP se fosforila a ATP (cuando se requiere ATP).

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Accin de algunos inhibidores

Rotenona: insecticida de origen vegetal.
Amital: amobarbital sedante hipntico.
Oligomicina y diciclohexilcarbodiimida
(DCCD): impiden entrada de protones a
travs de ATP sintasa.
Actractilsido (glicsido vegetal), cido
bongkrkico (antibitico): inhibidores de
ATP-ADP traslocasa.
2,4-dinitrofenol: desacoplador de la
fosforilacin oxidativa.

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