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ANALISIS E INTERPRETACIN DE LAS ALARMAS,

DISPERSOGRAMAS E HISTOGRAMAS
Analizador Hematolgico BC-5300/ BC 5380

Lic. TM Javier Quiroz Castill


Ver: 1.0 27 Abril 2011

Aplicaciones
Marketing
Dpto./de
Ingeniera Medica

Familia de
Productos
Mindray

Ver: 1.0 27 Abril 2011

Oficinas

Shenzhen,
P.R.China
Ingresos:
547.5 Mill. USD
(2008)
Empleados:
5580
Posicionamiento
de Mercado:
Mayor compaa
2
China en
Dpto. de Ingeniera Medica

Familia de Analizadores
Hematolgicos

Ver: 1.0 27 Abril 2011

Dpto. de Ingeniera Medica

ANALIZADOR HEMATOLOGICO BC 5300 / 5380


Analizadores 5 Diff.
Autocargador
Modo de Trabajo (lista de trabajo)
Volmen de reaccin 20 ul.
Triple sistema de alarmas
Tres Histogramas / Un Dispersograma

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Aplicaciones
Marketing
Dpto./de
Ingeniera Medica

Estudio de Clulas Sanguneas


Neutro

RBC

Eos

Mono
PLT
Baso
Lymph

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Dpto. de Ingeniera Medica

Tecnologa 3 diff?

Secuencia normal de
Tamao
Despus de los Lisantes
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Dpto. de Ingeniera Medica

Tecnologa 5 diff?
Cinco grupos Leucocitarios

Lymphocyte
Monocyte
%

25 ~ 30%
3 8

Neutrophil

50 ~70%

Basophil

0 1%

Eosinophil
3%

0.5

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Dpto. de Ingeniera Medica

Similitudes y diferencias
Grnulos pequeos,
ncleo multilobular

Gran ncleo que ocupa


casi toda la clula

Grnulos grandes y
oscuros; ncleo
lobulado

Grnulos grandes
rojo/naranja; ncleo
prpura bilobulado
Ms citoplasma que el linfocito

Estructura simple y diferente tamao


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Estructura compleja y tamao medio


Dpto. de Ingeniera Medica

Diferenciacin de Leucocitos
5 Diff.
Existen 5 diferentes tipos de Leucocitos ( WBC)
Lymphocyte

Tamao pequeo, gran


ncleo con relacin a
citoplasma, el mayor
constituyente del
sistema inmune.

Monocyte

Grande, citoplasma sin


grnulos, interviene en la
ingestin de partculas
extraas, como bacterias o
parsitos.

Neutrophil

Grnulos en citoplasma
de color rosado, marcador
de etapa aguda de la
inflamacin.

Eosinophil

Grnulos de color
naranja, gruesos ,
relacionados con
infecciones parasitarias.

Basophil

Menos comn de todos,


grnulos de color azul
oscuro, relacionados con
infecciones micticas.

Granulocitos

LYM

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MON

NEU

EOS

BAS

Dpto. de Ingeniera Medica

WBC: White Blood Cell


Tamao

Combinacin de Tamao y
Complejidad

A
B

Complejidad, grnularidad (vacuolas, artefactos)


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Dpto. de Ingeniera Medica

Cmo Diferenciar los Diferentes


Tipos de Leucocitos?
Utilizando sus diferentes caractersticas, TAMAO Y
COMPLEJIDAD CELULAR
Para eso utilizaremos cuatro tecnologas combinadas:
Citometra de Flujo
Dispersin de Laser
Tincin Citoqumica
Impedancia Elctrica

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Aplicaciones
Marketing
Dpto./de
Ingeniera Medica

WBC Tecnologa
Citometra de Flujo
Celulas inyectadas en una
cmara de flujo que esta
localizado en el paso ptico de
una fuente de luz, usualmente un
laser.
La cmara de flujo contiene un
lquido que fluye rapidamente : el
fluido envolvente que lleva la
muestra a alta velocidad por el
paso de luz.
Las clulas mantienen su
orientacin y posicin en el fluido
debido a que obedecen las
caracterstricas del flujo laminar y
atraviesan en fila de uno el paso
ptico.
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Dpto. de Ingeniera Medica

CITOMETRIA DE FLUJO Una sub disciplina


de la citologa analtica con orientacin
metodolgica, que mide las clulas en
suspensin, dentro de un vehculo lquido, a su
paso por una estacin de medicin.

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Dpto. de Ingeniera Medica

WBC Tecnologa
La dispersin de Luz ocurre
cuando la partcula reflacta la
luz que incide sobre ella, esto
depende de las caractersticas
fsicas de la partcula.

Dispersin de Luz Laser

-Forward scatter (FS): Tamao


-Side scatter (SS): Complejidad

1 - 5
6 - 20

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Dpto. de Ingeniera Medica

Dispersin de Laser de ngulo Mltiple


Dispersin de ngulo
mayor (MAS)8~20
Granularidad (Complex)

1 Muestra

Dispersin de ngulo
Menor (LAS)2~5
Volumen

2 Laser
3 Lentes

1
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Dpto. de Ingeniera Medica

Teora de Mie
En clulas diferentes de diferente tamao (Monoc. y Linf.)
El ngulo bajo las diferencia por tamao

Laser
LAS

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Dpto. de Ingeniera Medica

Teora de Mie
En clulas diferentes pero del mismo tamao (granulocitos)
ngulo mayor refleja la complejidad celular

Laser

MAS

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Dpto. de Ingeniera Medica

WBC Tecnologa
Tincin Qumica
LEO I

LEO
II

EOS

Otros
WBC

RBC

Cmara de diferencial

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Dpto. de Ingeniera Medica

With LH Lyse treatment, the original


volume of basophils is kept while the
other WBC is shrinked.

LH lyse

BASO

other
WBC

RBC

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WBC/BASO Channel

Dpto. de Ingeniera Medica

DISPERSOGRAMA / SCATTERGRAMA

DEFINICI
N
Grfico estadstico que
representa la distribucin de
dos variables en una
muestra. Una variable se
representa grficamente en
el eje vertical; la otra en el
horizontal.
Un
dispersograma demuestra el
grado o tendencia de
presentacin
de
las
variables en relacin mutua.

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Aplicaciones
Marketing
Dpto./de
Ingeniera Medica

Entendiendo el Dispersograma Normal

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Dpto. de Ingeniera Medica

INTERPRETACIN DEL
DISPERSOGRAMA
Neu
Mon

Lymph

Ghost

FS : Frontal Scatter / Dispersin Frontal /


Informacin sobre el Tamao celular
SS : Side Scatter / Dispersin Lateral / Informacin
sobre Complejidad Celular
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Aplicaciones
Marketing
Dpto./de
Ingeniera Medica

DIFF
Grande

Neutro es complejo y
grande
Mono es ms grande que
el Linfo

Estructura interna del


Linfo es mas simple que la
del EOS.
Pequeo

Estructura simple
Ver: 1.0 27 Abril 2011

Estructura compleja
Dpto. de Ingeniera Medica

Dispersograma Anormal y Su Significado

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Dpto. de Ingeniera Medica

Muestras Anormales:
Banderas
Left Shift
LIC

Mon
ALY

Lym

ALY
NRbc
Ghost

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Dpto. de Ingeniera Medica

Dispersograma de una muestra ANORMAL

Leucopoenia

Lymphocytosis
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Eosinophilia

Neutrophilia

Monocytosis
Dpto. de Ingeniera Medica

Dispersograma de una muestra ANORMAL

ATL

Left shift
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LIC

Lyse resistant

Dpto. de Ingeniera Medica

Dispersograma
Anormal
Mov Izq.

LIC

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Dpto. de Ingeniera Medica

Dispersograma Anormal

ALY

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Dpto. de Ingeniera Medica

Ganancia inadecuada

Ganancia baja

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Ganancia alta

Dpto. de Ingeniera Medica

Celda de flujo sucia o con cogulos

Ver: 1.0 27 Abril 2011

Dpto. de Ingeniera Medica

DEFINICIN

Seal por
medio de la
cual se
informa sobre
la presencia
real o
inminente de
una amenaza,
aviso de la
probabilidad

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ALARMA

Aplicaciones
Marketing
Dpto./de
Ingeniera Medica

1.
Lmite
Excedido

SISTEMA DE ALARMAS
2.
Banderas

3.
Se Requiere
Confirmacin
Microscpica

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Aplicaciones
Marketing
Dpto./de
Ingeniera Medica

Por qu se requiere
confirmacin
En estado patolgico las
clulas alteran sus
microscpica?
RUO

Atypical
Lymphocytes (#,%)

caractersticas celulares
normales
Tamao : clulas
activadas son mas
grandes
Complejidad : Clulas
activadas desarrollanAplicaciones / Marketing

Large Immature
Cell (#,%)

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Dpto. de Ingeniera Medica

Superposicin de poblaciones
Como consecuencia de
esto las clulas no se
encontraran
en
las
zonas
donde
normalmente
se
ubicaban. Y es posible
que las poblaciones se
superpongan
no
permitiendo asi una
identificacin definitiva.
Las posibilidades son
variadas

35

65

35 65
40 60
41 70

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Dpto. de Ingeniera Medica

no
concuerda
con el
resultado
del
analizador?
Recordar que en raras
ocasiones la lectura
microscpica hecha
por dos operadores
diferentes coincide
completamente

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Diferencia de mtodo,
recordar que el analizador
cuenta miles de clulas y el
observador 100.
Extensin de la muestra, de
la aguja, o del tubo?
Fragilidad de los eosinfilos
Tcnica de lectura (incluyo
los extremos?)
Alteraciones debido a la
preparacin del colorante.
Densidad de la muestra.
Velocidad del extendido.
Dpto. de Ingeniera Medica

HISTOGRAMAS, EL
PRINCIPIO DE
COULTER
Luego de producida la accin del
lisante las clulas son medidas y
contadas por el mtodo de
impedancia (recordar que por el
principio de Coulter el nmero de
pulsos producidos por el paso de una
partcula con carga de una solucin a
otra conectas y unidas mediante un
registrador de voltaje equivale al
nmero de partculas que se
desplazan de una solucin a otra, y la
duracin del pulso es directamente
proporcional al volumen de la
partcula.)

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Dpto. de Ingeniera Medica

HISTOGRAMAS
En estadstica, es la
representacin grfica de
una variable, en forma de
barras, donde la superficie
de cada barra es
proporcional a la
frecuencia de los valores
representados.
En el eje vertical se
presentan las frecuencias.
En el eje horizontal se
presentan los valores de las
variables

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Dpto. de Ingeniera Medica

HISTOGRAMAS
El histograma es un grafico
construido mediante la
representacin de dos variables:
a.- Volumen de la partcula, en el eje
X (Horizontal), en femtolitros
b.- Nmero de partculas, eje Y
(Vertical)
El analizador presenta 3 histogramas
WBC, Baso
Glbulos Rojos
Plaquetas

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Dpto. de Ingeniera Medica

HISTOGRAMAS

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Dpto. de Ingeniera Medica

HISTOGRAMAS

Ver: 1.0 27 Abril 2011

Dpto. de Ingeniera Medica

HISTOGRAMA DE
PLAQUETAS
Observe que la distribucin de la
poblacin no es simtrica, esto es
normal debido a que las plaquetas son
restos celulares de forma y tamao
variable, una plaqueta joven es de
mayor tamao que una senescente, si
bien el lmite aceptado para una
plaqueta normal son 12 fl. Eso quiere
decir que el promedio de la poblacin
(el pico) debera encontrarse siempre
al lado izquierdo de la flecha, como se
observa en el grfico.

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Dpto. de Ingeniera Medica

HISTOGRAMA DE
PLAQUETAS
Un grfico que siga la lnea roja debe
interpretarse como posible agregacin
plaquetaria (el origen intra o
extravascular de la misma no puede
determinarse) o con un aumento en el
nmero de plaquetas grandes, fragmentos
celulares (membranas de glbulos rojos)
Un grfico que siga la lnea verde debe
interpretarse como interferencia
producida por microcitosis marcada,
glbulos rojos de menos de 30 fl.
(recordar que tanto plaquetas como
glbulos rojos se miden por impedancia
en una misma cmara y de manera
simultnea.)

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Dpto. de Ingeniera Medica

HISTOGRAMA DE
PLAQUETAS
Una agregacin plaquetaria lleva
consigo una disminucin en el
nmero de plaquetas (2 o ms
plaquetas agregadas son contadas
como una de mayor tamao).
Por lo tanto cada vez que se
encuentre una alteracin en la
forma del histograma de
plaquetas, debe investigarse
microscpicamente la muestra en
busca de agregacin plaquetaria.

Ver: 1.0 27 Abril 2011

Dpto. de Ingeniera Medica

HISTOGRAMA DE
GLOBULOS ROJOS
El Histograma de Glbulos Rojos se
aprecia como una distribucin cercana a la
normal.
Observe la distribucin casi simtrica de
la poblacin con el pico de la poblacin
cercana a los 87 fl. Observe adems que
existen hemates debajo de los 50 fl. Y
encima de los 100 fl.
El ancho de base de la campana
representa el nivel de variabilidad de la
poblacin, (Anisocitosis/poiquilocitosis)
La posicin de la campana sobre el eje
horizontal representa la tendencia Micro,
Normo o Macroctica de la poblacin.

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Dpto. de Ingeniera Medica

HISTOGRAMA DE
GLOBULOS ROJOS

Lnea Verde: Microcitosis sin anisocitosis.


Lnea Roja: Macrocitosis sin anisocitosis.
Lnea Amarilla: Anisocitosis, y/o
Poiquilocitosis.
Lnea Azul: Doble poblacin.

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Dpto. de Ingeniera Medica

Case Presentation

Normal people, the RBC


histogram shape is in perfect
Gaussian distribution.

Dimorphologic RBC histogram,


indicating anisocytosis. From a
rectal cancer patient

Microcytosis, the RBC


dominant peak moves to
left. From a 34-year old
outpatient.

Dimorphologic RBC histogram.


From a recovery of Irondeficiency anemia treatment
patient.

Ver: 1.0 27 Abril 2011

Dpto. de Ingeniera Medica

WBC/BASO Histogram

WBC
BAS%

Ver: 1.0 27 Abril 2011

BAS#

Dpto. de Ingeniera Medica

Basophil

WBC

ghosts

No

BASO

Ver: 1.0 27 Abril 2011

100

200

fL

Dpto. de Ingeniera Medica

RESUMEN
DC
Impedanci
a

RBC
PLT

LH Lisado

HGB
BAS

DIFF

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LEO II Lyse

Dispersin Laser

LEO I Lyse

Citometra de
Flujo

Muestra

LIN
MON
EOS
NEU

Dpto. de Ingeniera Medica

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