Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
CIUDAD JUREZ
MDICO CIRUJANO
MEDIOS DE CULTIVO
MICROBIOLOGA I
Catedrtico: M.C. Georgina Escudero Hermosillo
INTEGRANTES DEL EQUIPO DE LABORATORIO:
CONTENIDO:
1.Introduccin.
2.Agar Chocolate.
3.Agar CLED.
4.Agar BHI.
5.Agar cistina-telurito.
6.Agar Columbia.
7.Agar EMB.
8.Agar chocolate con Isovitalex y vancomicina.
9.Agar ADC.
10.
Agar Campy con sangre.
11.
Agar CNA.
12.
Agar glucosa de Sabouraud.
13.
Agar HE.
14.
Agar de MacConkey.
15.
Agar Mueller-Hinton.
16.
Agar nutritivo.
17.
Agar PEA.
18.
Agar SABHI.
19.
Agar salino manitol.
20.
Agar sangre.
INTRODUCCIN
MEDIOS DE CULTIVO
Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de
microorganismos es observar su crecimiento en sustancias
alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio.
El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el
Medio de Cultivo.
El crecimiento de los microorganismos es el Cultivo.
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de
cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son:
Temperatur
a
Grado de
humedad
Presin de
oxgeno
Acidez o
alcalinidad
Agar Chocolate
Componentes
Principales
La
cistina
mejora
la
recuperacin
de
las
enterobacterias.
La lactosa y el indicador
permiten
distinguir
las
bacterias fermentadoras de
lactosa de no fermentadoras
de lactosa.
La deficiencia en electrolitos
limita el movimiento de
Proteus.
Usos
Es un medio diferencial
recomendado
para
el
anlisis bacteriolgico de
orina ya que en l crecen
profusamente
la
gran
mayora de las bacterias,
que provocan infecciones
urinarias.
Visualizacin De
Colonias
Fermentadoras de lactosa
se ven amarillas.
Las no fermentadoras se
ven incoloras.
Agar cistina-telurito
Agar Columbia
Agar de MacConkey
Aislamiento de bacterias gram negativas.
Selectivo y diferencial
Colorante
cristal
violeta
Sales
biliares
Gram positivas
Gram
positivas y
algunas gram
negativas
Agar Mueller-Hinton
Realizacin de las pruebas de sensibilidad a antibiticos
(Bauer-Kirby, dilucin en agar y test de psilon).
Agar nutritivo
Medio rico para el cultivo de microorganismos en
general, crecen una gran mayora, excepto algunos muy
exigentes.
No es diferencial.
Caldo nutritivo
Peptona
Triptona-soja
Infusin de cerebro y
corazn
Agar Brucella
Agar Columbia
Etc.
Agar
Alcohol fenil-etilico
gram negativas
Agar Skirrow
Preparado con una base como agar
brucela,
TSA
o
agar
Columbia,
enriquecida con sangre de oveja al 5% y
que
se
hace
selectivo
para
Campylobacter por la adicin de
vancomicina, polimixina y trimetoprim.
Agar SS (Salmonella-Shigella)
Medio de cultivo utilizado para el
aislamiento de Salmonella spp. y de
algunas especies de Shigella spp. a partir
de heces, alimentos y otros materiales en
los cuales se sospeche su presencia.
Es un medio de cultivo selectivo y
diferencial.
Agar sulfito de
bismuto
Medio para el aislamiento de Salmonella typhi. El
sulfato ferroso acta como indicador en la
produccin de sulfhdrico. El sulfito de bismuto y
el verde brillante inhiben considerablemente el
crecimiento de bacterias contaminantes.
Agar Thayer-Martin
Este medio es una modificacin del agar
chocolate para que sea selectivo para las
neiserias patgenas. Estas modificaciones
incluyen la adicin de colistina (para inhibir otras
bacterias Gram negativas), vancomicina (para
inhibir bacterias Gram positivas) y nistatina o
anisomicina (para inhibir levaduras).
Caldo nutritivo
Medio de cultivo utilizado para propsitos
generales,
para
el
desarrollo
de
microorganismos con escasos requerimientos
nutricionales.
Su
uso
est
descripto
en
muchos
procedimientos para el anlisis de alimentos,
aguas y otros materiales de importancia
sanitaria.
Procedimiento:
1.- Inocular e Incubar en condiciones
aerbicas a 35 2C durante 6-24
horas.
2.- Despus de incubacin, Subcultivar
en placas de Agar MacConkey, Agar SS,
Agar XLD Agar Cromogenico
Salmonella.
3.- Incubar a 35 2C durante 18 24
horas.
Caldo selenito F
Fundamento:
Este
caldo
selectivo
favorece
el
crecimiento
de
Salmonella.
spp.
En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo
bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, el selenito de sodio inhibe la flora
Gram positiva y la mayora de la flora entrica excepto Salmonella spp. durante las primeras 812 horas de incubacin.
Siembra:
Frmula (en gramos por
litro):
Peptona 5.0
Lactosa 4.0
Fosfato de sodio 10.0
Selenito de sodio 4.0
pH final: 7.0 0.2
Incubacin:
A 35-37 C, durante 16-24 horas,
en aerobiosis.
Caldo tetrationato
Medio de cultivo utilizado para el
enriquecimiento selectivo de Salmonella
spp. a partir de heces, orina, alimentos y
otros materiales de importancia sanitaria.
Fundamento:
El medio de cultivo contiene peptona que provee los nutrientes necesarios
para el desarrollo bacteriano, y carbonato de sodio que neutraliza y
absorbe metabolitos txicos.
Peptona 5.0
Sales biliares 1.0
Carbonato de calcio 10.0
Tiosulfato de sodio 30.0
Siembra:
Puede realizarse la
siembra partiendo de
un
caldo
de
preenriquecimiento o
en
forma
directa
conservando
la
proporcin 1:10.
Incubacin:
Caractersticas
medio:
Durante 12-24
horas a 35-37
C,
en
aerobiosis.
Medio
suspensin
lechosa.
del
preparado:
blanco
Caldo tioglicolato
Este medio
de cultivo
fue
descripto
originalmente por Brewer. En microbiologa
clnica se usa por su capacidad de favorecer el
desarrollo
de
una
gran
variedad
de
microorganismos aerobios y anaerobios.
Fundamento:
Tiene por sus componentes la
calidad nutricional del caldo triptena
soya. Este permite el desarrollo de
una
amplia
variedad
de
microorganismos,
incluidos
los
nutricionalmente exigentes.
Incubacin:
El tiempo, temperatura y condiciones de
incubacin dependern del microorganismo
que
se
quiera
recuperar.
Siembra:
Segn la muestra a analizar:
Muestras lquidas: agregar 1 o 2 gotas de la
muestra a tubos conteniendo medio de
cultivo.
Tejidos y otras muestras slidas: macerar
en caldo estril. Luego sembrar de la misma
manera que para muestras lquidas.
Hisopos: insertarlos en el medio de cultivo,
luego de haber sembrado el medio slido
apropiado.
Para el cultivo de anaerobios, antes de
sembrar, eliminar el oxgeno presente,
mediante el hervido de los tubos con las
tapas flojas, y luego enfriarlos a temperatura
ambiente con las tapas bien cerradas.
Fundamento:
Suplemento estril liofilizado que contiene sulfato de colistina y cido
nalidxico y al ser agregado el contenido de un vial al Caldo Todd
Hewitt se obtiene una concentracin final de colistina 10 ug/ ml y cido
nalidxico 15 ug/ml.
Uso:
El agregado de antimicrobianos al caldo Todd Hewitt, se utiliza para
favorecer la recuperacin del Estreptococo Grupo B cuando se
procesan muestras de tracto genital femenino.
Las
muestras
clnicas
recomendadas son el hisopado de
introito vaginal y el hisopado
anorectal. Tambin se puede
realizar el hisopado de fondo de
saco posterior .Colocar el hisopo
en medio de transporte Stuart o
Amies para mantener la viabilidad
de los microorganismos durante su
envo al laboratorio. Descargar el
contenido del hisopo en el caldo.
aspecto
Almacenamiento:
10-35 C.
Medio de Kligler
Medio de cultivo frecuentemente usado en
microbiologa
de
alimentos
para
la
diferenciacin de enterobacterias, en base a la
fermentacin de glucosa y lactosa, y a la
produccin de cido sulfhdrico.
Siembra:
Frmula (en gramos por litro):
Peptona de carne 13.0
Cloruro de sodio 5.0
Lactosa 10.0
Tripteina 10.0
Glucosa 1.0
Citrato de hierro y amonio 0.5
Tiosulfato de sodio 0.3
Rojo de fenol 0.025
Agar15.0
pH final: 7.3 0.2
Incubacin:
A 35-37C durante 24 horas, en
aerobiosis.
Caractersticas
Medio preparado: rojo
del
medio:
Resultados:
1-Pico alcalino/fondo cido (pico rojo/fondo amarillo): el
microorganismo
solamente
fermenta
la
glucosa.
2-Pico cido/fondo cido (pico amarillo/fondo amarillo): el
microorganismo
fermenta
glucosa,
y
lactosa.
3-Pico alcalino/fondo alcalino (pico rojo/fondo rojo): el
microorganismo
es
no
fermentador
de
azcares.
4-La presencia de burbujas, o ruptura del medio de cultivo,
indica
que
el
microorganismo
produce
gas.
5-El ennegrecimiento del medio indica que el microorganismo
produce cido sulfhdrico.
Bibliografa:
LABORATORIOS BRITANIA SOCIEDAD ANONIMA, 2014, productos de
cultivo,
http://britanialab.com.ar/esp/productos/b02/nutritivocaldo.htm
http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/verdebriagar.htm
http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/tripteinasoyagar.htm
http://www.britanialab.com.ar/espanol/k05_02.html
http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/tcbsmedio.htm
http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/salmoshigagar.htm
Luis Felipe Higuita Gutirrez Escuela de microbiologa, 2013, Bacitracina,
http://aprendeenlinea.udea.edu.co/lms/moodle/file.php/743/Bacteriologia
Pruebas_de_laboratorio/Bacitracina.html
Universidad de Sevilla, 2012, medios de cultivo,
http://asignatura.us.es/mbclinica/docs/recursos/34/medios-de-cultivo.pdf