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CENTRIFUGACIN

EQUIPO 2
SORIA ROJAS ALINA
TAPIA MUCIO JOS ANTONIO

CENTRIFUGA CIN

SE BASA EN EL PRINCIPIO FUNDAMENTAL, DE


QUE PARTCULAS QUE DIFIEREN EN DENSIDAD,
TAMAO Y FORMA, SEDIMENTA A DIFERENTES
VELOCIDADES AL ESTAR SUJETAS A UNA FUERZA
CENTRFUGA BAJO ALTA VELOCIDAD
ROTACIONAL.


-LA

SEDIMENTACIN DEPENDE DEL CAMPO


CENTRFUGO (G) APLICADO, QUE
GENERALMENTE SE EXPRESA COMO CAMPO
CENTRFUGO RELATIVO (CCR), EXPRESADO EN
MLTIPLOS DE g (CONSTANTE GRAVITATORIA)
CCR(ges)

TIEMPO QUE TARDA UNA PARTCULA EN


EL
SEDIMENTAR EN EL SENO DE UN DETERMINADO
MEDIO, DESDE EL MENISCO DEL LQUIDO HASTA
EL FONDO DEL TUBO DE LA CENTRFUGA ES:

CENTRFUGAS

CENTRFUGAS PREPARATIVAS: PUEDEN PROCESAR


GRANDES VOLMENES DE MATERIAL Y SE UTILIZAN
PARA EL AISLAMIENTO U OBTENCIN DE
FRACCIONES DETERMINADAS, SE CLASIFICAN EN
TRES GRANDES GRUPOS:
I. CENTRFUGAS DE USO GENERAL (6000 rpm Y CCR
DE 6000 g)
II. CENTRFUGAS DE ALTA VELOCIDAD (25000 rpm Y
CCR DE 89000 g)
III. ULTRACENTRFUGAS PREPARATIVAS (75000 rpm Y
CCR DE 510000 g)

CENTRFUGAS

ULTRACENTRFUGAS ANALTICAS: SE UTILIZAN


PARA EL ESTUDIO DE LAS CARACTERSTICAS
DE LA SEDIMENTACIN DE MACROMLECULAS
Y ESTRUCTURAS BIOLGICAS (70000 rpm Y
CCR DE 500000 g)

COEFICIENTE DE
SEDIMENTACIN

SE PUEDE MEDIR EL COEFICIENTE DE


SEDIMENTACIN (s), AL CALCULAR EL
DESPLAZAMIENTO DEL SOLUTO DESDE EL
CENTRO DE ROTACIN Y LA VELOCIDAD A LA
CUAL OCURRE ESE DESPLAZAMIENTO.
A MEDIDA QUE AUMENTA EL TAMAO DE LA
PARTCULA AUMENTA EL VALOR DE s.

TCNICAS DE
CENTRIFUGACIN

SE CLASIFICAN EN MTODOS:
MTODOS CLSICOS: LA SEDIMENTACIN DE
LOS COMPONENTES DE LA MEZCLA OCURRE
EN UN MEDIO DE DENSIDAD CONSTANTE.
MTODOS DE GRADIENTE DE DENSIDAD: LA
SEDIMENTACIN SE PRODUCE EN UN MEDIO
CON UNA DENSIDAD QUE CAMBIA
GRADUALMENTE.

Cmo se realiza una


centrifugacin?

EL TUBO DE CENTRIFUGA SE LLENA CON EL


HOMOGENADO , SE EQUILIBRA CON OTRO DE
IGUAL PESO Y SE INTRODUCE EN EL ROTOR.
- EL SEDIMENTO O PASTILLA
-SOLUCIN DENOMINADA SOBRENADANTE
AMBAS PUEDEN SEPARARSE POR
DECANTACIN.


EL SOBRENADANTE SE SOMETE A UN CAMPO
CENTRFUGO MAYOR, PARA VOLVER A
OBTENER OTRA PASTILLA Y OTRO
SOBRENADANTE Y AS SUCESIVAMENTE, ESTE
PROCEDIMIENTO SE CONOCE COMO
CENTRIFUGACIN DIFERENCIAL O
FRACCIONADA Y SE BASA EN LAS DIFERENTES
VELOCIDADES DE SEDIMENTACIN ENTRE
PARTCULAS DE DISTINTO TAMAO Y
DENSIDAD.

FRACCIONAMIENTO DEL HOMOGENADO CELULAR

CENTRIFUGACIN DIFERENCIAL
Centrifugacin a
baja velocidad
1000g, 10 min

Homogenado
celular

SOBRENADANTE
1

SOBRENADANTE
2

SOBRENADANTE
3

Velocidad
media
20000g, 20min

Velocidad alta
80000g, 1h

Velocidad
muy alta
150000g, 1h

PRECIPITADO 1
Clulas enteras,
ncleos,
citoesqueleto

PRECIPITADO 2
mitocondrias,
lisosomas,
peroxisomas

PRECIPITADO 3
Microsomas,
otras vesculas
pequeas

PRECIPITADO 4
Ribosomas,virus
macromolculas


EL ORDEN DE SEDIMENTACIN DE LOS
PRINCIPALES COMPONENTES CELULARES ES:
PRIMERO CLULAS ENTERAS, Y RESTOS
CELULARES, SEGUIDOS DE NCLEOS,
CLOROPLASTOS, MITOCONDRIAS, LISOSOMAS
Y OTROS MICROCUERPOS, LA FRACCIN
MICROSOMAL QUE COMPRENDE FRAGMENTOS
DE RETCULO ENDOPLMICO LISO Y RUGOSO
Y FINALMENTE RIBOSOMAS