Vivir con O2 es peligroso; se cuenta con el O2 para

fortalecer las clulas, pero el O2 es una molcula

reactiva que puede causar serios problemas si no se
controla cuidadosamente.
Uno de sus peligros esta en su facilidad para
convertirse en otros compuestos reactivos.
Dentro de nuestras clulas, los electrones estn
continuamente saltando de un sitio a otro en las
molculas portadoras derivadas de la riboflavina y la
niacina.
Si el O2 corre hacia uno de estas molculas
portadoras, el electrn puede ser transferido
accidentalmente a ella. Esto convierte el O2 en un
compuesto peligroso como los radicales superoxidos
y el perxido de hidrogeno, los cuales atacan los
tomos de S y los iones metlicos en las protenas.

Generalidades cont.

Se presentan peores acciones.

Los

iones

libres

ocasionalmente

de

Fe

convierte

en
el

la

clula

perxido

de

hidrgeno en radicales hidroxilo. Estas atacan

mortalmente las molculas y mutan el DNA.
Una teora, an en controversia, es que este
tipo de dao oxidativo acumulado por aos en
nuestra vida es el causante de la vejez.
Antioxidantes al rescate.
Afortunadamente,

las

clulas

producen

una

variedad de enzimas antioxidantes para pelear

los efectos laterales que produce el vivir con O2.
Dos enzimas importantes son la superoxido
dismutasa

la

cual

convierte

los

radicales

superoxido en peroxido de hidrgeno, y la

catalasa cual convierte el peroxido en agua y O2
gas.

Peroxidasa
La oxidacin enzimtica se le considera la
tecnologa del futuro, porque tanto las
necesidades ambientales y las regulaciones
continuas, cada da son mas severas, y
deben desarrollarse tecnologas de
tratamiento destructivo consistente con la
minimizacin de desechos
El oxidante ideal es la peroxidasa que cubre
la semilla de la soya, la cual es barata y de
fcil disponibilidad.
La funcin biolgica primaria de las enzimas
peroxidasas es oxidar a una variedad de
donores de hidrogeno a expensas del
perxido o del oxigeno molecular en
reacciones oxiacidas.

Peroxidasas cont
El recubrimiento de las semillas de soya son la
fuente ideal de peroxidasa. Debido a la
naturaleza oxidativa de las peroxidasas, hay
varias reas donde puede reemplazar tcnicas
comunes de oxidacin qumicas.

Las 7 reas donde las peroxidas puede tener un

uso inmediato y un impacto econmico son:
1.

blanqueo de pulpa y papel (sustituyendo al

Cloro como blanqueador)

2.

Tratamiento de aguas de desecho

3.

Remediacin de suelos

4.

Destruccin de desechos sobre el sitio

5.

Acondicionador de masa de pan

6.

Para Formaldehdo

7.

Diagnostico medico.

Peroxidasas cont
En cada una de estas reas, el uso de
peroxidasas tiene ventajas sobre las tcnicas
comnmente usadas.
La catlisis con peroxidasa de soya natural
ofrece significativos aportes sobre los procesos
qumicos como:
Minimizar el uso de qumicos txicos
Disminuir costos
Obtener productos limpios
Eficiencia en los costos
Obtencin de un nico producto.
Estabilidad a temperaturas altas, larga va e
incremento a la sensibilidad son ventajas en la
tecnologa de diagnstico.

Peroxidasas cont
La alta reactividad de las peroxidasas de
soya han encontrado utilidad comercial en la
panadera porque protege de qumicos
potencialmente cancergenos.
Se han realizado Tesis sobre el uso de
peroxidasas de soya y estudios sobre la
aplicabilidad de la peroxidas de soya, sus
tecnicas de aislamiento y produccin

PEROXIDASAS

Son hemoenzimas que usan el H2O2 como un aceptor de

electrones

para catalizar una serie de reacciones

oxidativas.
Se encuentran en bacterias, hongos, plantas y animales

Un oxidante ideal es la
peroxidasa que cubre la semilla
de soya, la cual es barata y
fcilmente disponible

Tan solo el 80% del O2 respirado es reducido

completamente
O2 + 4H+ + 4e

2H2O

Las peroxidasas son un grupo de enzimas que

catalizan reacciones de oxidacin- reduccin. Por
esto se les clasifica como oxido- reductasas, las
cuales usan H2O2 como aceptor de electrones
para catalizar las diferentes reacciones
oxidativas. La reaccin total es:
donor + H2O2 <=> donor oxidado + 2 H2O
El cofactor requerido por la peroxidasa es el
Hemo. La estructura primaria del monmero de
la peroxidasa de rbano picante contiene 306 aa
y 1 grupo hemo
La estructura secundaria esta compuesta por
alfa hlices.
La estructura terciaria esta formada por 2
dominios
Cuaternaria contiene 6 monmeros cada uno con
un grupo hemo.

La peroxidasa de
rbano picante el Fe
hemo se enlaza
covalentemente al N
histidnico del anillo
imidazol 170. El plano
porfirnico es al
Peroxidasa de rbano picante anillo imidazol

Clorperoxidasa

Rodean al sistema otros 3 residuos histidinicos en la

mayora de las peroxidasas al lado distal del hemo. Ellos
conforman el bolsillo para el H2O2

y son los responsables

del rompimiento cataltico de H2O2 El grupo hemo con estos

3 residuos conforman el sitio activo de la enzima

Enzima

Reaccin

Peroxidasa de rbano
picante y espinaca

A-H2 + H2O2

Cloroperoxidasa

R-H + X- + H+ + H2O2
R-X + 2H2O

Citocromo C
peroxidasa

ROOH + 2H+ + 2e
H2O

A + 2H2O

ROH +

CITOCROMO C PEROXIDASA

Es una hemo- enzima frrica soluble en agua, la

cual se encarga de reducir el peroxido a agua.
CCP + H2O2 + 2 CCP-REDUCIDO + 2H+
CCP + 2H2O + 2CCP-OXIDADO
La enzima reacciona con otras especies perxidos
de manera mas lenta
La enzima:
monmero de peso molecular 34 kDa
contiene 293 aa

Contiene un grupo hemo

Cristaliza de agua
Como las catalasas, la reaccin del citocromo c
peroxidasa se resume en un proceso de 3 etapas
as:
CCP + ROOH

CCP-compuesto I + ROH + H2O

CCP-compuesto I + 1e- + 1H+

CCP-compuesto II + 1e- + 1H+

CCP-compuesto II
CCP

CITOCROMO C PEROXIDASA cont..

Fe en estado
de oxidacin
formal IV

2 equivalentes
Hidroperxido
El CCP el hemo es frrico

Los estados de oxidacin son comprobados por

medidas de susceptibilidad magntica y
espectroscopia Mossbauer. Otro hecho sobresaliente
es que la CCP-compuesto 1, se comporta como un
radical, el electrn es tomado del anillo de la
porfirina: CCP-FeIV O
Este mecanismo esta propuesto tambin para las
peroxidasas, recordando que el citocromo c
peroxidasa produce agua al final, al igual que las
peroxidasas y las hidroxilos cloroperoxidasas

CITOCROMO C PEROXIDASA cont..

La citocromo C peroxidasa es un caso

interesante en que el radical no permanece
sobre la porfirina, sino que migra al triptofano
cercano.

Posee 2 veces el tamao de la mioglobina, con un

PM 50 kD. En general, el sitio hemo de la
peroxidasa esta protegido, con acceso del solvente
solo por el lado del hemo. El peroxido consigue un
sitio en el Fe, pero el sustrato organico solo se
enlaza por un lado del hemo. Asi que la
peroxidasa funciona como un oxidante de esfera
externa de las moleculas organicas

 Son las enzimas mas eficientes encontradas en la

clula
Cada molcula de catalasa puede descomponer
millones de molculas de H2O2 cada segundo.
Existe como tetrmeros de PM 60-75 kDa
Cada subunidad contiene un sitio activo hemo
sepultado dentro de la estructura el cual es
accesible a travs de canales hidrofbicos.
El in Fe, se encuentra al centro del grupo hemo
Son producidas por organismos aerbicos desde
las bacterias hasta el hombre.

http://www.ebi.ac.uk/interpro/potm/2004_9/Page1.htm sep/04

Catalasas continu

Son protenas conteniendo el grupo hemo

que realizan la reaccin: 2H2O2 2H2O + O2
Su papel proteger las clulas del efecto
toxico del H2O2
Es muy rgida, la estructura estable de la
catalasas es resistente a doblarse, por lo cual
es nica, es muy resistente al pH,
desnaturalizacin termal, y proteolisis que
otras enzimas.

Catalasa
Catalasa de Vaca

Catalasas continu

La catalasa realiza su rpida destruccin del H2O2

en 2 etapas donde el peroxido alternativamente
oxida y reduce el Fe hemo del sitio activo.
1.

El H2O2 se enlaza y se rompe. Un tomo de

oxgeno se extrae y se une al tomo de Fe y
el resto sale como agua. La

molcula de

H2O2 oxida el hemo a una especie oxy

frrica.
2.

Se enlaza una segunda molcula de H2O2, la

cual acta como un reductor para regenerar
la enzima,

esta tambin se rompe y los

pedazos se combinan con el O enlazado al Fe

y sale como agua y Oxigeno gas.

Algunas

catalasas

cofactor,

el

cual

contienen
funciona

NADPH

para

como

prevenir

la

formacin de un compuesto inactivo.

El otro papel de las catalasas: La
especies

oxigenadas

reactivas,

generacin
posiblemente

hidroperxidos, bajo la irradiacin UV.

Por esta va la luz puede detoxificar a travs de la
generacin de peroxido de hidrgeno, el cual
puede degradarse por la catalasa.
Aqu el NADPH juega el papel de proporcionar los
electrones necesarios para reducir el Oxigeno
molecular en la produccin de especies reactivas
oxigenadas.
La mayora del H2O2 producido durante el
metabolismo celular oxidativo viene del
rompimiento de una de las especies oxigenadas
reactivas mas dainas, conocida como el anin
radical superoxido (O2-)
El Superoxido es descompuesto por la superoxido
dismutasa a H2O2 y O2.

SUPEROXIDO DISMUTASA CONTI

Es una enzima de Cu y Zn que cataliza la

dismutacin del radical superoxido a oxigeno
molecular y peroxido, siendo esta actividad de
defensa crucial para la clula.

SOD-Cu

2+

SOD-Cu

1+

O 2

O2 +

SOD-Cu1+ + O2

2H+ SOD-Cu2+ + H2O2

Su PM = 32 kDa, cada monmero posee 151 aa

Por rayos X: 8 cadenas de hojas antiparalelas
plegadas

La SOD es de inters medico por ser agente

teraputico en enfermedades relacionadas con
stress y su papel en moderar el proceso de
envejecimiento

SUPEROXIDO DISMUTASA CONTI

El sitio activo de SOD de bovino, yace en la

base de una cavidad aguda de 15, formadas
por 2 rizos. Estos rizos contienen residuos
cargados,

los

cuales

facilitan

la

gua

electrosttica de la SOD al sitio activo.

El sitio activo de la forma oxidada, Cu (III), la
enzima consiste de 1 ion cobre y uno zinc
puentiados por un anillo imidazlico de la
histidica 61, un hecho unico en enzimas de esta
clase.
El in Cu esta coordinado por otras 3 histidinas
y una molcula de agua, mientras que el Zn
esta ligado a 2 histidinas adicionales y un cido
Aspartico.

SUPEROXIDO DISMUTASA CONTI

SUPEROXIDO DISMUTASA CONTI

Adicin del O2
acompaado por la
estabilizacin de la
Arginina distal con
enlace H

Toma de ion
peroxido para
su oxidacin
El imidazol puente se rompe
y se reforma dentro del ciclo.
La velocidad de rompimiento
corresponde a una vuelta
cataltica.

Perdida de O2 con
reduccin a Cu (I)

La coordinacin del N del anillo de histidina al Zn (II) baja

el pKa del otro tomo de N de 14 7-10,
consecuentemente el 2 atomo de N prefiere enlazarse al
proton en lugar del Cu(I), una preferencia que permite el
rompimiento del segundo puento de la 1 etapa del
mecanismo de la enzima. La reoxidacin de Cu(I) a Cu(II)
permite la formacin de nuevo del puente con transferencia
del H+ al ion peroxido, el cual sale como H2O2.

SUPEROXIDO DISMUTASA CONTI

El papel del Zn2+ en la SOD:

1.

ayudar a crear un gradiente de campo

elctrico que atrae el O dentro de la
2

cavidad de la SOD. El O2 y el H2O2 son

productos neutros de la reaccin de
desproporcionacin y difunden fuera

mientras que el O 2 aninico no lo puede

hacer.
2.

Conferir estabilidad termal a la protena.