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FERMENTACIÓN

INDUSTRIAL.

Proceso realizado en

un

fermentador o

biorreactor, mediante el cual determinados

sustratos que componen el medio de cultivo son

transformados por acción metabolitos y biomasa.

microbiana

en

La fermentación es un proceso de oxidación incompleto, siendo el producto final un compuesto orgánico. Estos productos finales son

los

que

caracterizan

fermentaciones.

los

diversos

tipos

de

Fermentación Aerobia:

  • OXÍGENO

Fermentación Anaerobia:

  • NITRÓGENO

Medios:

UPSTREAM

  • - M. Sintéticos: quimicamente definidos.

  • - M. Complejos: Origen animal o vegetal como peptonas, extracto de levadura, macerado de maíz, extracto de soja. Quimicamente indefinidos y de composición variable.

Componentes:

  • - Macronutrientes: Fuentes de C, N, S, P, K y Mg, en g/l.

  • - Micronutrientes: Elementos traza. Sales de Fe, Mn, Ca, Zn, Co, en mg/l.

  • - Factores de Crecimiento:vitaminas, aminoácidos, acidos grasos, etc.

Medio de Cultivo:

Conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los microorganismos.

Diversidad metabólica medios

Medio de Cultivo: Conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros componentes que crean las condiciones

Diversidad de

Esterilizacion: autoclave o filtración (termolábiles)

Constituyentes:

  • - Agar: Ag solidificante. Polisacárido de algas marinas. Las bacterias no lo degradan.

  • - Azúcares: Fuente de C, glucosa, lactosa, sacarosa.

  • - Extractos: Preparados de órganos o tejidos animales o vegetales, extracto de carne, levadura. Preparados con agua y calor

  • - Peptonas:Proteínas hidrolizadas, obtenidas por digestion química o enzimáticas de proteinas animalers o vegetales.

  • - Fluidos: Sangre, plasma o suero. Se añaden a otros medios.

  • - Amortiguadores: Sales para mentener el pH en rangos òptimos. Fosfátos de Na y K.

  • - Indicadores de pH: Indicadores acido-base añadidos para detectar el cambiuo de pH.

  • - Agentes Reductores: Sustancias para crear condiciones apropiadas. Cisteína, tioglicolato.

  • - Agentes Selectivos: A determinadas concentraciones seleccionan microorganismos. Cristal violeta, sales biliares.

Tipos de medios de cultivo.

Por su consistencia:

  • - Sólidos: Contienen agente gelificante (agar). Petri o Slant

  • - Líquidos: Caldos. Se preparan en tubos y matraces.

Por su composición:

  • - Medios Generales: Desarrollo de gran variedad de MO.

  • - Medios de Enriquecimiento: Favorecen el desarrollo de determinado grupo de MO.

  • - Medios Selectivos: Crecimiento de un tipo de MO e inhiben el desarrollo de los demás.

  • - Medios Diferenciales: Énfasis en alguna propiedad que un determinado MO posee.

Diseño del Medio

Elegir los componentes necesarios para lograr el crecimiento y formación de productos en el proceso.

Conocer los proceso y operaciones previos y conocer los mecanismos bioquímicos que regulan la formación de productos.

Requerimientos Nutricionales:

Tipo de metabolismo celular:

Autótrofos:

CO2

Algas, bacterias que obtienen C del

Heterótrofos:

Requieren compuestos orgánicos

como fuente de C. Condiciones de Cultivo:

Aerobio: oxigeno como aceptor de electrones Anaerobio: N, SO4, NO3 como aceptor de electrones.

Fuentes de nitrógeno:

Inorgánica u Orgánica, síntesis de proteínas, ácidos nucleicos, pared celular

Macronutrientes:

P y S en forma de PO4 y SO4, para formar ADN, ARN, , aminoácidos azufrados.

K y Mg, ligados al RNA. K actúa como coenzima y Mg es estabilizador de organelos y es cofactor.

Micronutrientes:

- Esenciales: Ca, Mn, Fe, Cop, Cu, Zn. - Poco esenciales: Na, Al, Si, Cl, Cr, Ni, Se, Mo Difíciles de cuantificar y sus requerimientos aumentan cuando el cultivo se somete a “stress”. Factores de crecimiento:

Aminoácidos, tiamina, riboflavina, niacina; la mayoría son constituyentes de coenzimas

Disponibilidad de los Componentes:

Componentes susceptibles de ser usados por la célula. Concentración de iones metálicos modificada por quelación, para controlar el fenómenos se usa agentes quelantes, EDTA.

Se debe tener en cuenta la naturaleza de los compuestos orgánicos que pueden actuar como ligandos y sobre todo del ion metálico considerado, es necesario controlar su concentración.

Materias Primas:

Se debe considerar costos, disponibilidad y estabilidad en su composición química.

Las materias primas fundamentales son las fuentes de C y N.

Formulación.

Se refiere a los aspectos cuantitativos de los medios.

Tener una aproximación a la composición de la biomasa del microorganismo. Una composición elemental en peso seco es:

  • - Carbono:

46 – 48%

  • - Nitrógeno: 7-12

  • - Fósforo:

  • - Azufre:

1 – 3

0.5 – 1

  • - Mg:

0.5 – 1

COMPONENTE

ELEMENTO/FUNCIO

MASA. gr

N

Glucosa

C, energía

22.7

NH4Cl

N

4.37

KH2PO4

P + K

1.13

MgSO4.7H2O

S + Mg

0.232

CaCl2.2H2O

Ca

0.011

FeSO4.7H2O

Fe

0.007

MnS.4H2O

Mn

0.002

ZnSO4.7H2O

Zn

0.002

CuSO4.5H2O

Cu

0.0004

CoCl2.6H2O

Co

0.0004

EDTA

Quelante

0.394

Agua destilada

 

1 ml

Composición de medio mínimo para Klebsiella aerogens

CINETICA DEL CRECIMIENTO MICROBIANO

Log X

5 6 4 3 2 1
5
6
4
3
2
1

T

Microbiología Industrial

Parte de la Microbiología que se ocupa de las aplicaciones industriales de los microorganismos.

También son los procesos industriales catalíticos basados en el uso de microorganismos.

Generalidades de la Fermentación.

Fermentación: Proceso realizado en un fermentador

o biorreactor, mediante el cual determinados sustratos que componen el medio de cultivo son

transformados

por

acción

metabolitos y biomasa.

microbiana

en

Microorganismo

Medio

Generalidades de la Fermentación. Fermentación: Proceso realizado en un fermentador o biorreactor, mediante el cual determinados
Generalidades de la Fermentación. Fermentación: Proceso realizado en un fermentador o biorreactor, mediante el cual determinados

Aumenta concentración.

Se va modificando

Resultado…

..

Formación de de nuevos productos

como consecuencia del metabolismo.

Influencia de los Efectores

Comportamiento de microorganismo es el resultado de la interacción entre el MO y el medio ambiente por los efectores: internos y externos.

Efectores Internos --------- Dotación genética

Efectores Externos -------- Expresión fenotípica

METABOLITOS PRIMARIOS: moléculas de bajo peso

molecular que intervienen, como productos finales o intermediarios, en las distintas rutas metabólicas. Los más importantes desde el punto de vista industrial son los aminoácidos, nucleótidos, vitaminas, ácidos orgánicos y alcoholes.

METABOLITOS SECUNDARIOS: moléculas sintetizadas por determinados microorganismos, normalmente en una fase tardía de su ciclo de crecimiento. antibióticos, ciertas toxinas (micotoxinas), alcaloides (ácido lisérgico), factores de crecimiento vegetal (giberelinas) y pigmentos.

Efectores Internos (Dotación genética)

Efectores

Químicos

Efectores Internos (Dotación genética) Efectores Químicos (nutrientes) Expresión Producto (metabolitos) Efectores Físicos (temperatura, agitación, viscosidad, etc.)

(nutrientes)

Expresión

Efectores Internos (Dotación genética) Efectores Químicos (nutrientes) Expresión Producto (metabolitos) Efectores Físicos (temperatura, agitación, viscosidad, etc.)

Producto

(metabolitos)

Efectores Físicos (temperatura, agitación, viscosidad, etc.)

Selección, Mantenimiento y Mejoramiento de MO.

SELECCIÓN:

  • - Cepa genéticamente estable.

  • - Velocidad de crecimiento alta.

  • - Cepa libre de contaminantes

  • - Requerimientos nutricionales bajos.

  • - Fácil conservación por periodos largos de tiempo

  • - Fermentación completa en corto tiempo.

  • - Alto rendimiento de producto y de fácil extracción

AISLAMIENTO:

  • a) A. Directo: El medio debe permitir una expresión máxima del material genético. Por ejm. Aislamiento en función de halos de inhibición

  • b) Enriquecimiento del cultivo: Consiste en incrementar en una población mixta el número de organismos de interés. Realizar subcultivos y evaluar la velocidad específica de crecimiento (µ)

µµ

AISLAMIENTO: a) A. Directo: El medio debe permitir una expresión máxima del material genético. Por ejm.

S

Porque y para que conservar los cultivos?

El cultivo

(cepa microbiana o viral, línea celular,

etc), es el elemento vital de la investigación o

producción industrial

• Conservar

implica

mantener

la

viabilidad

y

propiedades genéticas del cultivo durante un determinado período de tiempo • Consecuencias de una adecuada conservación:

estabilidad de las cepas de producción, pureza,

reproductibilidad de la investigación. Reposición

Conservación de cultivos

Conservación de cultivos • Espacio físico e infraestrutura • Personal capacitado • Recursos económicos Inversión Daño

• Espacio físico e infraestrutura • Personal capacitado • Recursos económicos

Conservación de cultivos • Espacio físico e infraestrutura • Personal capacitado • Recursos económicos Inversión Daño
Inversión Daño económico Pérdida del cultivo
Inversión
Daño económico
Pérdida del cultivo
Conservación de cultivos • Espacio físico e infraestrutura • Personal capacitado • Recursos económicos Inversión Daño

Potencial limitación de los métodos para conservar

Potenciales ventajas del depósito de material biológico Patente Conveniencia centralizado logística del almacenamiento Seguridad de abastecimiento

Potenciales ventajas del depósito de material biológico

Potenciales ventajas del depósito de material biológico Patente Conveniencia centralizado logística del almacenamiento Seguridad de abastecimiento
  • Patente

  • Conveniencia

centralizado

logística

del almacenamiento

  • Seguridad

de

abastecimiento

pérdidas eventuales

del material ante

  • Adecuada información de los riesgos ambientales y para la salud

  • Seguridad en la conservación

Esquema del proceso de conservación y sus etapas críticas

Aislamiento primario

 
Microorganismo viable (genética/fenotípo) cultivo
Microorganismo viable (genética/fenotípo) cultivo
 

Microorganismo

viable

(genética/fenotípo)

Microorganismo viable (genética/fenotípo) cultivo
Microorganismo viable (genética/fenotípo) cultivo
 
 

cultivo

Microorganismo viable (genética/fenotípo) cultivo
Microorganismo viable (genética/fenotípo) cultivo

Tipo de propágulo Estado fisiológico

1
1
3
3

Reactivación

 
Almacenamiento
Almacenamiento

Almacenamiento

 
Almacenamiento
Almacenamiento
2
2
  • Proceso de conservación

Esquema del proceso de conservación y sus etapas críticas Aislamiento primario Microorganismo viable (genética/fenotípo) cultivo Tipo

Métodos de conservación de cultivos

1. con crecimiento transferencia seriada 2. con metabolismo limitado agua destilada bajo aceite mineral (control por
1. con crecimiento
transferencia seriada
2. con metabolismo limitado
agua destilada
bajo aceite mineral (control por O 2 )
3. con metabolismo detenido
3.1
Congelamiento (crioconservación)
3.2
Deshidratación
L-drying: secado desde la fase líquida,
silicagel, celulosa (papel), suelo, perlas de porcelana
Liofilización (freeze-drying)

CRIOCONSERVACIÓN

  • Crioconservación es la conservación de material biológico a muy bajas temperaturas

  • Rango -20 ºC a -196 ºC (nitrógeno líquido)

El

nitrógeno

líquido

es

la

temperatura

práctica mas baja

disponible.

A

la

temperatura

de

equilibrio,

la

difusión

molecular

es

extremadamente

lenta

y

la

probablilidad

de

que

ocurran

reacciones

químicas es prácticamente nula

CRIOINJURIA

  • El proceso de congelamiento y descongelamiento produce cambios en las céluas que pueden resultar letales

  • Los procesos perjudiciales son: formación de cristales de hielo, exosmósis, aumento de la solubilidad de gases, deshidratación, aumento de la concentración de osmolitos, disminución del pH, alteraciones de la actividad enzimática, acumulación de metabolitos, incremento del contacto entre moléculas, ruptura de puentes de H, distorsión de macromoléculas, solidificación, pérdidad de la integridad de membranas, ruptura de emulsiones, etc

  • La formación de hielo intra o extracelular es quizás el evento mas crítico de la crioinjuria.

INJURIA POR CONGELAMIENTO

Congelamiento lento (efecto soluto)

exosmósis

INJURIA POR CONGELAMIENTO Congelamiento lento (efecto soluto) exosmósis Hielo extracelular shrinkage (efecto soluto) Congelamiento rápido (

Hielo extracelular

INJURIA POR CONGELAMIENTO Congelamiento lento (efecto soluto) exosmósis Hielo extracelular shrinkage (efecto soluto) Congelamiento rápido (

shrinkage (efecto soluto)

INJURIA POR CONGELAMIENTO Congelamiento lento (efecto soluto) exosmósis Hielo extracelular shrinkage (efecto soluto) Congelamiento rápido (

Congelamiento rápido ( efecto hielo )

INJURIA POR CONGELAMIENTO Congelamiento lento (efecto soluto) exosmósis Hielo extracelular shrinkage (efecto soluto) Congelamiento rápido (
INJURIA POR CONGELAMIENTO Congelamiento lento (efecto soluto) exosmósis Hielo extracelular shrinkage (efecto soluto) Congelamiento rápido (

Hielo intracelular

INJURIA POR CONGELAMIENTO Congelamiento lento (efecto soluto) exosmósis Hielo extracelular shrinkage (efecto soluto) Congelamiento rápido (

Daño mecánico

CRIOPROTECCIÓN

  • Control de la velocidad de enfriamiento Balance óptimo entre el efecto soluto y la formación e hielo. En la práctica es aceptable 10 ºC/min. El descongelamiento debe ser lo mas rápido posible

  • Incorporación de crioprotectores (CPs) CPs que permean la pared y membrana celular Me 2 SO ( Tp < 30 min), Glicerol, Metanol Cps que permean la pared pero no la membrana mono y disacáridos, aminoácidos, polímeros de bajo PM(PEG 600-

1000)

Cps no permeantes

Polímeros de alto PM: proteínas, polisacáridos, PVP

  • El tipo de protección que ejerce el CPs depende de su permeabilidad

  • Todos los CPs son altamente hidrofílicos

  • CPs que permean totalmente ligan agua intracelular y reducen el efecto soluto

  • CPs semipermeables forman entre la pared y la membrana celular una capa que proteje la célula del daño mecánico

  • CPs no permeables se adsorben en la superficie celular incrementando la viscosidad local lo cual manteniendo el hielo en forma amorfa evitando daño mecánico

Empleo de CPs en criopreservación

  • Frecuencia de uso de CPs

Virus: Me 2 SO, Suero sanguíneo, Sacarosa Glicerol Bacterias: Me 2 SO, Suero sanguíneo, Sacarosa, Glicerol, leche descremada Hongos: Me 2 SO, Glicerol Algas: Me 2 SO, metanol, Glicerol, PVP Protozoarios: Me 2 SO, Suero sanguíneo, Glicerol, Sangre desfibrinada

  • Rango de concentraciones de CPs

Me 2 SO: 1-32 % (media 10 %) Glicerol: 5-50 % Sacarosa: 1-68 % (media 10 %) Metanol: 2-10 % (media 5 %)

  • Tiempos de contacto CPs-célula:

CONSERVACIÓN POR DESHIDRATACIÓN

  • Este método implica la remoción de agua de las células final típica: 0.06-5.0 % de agua).

(humedad

  • La deshidratación puede llevarse a cabo desde la fase líquida (L- drying) o por sublimación desde el estado congelado (liofilización)

  • Las pérdida

de

viabilidad

durante

la

deshidratación

es

principalmente atribuida a alteraciones de la membrana celular.

  • Las células deshidratadas son susceptibles al deterioro causado por oxígeno

  • El deterioro de las células durante la deshidratación puede ser controlado por el agregado de aditivos. Algunos forman una matriz amorfa que dispersa los componentes tóxicos que la célula puede liberar durante el secado. Otro protectores interactúan con las membranas, estabilizando su estructura en el estado anhidro

  • Los aditivos mas comunes son: leche descremada, aminoácidos (glutamato) y azúcares (sacarosa, trealosa)

Principios de la liofilización

muestra + protectores en ampollas

vacío 30-60 militorrs

manifold
manifold

trampa de agua

Principios de la liofilización muestra + protectores en ampollas vacío 30-60 militorrs manifold trampa de agua
Principios de la liofilización muestra + protectores en ampollas vacío 30-60 militorrs manifold trampa de agua
-70 ºC  - 5 ºC congelamiento etilenglicol + hielo seco (- 40 ºC) etanol +
-70 ºC
- 5 ºC
congelamiento
etilenglicol + hielo seco (- 40 ºC)
etanol + hielo seco (-70 ºC)

Bomba de vacío de aceite

La muestra colocada en una ampolla estéril con un plug de algodón, se congela entre - 40 ºC y -70 ºC. Una vez colocada la muestra en el manifold del equipo se comienza con el vacío y se retira el enfriamiento. La temperatuyra sube hasta -5 ºC. A esta temperatura y con un vacío entre 30 y 60 militorrs, el secado es rápido. El tiempo es variable y depende del volumen de muestra. Al finalizar el proceso se sella la ampolla al vacío

L-Drying

Muestra
Muestra
L-Drying Muestra Impregnación en soporte Secado sobre silicagel perlas de porcelana, papel de filtro, suelo Preservación

Impregnación en

soporte

L-Drying Muestra Impregnación en soporte Secado sobre silicagel perlas de porcelana, papel de filtro, suelo Preservación

Secado sobre silicagel

perlas de porcelana, papel de filtro, suelo
perlas de porcelana, papel de filtro, suelo

Preservación en suelo (sand loam) para microorganismos filamentosos

  • Secar suelo 6 hs a 150 ºC

  • Tamizar suelo seco mesh 10 y 20. Conservar en recipiente tapados

  • Colocar en tubos Pyrex de 13 x 100 mm suelo seco tamizado hasta una altura de 20 mm y tapar con plug de algodón recubierto de gasa

  • Autoclavar 60 min 3 días consecutivos y secar

  • Incorporar 1 ml de suspensión de esporos en agua ( no emplear caldo de cultivo)

  • Secar a temp ambiente (24 ºC) un mes

  • Conservar en frío

Consideraciones para la preservación de cultivos

  • Debe definirse claramente el medio de cultivo y el tipo de agua (destilada, deionizada, corriente) empleados.

  • Tener en cuenta el tipo de cultivo (agarizado, líquido, sólido), el estado fisiológico de las células al momento de la cosecha (cultivos líquidos cosechados en fase estacionaria suelen ser mas resistentes que los de fase logarítmica), si se emplean células con medio ó lavadas. Determinar si el agente protector es tóxico.

  • Definir condiciones de proceso: concentración de células, tiempo de secado, agregado de protectores

  • En procesos industriales la viabilidad no es lo único importante. La cepa debe mantener sus propiedades productivas. Desarrollar un test de producción o bioensayo

  • Durante

la

recuperación

de

la

especie

conservada

deben

determinarse:

viabilidad,

pureza,

morfología,

formación

de

producto,

rasgos

recombinates

(plásmidos,

resistencia

a

antibióticos, etc).

Comparación de algunos métodos de preservación

Método

Almacenamient o (años)

Ventajas

Desventajas

Agar

0.5-2

Simple, bajo costo, equipamiento requerido bajo

Secado del agar, baja estabilidad genética, riesgo contaminación

Aceite mineral

2-20

bajo costo, equipamiento requerido bajo

trabajo moderado, baja estabilidad genética

Congelamiento

4-5

Equipamiento requerido bajo, buena estabilidad genética

Requiere protectores, Alto costo de freezer (-80ºC). Células pueden ser sensibles al O2

N líquido

infinito

Preparación rápida, buena estabilidad genética

Suministro regular de N líquido

Liofilización

15-20

Bajo riesgo de contaminación, buena a regular estabilidad genética

Alto costo de equipamiento

Agua

1-5

Simple , bajo costo, bajo equipamiento requerido

Estabilidad genética regular

L-drying

3-10

estabilidad genética?

Simple , bajo costo, bajo equipamiento requerido

BIBLIOGRAFIA:

• Texto Base:

CRUEGER, Wulf. CRUEGER, Anneliese. Manual de Microbiología Industrial. Editorial Acribia. Tercera Edición. Zaragoza, 2000.

• Textos Complementarios:

PRESCOTT, Lansign. HARLEY,John. KLEIN, Donald. Microbiología. McGraw-Hill. Cuarta Edición.Madrid, 1999.

• RHODES,Alan. FLETCHER, Derek. Principios de Microbiología Industrial. Editorial Acribia. Zaragoza 1994.

• SCRAGG, Alan. Biotecnología para Ingenieros. Editorial Limusa. Primera Edición. México, 1997.

• www.ncbi.nlm.nih.gov (NCBI Data Base) • www.ejbiotechnology.info (Electronic Journal of Biotechnology)

Que es….

Parte de la Microbiología que se ocupa de las aplicaciones industriales de los microorganismos (bienes y/o servicios).

Son aquellos procesos industriales catalíticos basados en el uso de microorganismos.

Microbiología industrial

Que es…. Parte de la Microbiología que se ocupa de las aplicaciones industriales de los microorganismos
Que es…. Parte de la Microbiología que se ocupa de las aplicaciones industriales de los microorganismos

Biotecnología Industrial

Que es…. Parte de la Microbiología que se ocupa de las aplicaciones industriales de los microorganismos

AREA

MICROORGANISMO

S

Salud

Clostridium, Penicillium, Bacillus… ..

 

Saccharomyces,

Alimentos

Lactobacillus,

Penicillium

Producción

Rhizobium, Giberella

Vegetal

Producción

Candida, Aspergillus,

Animal

Salmonella….

Insumos

Xanthomonas,

Industriales

Saccharomyces,

Clostridium…

Minería

Acidithiobacillus, Pseudomonas… ..

Servicios

Aerobios sp, anaerobios sp…

PRODUCTOS

Vacunas, vitaminas, penicilina - antibióticos, ….

Levadura, yoghurt, vino, cerveza, vinagre….

Bioinsecticidas, ácido giberélico, inoculantes Proteína unicelular, vacunas

Etanol, enzimas, acid. Orgánicos, biopolímeros, acetona.

Biolixiviación, biooxidación

Biorremediación de efluentes

Libro del Génesis (9: 20,21):

“Noé

se

dedicó a la labranza

y plantó

una viña.

Bebió del vino, se embriagó…”

6000 a.C.: Los sumerios y babilonios usaban levaduras para fabricar cerveza.

4000 a.C.: Los egipcios descubrieron la manera de fermentar pan con levadura.

Siglo XIV : Destilación de bebidas alcohólicas. Uso de bacterias de ácido acético para fabricar vinagre, de bacterias de ácido láctico para conservar la leche (yoghurt, kefir).

Siglo XVII: Anthony von Leeuwenhoek (1632-1723) descubre el mundo microbiano con sus microscopios primitivos.

Siglo XIX: El desarrollo técnico de los

microscopios permite demostrar el origen de los microbios y vencer la creencia de la “generación espontánea”.

Observaciones y recetas sobre la “generación espontánea” ...

Ambroise Paré (1517-1590), el más célebre cirujano de su siglo,

escribe: “Hallándome en una viña de mi propiedad, próxima al pueblo de Meudon, hice romper una enorme cantidad de grandes piedras sólidas. Dentro de una de ellas se encontró un grueso sapo vivo, sin que hubiera en la piedra la menor apariencia de abertura…

…Me maravilló el hecho de que este animal hubiese podido nacer, crecer y vivir allí. Pero el cantero me dijo que no había por qué asombrarse, pues varias veces había hallado animales de ésta y de otras clases en lo más recóndito de las piedras, sin que existiese el menor indicio de una abertura. Se puede explicar así el nacimiento y la vida de estos animales: son engendrados a partir de alguna sustancia húmeda de las piedras, cuya humedad, al entrar en putrefacción, produce tales seres.”

Van Helmont (1577-1644), el más grande fisiólogo de la época, sugiere lo

siguientes para obtener ratones: un vaso lleno de trigo se cubre con una camisa sucia, preferentemente de mujer. “Un fermento originado en la camisa y transformado por el olor de los granos, convierte el trigo mismo en ratones.” Esta metamorfosis dura cerca de veintiún días, o sea el tiempo de gestación de ratón y nuestro naturalista se asombre de su notable rapidez…

…”Ello,

nos

dice,

es

tanto

más

admirable

cuanto

que

los

ratones

originados por el trigo y la camisa no

son pequeños ni lactantes,

ni

minúsculos,

Francesco

ni

Redi

deformes,

(1626-1697):

sino

muy

bien formados y pueden saltar.”

Médico italiano demostró que los

gusanos de la carne son larvas de

si

mosca y

que no aparecen

Lázaro Spallanzani (1729-1799): Naturalista

carne se guarda bien tapada.

italiano, demostró que los microbios son

la

transportados por el aire; los mismos no invaden los frascos cerrados

herméticamente.

Nicolas-Francois Appert (1750-1841):

Desarrolla los primeros procedimientos

de enlatado.

Louis Pasteur (1822-1895): Sentó las

bases de la futura industria

biotecnológica al demostrar que todos los

procesos de fermentación eran el

Edward resultado Buchner de la (1860-1917): actividad microbiana. Descubre,

dentro de las células microbianas, las

sustancias vitales responsables de todas

las transformaciones químicas: las

Hasta

enzimas.

la primera guerra mundial,

apenas progresó la idea de utilizar

bacterias y levaduras para fabricar otra

cosa que no fuera alcohol.

Sin

embargo,

las

impuestas

durante

restricciones

el

conflicto

anunciaron lo que puede llamarse como

Hasta la primera guerra mundial, apenas progresó la idea de utilizar bacterias y levaduras para fabricar otra cosa que no fuera alcohol.

Sin embargo, las restricciones impuestas durante el conflicto anunciaron lo que puede llamarse como “segunda era biotecnológica.”

La Guerra Mundial (1914-1918) supuso demandas biotecnológicas:

Proceso Neuberg para producir glicerol (para nitroglicerina) mediante la “fermentación dirigida” de Saccharomyces cerevisiae. Agregando álcali y bisulfito de sodio al depósito de fermentación alcohólica se fomentaba la producción de glicerol.

Proceso Weizmann, usando Clostridium acetobutylicum, para la producción de disolventes como la acetona (fabricación de cordita).

Los descubrimientos de Pasteur, Robert Koch (1843-1910) y Alexander Fleming (1928) revolucionaron el tratamiento de las enfermedades infecciosas con el descubrimiento de los antibióticos.

Durante la Segunda Guerra Mundial comienza la tercera era biotecnológica, por la necesidad de contar con ciertos medicamentos para que las víctimas no murieran de sepsis bacteriana.

“Cuarta era biotecnológica” comienza a principios de la década de 1970, con el advenimiento de la Ingeniería Genética.

El descubrimiento de los sistemas de restricción y modificación en bacterias y la aplicación de las endonucleasas.

Los trabajos de Milstein y Kohler sobre la formación de hibridomas con la posterior utilización para la producción de anticuerpos monoclonales (1975).

Un hito ocurrió en 1982 cuando

la compañía Eli Lilly consiguió la

aprobación de la (F.D.A) Food

and Drug Administration de los

Estados Unidos de

Norteamérica para la utilización

de “insulina humana” clonada y

producida en Escherichia coli. A

esto siguieron los interferones,

hormonas de crecimiento

humana y bovina, el antígeno

de superficie del virus de la

hepatitis B, etc.

El desarrollo de un proceso de producción a gran escala (BIOPROCESOS), en forma exitosa, es el resultado de acelerar e intensificar un concepto original, generalmente un procedimiento de laboratorio o a pequeña escala.

La Ingeniería Genética actualmente permite aislar una cierta característica (contenida en uno o varios genes), y transferirla a otro organismo. Esto es lo que se conoce como biotecnología moderna.

La biotecnología médica permite el cultivo de tejidos in vitro y su implante en sustitución de tejidos dañados.

La biotecnología industrial permite el mejoramiento de técnicas de fermentación para optimizar la producción de antibióticos, enzimas, ácidos orgánicos, alimentos, nuevos materiales.

La biotecnología agrícola permite obtener plantas tolerantes a herbicidas, resistentes a insectos y enfermedades, así como plantas que pueden sobrevivir mejor a suelos difíciles (secos o salinos).

La biotecnología ambiental permite adaptar especies microbianas o vegetales a hábitats contaminadas para permitir la degradación de metales pesados, hidrocarburos, polímeros, recuperación de metales.

La biotecnología animal y vegetal permite la generación de micro

fábricas

de

sustancias

de

interés

como

hormonas, enzimas, pigmentos.

productos

metabólicos,

El desarrollo

Microbiológico /

Biotecnológico se centra en

tres aspectos

fundamentales:

Desarrollo de los organismos.

Desarrollo de medios de cultivo.

Ingeniería de la fermentación.