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Tinciones

Glosario

Afinidad: Parecido, relacin o analoga de una cosa con otra.


Azul metileno: Sustancia cristalina verde-azulada que se
utiliza como tinte histolgico e indicador de laboratorio
Fucsina: significacolorante rojo derivado de la anilina, que
se emplea en tinciones biolgicas.
Gram : Mtodo de tincin descrito por primera vez por el
mdico dans Christian Gram en 1884 utilizado para teir
paredes bacterianas y que permite diferenciar los dos
grandes grupos bacterianos: las bacterias Gram-positivas y
las Gram-negativas.
Hematoxilina: Se utiliza en histologa para teir los
componentes aninicos de los tejidos, a los que da una
coloracin violeta

Concepto

Es una tcnica en los laboratorios que


nos permite estudiar por medios de
observaciones a microorganismos en
funcin de la capacidad para retener o
no determinadas sustancias colorantes,
dependiendo de la carga de la clula y
distintos colorantes que se vallan a
emplear. Las tinciones pueden ser
simples y diferenciales.

Tinciones

Definicin y detalles

Simples

Teido de los microorganismos aplicando una solucin


colorante pueden ser + o -

Positivas

Colorantes bsicos con afinidad hacia los constituyentes


celulares combinndose con el citoplasma se utiliza ( azul
metileno, Fucsina B, Cristal violeta

Azul
metileno +

Bactericida, es de naturaleza bsica tie el interior de la


clula

Fucsina
bsica +

Colorea totalmente a la bacteria por su poder catinico


unindose a la estructura bacteriana

Cristal
violeta +

Tiene una afinidad bacteriana compuesta por diferentes


cargas que permiten la visualizacin mas sencilla

Negativas

tien el entorno donde se sitan las clulas bacterianas


Los mas utilizados : tinta China y colorantes acidos

Tinta China Permite observar por lo general Cryptococcus en LCR.


y fucsina
Y la fucsina permite ver el fondo de la celula por tener una

Tinciones

Definicin y detalles

Compuesta Tinciones que se usan para diferencia un grupo


s
bacteriano de otro por el hecho de la diferencia de
composicin qumica.
Gram

Ayuda a determinar rpidamente caractersticas


morfolgicas y la calidad adecuada del cultivo

hematoxili
na- frrica

Detecta e identifica protozoos fecales.

Wright
Giemsa

Esta tcnica esta formado por tintes neutros bsicos y


cidos (azul metileno, y eosina) ampliando la gama de
colores en el citoplasma detecta: parsitos, virus etc.

Acidorresis Procedimiento utilizado para teir un pequeo grupo


tente
que no se tie con facilidad ej.: mycobacterias
ZiehlNeelsen

Los microorganismos se tien con carbolfucsina bsica


y resisten la decoloracin con soluciones acido-base. Y
tambin tien miycobacterias.

kinyoun

Tincin acidorresistente al frio (no requieren


calentamiento). Basada en el mismo principio que la
tincin de Ziehl-Neelsen.

Color - las bacterias pueden ser "Gram positivas" (color prpura) o "Gram
negativas" (color rosado)

Mycobacterium tuberculosis|M.
tuberculosis y Mycobacterium marinum|
M. marinum tincin de Ziehl-Neelsen

Tincion negativa :
coloracin alrededor de la
celula

Tincin

Colorantes bsicos: consisten de


cationes teidos con un anin incoloro
adems tien clulas bacterianas de
manera uniforme ej: azul metileno

Colorantes cidos: consisten de


cationes teidos con un anin con color
ej: eosinato de sodio

Tincin de Gram
Procedimientos de la tincin de Gram:
1- se aplica colorante bsico de violeta genciana
2- se aplica una solucin de yodo (las bacterias
se tien de azul)
3- luego se trata con alcohol
* Las clulas Gram + conservan el complejo
violeta de genciana-yodo adquieren un
color azul y las Gram se decoloran por
completo con la adicin de alcohol

4- se aplica el colorante Rojo safranina


*las clulas Gram - decoloradas
adquieren un color contrastante; y las
Gram + un color violeta laceo

Tincin Acido-resistente
(micobacterias y antimicetos
relacionados

Las bacterias de este tipo son aquellas


que conservan carbolfucsina (tirosina
disuelta en mezcla agua-alcohol-fenol)
incluso cuando ah decoloracin de
acido clorhdrico en alcohol.
1- un frotis de clulas sobre una
laminilla se cubre con carbolfucsina y
se calienta en bao mara
2- se lleva a cabo la decoloracin con la
mezcla acido alcohol
3- y se aplica la tincin contraste
* las Bacterias acido resistente
adquieren un color rojizo y las
otras clulas adquieren el color de
segundo colorante

Tincin Negativa

Este Este procedimiento


consiste en la atencin del
entorno con un colorante
cido, dejando a las clulas
incoloras. El colorante
negro de nigrosina (tinta
china) se utiliza a menudo.
Dicho mtodo se emplea
para aquellas clulas o
estructuras difciles de
teir en forma directa

Tincin de los flagelos


Los flagelos son demasiado
delgados (12 a 30 nm de
dimetro) para que sean visibles
en el microscopio de luz. Sin
embargo, su presencia y
distribucin pueden demostrarse
al tratar las clulas con una
suspensin coloidal inestable de
sales de cido tnico, lo que
causa la precipitacin intensa
sobre las paredes celulares y
flagelos. se incrementa a un
tamao tal que las tinciones
subsiguientes con fucsina bsica
hacen visibles a los flagelos en la
microscopia de luz.

Tincin de la capsula
La presencia de la cpsula por lo
comn se demuestra por
procedimientos de tincin
negativa. Uno de estos mtodos
de tincin de la cpsula
(mtodo de Welch) implica el
tratamiento con solucin de
Violeta de genciana caliente
seguido de un lavado con
solucin De sulfato de cobre. Este
ltimo se utiliza para eliminar el
exceso de Colorante porque las
tcnicas convencionales de
lavado con agua Causaran la
disolucin de la cpsula.

Tincin de nucletidos

Los nucletidos se pueden teir con la


tincin de Feulgen, un mtodo
especfico para el DNA.

Tincin de esporas
La pared de la espora es
relativamente impermeable,
pero puede lograrse que el
colorante penetre la espora
mediante el calentamiento de la
preparacin. La misma
impermeabilidad que sirve para
evitar la decoloracin de la
espora despus de un
tratamiento con alcohol es
suficiente para Decolorar clulas
vegetales. Ms tarde puede
aplicarse un segundo colorante.
Las esporas a menudo se tien
con verde de malaquita o
carbolfucsina