Tecnicas

basicas e
intrumentale
s
Grupo # 11

Termociclado
r en tiempo
real
2015

Que es un termociclador
en
tiempo
real
?
Es un aparato usado en Biologa
Molecular que permite realizar
los
ciclos
de
temperaturas
necesarios para una
reaccin
en cadena de la polimerasa de
amplificacin de ADN o para
reacciones de secuencia con el
mtodo de sangre.

TITLE

Para que me sirve el

temporalizador en
tiempo real?
Reaccion en cadena de polimerasa
Esta tcnica se fundamenta en la
propiedad natural de los ADN
polimerasas para replicar hebras de
ADN, para lo cual se emplean ciclos
de altas y bajas temperaturas
alternadas para separar las hebras
de ADN recin formadas entre s tras
cada fase de replicacin

Este sistema incluye dos

componentes
Marcador
es
fluoresce
ntes
Genricos
Especifico

Elementos
pticos

TITLE

ventajas y
desventajas
EN TIEMPO REAL
Ventajas :
-Tiene alta precision y exactitud
-Reduce las posibilidades de
contaminacion
-Alta especificidad
Desventajas:
-presenta un alto costo, ya que los
capilares y otros materiales son
especficos para este sistema, y
bastante caros

EN PUNTO FINAL
Ventajas:
-Fcil uso
-Resultados consistentes : Su diseo robusto
asegura una corrida efectiva y consistente.
- Permite optimizar el ensayo de la reaccin en
cadena de la polimerasa
Desventajas:
--para llevarla a cabo adecuadamente y sin errores,
se requiere de una cuidadosa optimizacin del
proceso.
--no permite una adecuada cuantificacin de la
muestra

Interpretacion de resultados
El resultado en una reaccin en cadena de la polimerasa a tiempo real
se visualiza en un grafico de amplificacin en el que se expresa la
fluorescencia leda por el termociclador en el eje de las ordenadas y el
numero de ciclos de la reaccin en cadena de la polimerasa en el eje
de las abscisas .

consta de una fase inicial donde la produccin de fluorescencia

(ADNproducto) est por debajo del nivel de deteccin del
termociclador, una segunda fase en laque se da
unincrementodelafluorescencia,elcualesenformaexponencialen

suinicio,yunatercerafase(plateau)dondefinalizalareaccinysee

Interpretacion de
resultados

Ntesequelascurvasdeamplificacinpresent
anunaformadiferenteperoqueelvalorumbra
leselmismoenlosdosgrficos.

Equipo de
termociclador en
tiempo real y
funcionamiento

Funcionamiento
del equipo:
El

El software ajusta
automticamente
las ramp rates
segn los
volmenes de
muestras.

La tapa caliente
automtica
proporciona
temperatura y presin
constante. La tapa
alcanza los 110C.

Toda la informacin se
guarda
automticamente
hasta 48 horas si hay
un fallo de
electricidad durante la
reaccin.

Si existe un exceso de
temperatura una funcin
automtica realiza un
aviso acstico y el
termociclador se
apagar
automticamente.

Cuidados que
debemos considerar
No intente repararlo usted mismo

Limpie los pocillos con un hisopo humedecido con

agua y 95% etanol. Si usa hipoclorito sdico, lave los
pocillos con agua despus de eliminar todas las trazas
que tenga.

Utilice siempre componentes y

repuestos originales
El termociclador dispone de un cable de red
Schuko; ste debe conectarse a una toma de
corriente
quedel
est
conectada
a tierra
Para
la limpieza
equipo
recomendamos
se
utilice un trapo libre de pelusa humedecido con
agua jabonosa que no contenga productos

conclusin
Termocic
lador a
tiempo
real

Cuidado
s
adecuad
os

Pruebas
rapidas
y
confiable
s

Bibliografia
Bustin,S.A. 2005a. Real-Time PCR. In: Encyclopedia of Diagnostic
Genomics and Proteomics M.Podda & J.Fuchs, editors. Marcel
Dekker.New York, p. 1131-1135
burgos, C. (04 de 07 de 2013). PCR en tiempo real: la nueva era de la
informacin gentica. Recuperado el 20 de marzo de 2015, de http://
www.monografias.com/trabajos64/pcr-tiempo-real/pcr-tiempo-real2.shtml
Nahita. (1 de Abril de 2008). AUXILAB S.L. Recuperado el 20 de Marzo de
2015, de http://
www.auxilab.es/documentos/manuales/equipos/Termocicla/A5_50604xxx
.pdf

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