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E. coli
Medio definido
Medio Complejo
K2HPO4
7g
Glucosa
15 g
KH2PO4
2g
Extracto de
levadura
5g
(NH4)2SO4
1g
Peptona
5g
MgSO4
0.1 g
K2HPO4
2g
CaCl2
0.02 g
Agua destilada
1000 ml
Glucosa
4-10 g
pH
2-10 g
Agua destilada
1000 ml
pH
Medios diferenciales
Son aquellos destinados a facilitar la
discriminacin de microorganismos de una
mezcla por sus propiedades diferenciales de
crecimiento en dichos medios.
contienen indicadores de productos
derivados de la actividad metablica de los
organismos sobre algunos de los
componentes del medio.
Ej.: Agar base rojo fenol utilizado para detectar
fermentacin de carbohidratos.
Medios de mantenimiento
Suelen ser distintos a los de crecimiento
ptimo ya que el crecimiento y prolfico
suele ocasionar la muerte rpida de las
clulas.
Ej. Aadir glucosa y utilizarla los
microorganismos producen cidos,
acidificndose el medio por lo que es
preferible no utilizar glucosa en los medios
de mantenimiento
Dilucin en serie
Tipo de microorganismo
10-1 a 10-3
Hongos
10-4 a 10-6
Levaduras
10-7 a 10-10
Bacterias
Mantenimiento y preservacin de
cultivos puros.
Resiembra peridica en medios frescos.
Depende de el medio de cultivo
Temperatura propia para mantener los cultivos
El tiempo de resiembra.
CONTROL
MICROBIANO
Llama directa
Consiste en colocar el material directamente al fuego
hasta que ste se ponga al rojo vivo. De esta forma
se queman los contaminantes hasta reducirlos a
cenizas.
microbiologa para esterilizar el asa con la llama del
mechero.
.
Incineracin
El material a esterilizar se coloca en cmaras
especiales que alcanzan elevadas
temperaturas. Con este mtodo se queman
los contaminantes hasta reducirlos a
cenizas.
Es una forma efectiva de esterilizar el
material contaminado a descartar tales
como bolsas, papel, uniformes desechables,
cadveres de animales,
CALOR HMEDO
Ventajas
Rpido calentamiento y penetracin
Destruccin de bacterias y esporas en corto
tiempo
No deja residuos txicos
Hay un bajo deterioro del material expuesto
Econmico
Desventajas
No permite esterilizar soluciones que
formen emulsiones con el agua
Es corrosivo sobre ciertos instrumentos
metlicos
Agua en ebullicin.
El efecto letal aumentar si se le adiciona
carbonato de sodio al 2% o detergentes,
las esporas que son resistentes al agua en
ebullicin x + de 2 h, pueden morir a 98C
en 10 a 30 min. En sol. De carbonato de
sodio al 2%.
PASTEURIZACIN
Pasteurizacin Lenta: 62.9C por 30 min.,
seguido de un enfriamiento rpido a 4C.
Pasteurizacin Rpida: 71.6C 80C durante
15 segundos y rpidamente refrigerarla.
Ultrapasteurizacin: 100 C durante fracciones
de segundos procediendo a la inmediata
refrigeracin.
Principales microorganismos patgenos que
provocan tuberculosis, brucelosis, fiebre de
tifoidea, difteria, escarlatina y la fiebre Q, como
la mayor parte de los microorganismos que
provocan que la leche se agrie.
Tyndalizacin:
Esterilizacin por accin discontinua del vapor de agua,
se basa en el principio de Tyndall.
Las bacterias que resisten una sesin de calefaccin,
hecha en determinadas condiciones, pueden ser
destruidas cuando la misma operacin se repite con
intervalos separados y en varias sesiones.
Se efecta por medio del autoclave de Chamberland,
dejando abierta la vlvula de escape, o sea funcionando
a la presin normal. Puede tambin realizarse a
temperaturas ms bajas, 56 u 80 para evitar la
descomposicin de las sustancias a esterilizar, por las
temperaturas elevadas.
MTODOS MECNICOS
FILTRACION
- Para materiales termolbiles y sensibles a radiaciones.
- Tamao del poro: 0.005-1 .
- Los virus no son retenidos
Filtros de membrana
Filtros HEPA
ULTRASONIDOS
- Vibraciones de alta frecuencia (poca penetracin).
- Desnaturalizar las protenas y componentes bacterianos.
- Se emplean en un bao de agua para limpieza de material
FILTRACIN
Este procedimiento es aplicable a la esterilizacin
de lquidos y gases, especialmente los primeros.
Cuando el lquido a filtrar no puede resistir, sin
descomponerse , la accin del calor, se aplica la
tcnica de filtracin, la que puede efectuarse
mediante presin o aspiracin.
filtros de porcelana "de Chamberland" y los de
tierras infusorias calcinadas "Berkefield"
Esponjas de asbesto filtros de Sietz
Membrana de ester de celulosa de 8 0.25
Ej. Vacunas, cuantificacin bacterias en agua y
aire, separar toxinas de las bacterias, antibiticos,
protenas, cateter,
RADIACIN
Como la transmisin de energa a travs del espacio.
Radiaciones ionizantes: ( rayos x, rayos gamma y
rayos catdicos) y rayos ultravioleta,
Ej. Artculos farmacuticos, plsticos como cajas de
petri, jeringas, catteres.
Rayos x para preservar frutas, vegetales y carne de
cerdo.
Luz ultravioleta, longitud de onda corta cubre un
espectro que va desde una manera parcial visible
hasta una totalmente obscura, longitud de onda
desde 390 a 40 nm, con un efecto letal mximo a
260 nm
MTODOS QUMICOS
AGENTES QUMICOS
Son agentes que matan o inhiben el
crecimiento de los microorganismos.
Antisptico
Desinfectante
Conservadores
ANTISPTICO
Agentes microbicidas que pueden aplicarse
sobre la piel y mucosas, pero no pueden usarse
internamente.
Desinfectantes
Conservadores
Agentes usados frecuentemente en alimentos pero
tambin en productos farmacuticos para inhibir
el crecimiento de organismos Por consiguiente al
ser ingeridos no deben ser txicos.
Ej: propionato de calcio, benzoato de sodio,
formaldehdo, nitrato, dixido de azufre.
Fenol, cresol
MODO DE ACCIN
APLICACIN
Desnaturalizan protenas
Daan la membrana
Hexaclorofeno
Alcoholes
Etanol
Isopropanol
Desnaturalizan protenas
Disuelven lpidos
Halgenos
Yodo
Oxidante
Cloro
Perxido de
hidrgeno
H2O2
Oxidante
Metales
pesados
Hg, Ag
Inactivan protenas
Detergentes
catinicos
Cloruro de
benzalconio
Alteran membranas
Desnaturalizan protenas
Aldehdos
Formaldehdo
Glutaraldehdo
Agentes alquilantes
Gaseosos
Oxido de etileno
Agente alquilante
Conservadores
cido propionico y propionatos0,32% Agente antifngico
en panes, quesos
Acido srbico y sorbatos0,2% Agente antifngico en
quesos, mermeladas, jugos
Acido benzoico y benzoatos 0,1% Agente antifngico en
margarina, sidra, bebidas gaseosas.
Acido lctico variable Agente antimicrobiano en queso,
manteca, yogur.
Dixido de azufre, sulfitos200-300 ppm Agente
antimicrobiano en frutas secas, uvas.
Nitrito de sodio 200 ppm Agente antimicrobiano en
alimentos curados, pescado
Cloruro de sodio variable Previene el deterioro
microbiano en carnes, pescado, etc.
Azcar variable Previene el deterioro microbiano en
mermeladas, jugos, jaleas, etc.
Agentes biolgicos
son sustancias sintticas, semisintticas o
producidas por organismos capaces de matar o
inhibir el desarrollo de otros organismos.
Los agentes antivirales, antibacterianos y
antifngicos, se definen como aquellos agentes
biolgicos capaces de inactivar virus, bacterias y
hongos, respectivamente.
Mecanismos de accin
1- Inhibicin de la sntesis de peptidoglicano
a- Antibiticos beta-lactmicos naturales y semisintticos
(penicilinas, cefalosporinas, carbapenems, monobactam)
b- Vancomicina (natural)
c- Bacitracina (natural)
2- Alteracin de la membrana citoplasmtica
a- Polimixina B (natural)
b- Anfotericina B (natural)
c- Nistatina (natural)
d- Imidazoles (natural)
3- Inhibicin de la sntesis proteica
Bloqueo de la transcripcin (prevencin de la sntesis de ARN)
a- Rifampicina (natural)
b- tetraciclinas (natural)
Instrumental
- Uso al que se destine
- Naturaleza del objeto a tratar
A
R
G
S
A
CI