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Faculdade de Farmcia

PPGCF Programa de Ps Graduao


em Cincias Farmacuticas
Universidade Federal do Rio de Janeiro

Aluno: Mrcio Vincius da Silva Gomes


Profas: Dr Lcia Jaeger, Dr Mirian Ribeiro e Dr Nancy
Barbi
Dezembro de 2013

INTRODUO

Brcolis (Brassica oleracea L. ssp. italica)


Auto

valor nutricional;

Contedo

significativo
de
vitaminas,
antioxidantes e compostos promotores de sade,
como glicosinolatos e compostos fenlicos;

Rpida

deteriorao Colorao Amarelada

Necessidade

de aumentar a vida til.

INTRODUO

Glicosinolatos
Potencial

agente quimioprotetor e atividade


anticancergena;

So

quimicamente estveis at que eles entram em


contato com a enzima mirosinase, que separada dos
glicosinolatos no tecido vegetal.

Mastigao: Mirosinase entra em contato com os


glicosinolatos: Sulforafano.

Atividade

anti-tumoral, inibio do crescimento celular


e estimular a apoptose em clulas cancerosas em
cultura e diminuir a taxa de crescimento do tumor em
animais com tumores induzidos quimicamente.

INTRODUO

Citoquininas
Sintetizadas

em plantas intactas, produzido nas


razes e armazenado nas flores
Aps a colheita a quantidade reduzida
abruptamente.
Exemplo de citoquinina:

6-benzilaminopurina:
No-txico para humanos
Regulador do crescimento vegetal no meio-ambiente
Aprovado como biopesticida

Diminui

a senescncia foliar, mesmo que


aplicado externamente.

Enzimas antioxidantes

OBJETIVOS

Poucos dados sobre o efeito do tratamento 6BA em enzimas antioxidantes , glucosinolatos


e sulforafano em brcolis.

Objetivos: avaliar o efeito do tratamento com


6-BA em:

Superxido dismutase (SOD);


Catalase (CAT);
Peroxidase (POD);
Ascorbato peroxidase (APX);
Compostos de promoo da sade:
glicosinolatos e sulforafano;

MATERIAIS E MTODOS

Material vegetal e tratamento


Produtores

locais
Transportados em 6 horas aps a coleta:
Dois grupos
Grupo teste

Mergulhado em 200 mg/L de 6-BA

1 min a temperatura ambiente


Secos em papel adsorvente
Grupo controle
Separao flor (congelada)/caule

Mergulhado em gua destilada

MATERIAIS E MTODOS

Medio da cor:
Minolta

Chromameter (CR 400)


(H) = ngulo de tonalidade
(L*) = luminosidade: (0100: 0 = preto, 100 = branco)

Determinao da clorofila e das enzimas que a


degradam
Espectrofotmetro

(665 e 649 nm)


Enzimas: Clorofilase e Mg-dequelatase

Ensaio enzimtico:
Superxido

desmutase

Catalase
Peroxidase
Ascorbato

peroxidase

MATERIAIS E MTODOS
Determinao do malondialdeido (MDA)
Ensaio DPPH
Compostos fenlicos totais

Padro

Contedo de glicosinolatos totais


Mtodo

c. Glico
fenol-cido sulfrico (490 nm)

Calculado em funo da glicose produzida

Quantificao de Sulforafano
Anlises

por HPLC-UV

RESULTADOS

RESULTADOS

RESULTADOS

RESULTADOS

RESULTADOS

RESULTADOS

DISCUSSO

O tratamento com 6-BA inibiu significativamente o


aumento do valor de L* e causou a maior reteno de
valor H, em comparao com as flores de controle.

Degradao da clorofila:

Primeiro passo: Clorofilase


Segundo passo: Eliminao de Mg2+ a partir de clorofilase para
produzir feoforbida catalisada por Mg-dequelatase.
O incremento da atividade clorofilase durante a senescncia do
brcolis regulada positivamente por etileno e regulada
negativamente por citoquininas.

O tratamento das flores de brcolis com 6-BA inibiu a


degradao da clorofila por reduzir nveis de clorofilase e
de Mg-dequelatase.

DISCUSSO

MDA: produto da peroxidao da membrana e


pode danificar a estrutura e integridade das
membranas durante a senescncia de floretes de
brcolis.

Ps-colheita: peroxidao lipdica (MDA)


desintegrao da membrana celular. O tratamento
6-BA atrasou o aumento do teor de MDA em
relao ao controle.

Possvel mecanismo: a 6-BA pode inibir a perda de


integridade da membrana e da mistura de
glucosinolatos com mirosinase, levando a uma
menor hidrlise do glucosinolato.

DISCUSSO

Segundo mecanismo: A ao coordenada de


enzimas antioxidantes como SOD, APX e CAT
ajuda a reduzir o dano oxidativo em senescncia e
regenerao dos metablitos de ascorbato e
glutationa.

A proteo oferecida por enzimas antioxidantes


importante para a reteno de cor verde em
botes florais de brcolis, e os aumentos na
atividade das enzimas antioxidantes foram
respostas de defesa provveis para os aumentos
na produo de radicais de oxignio, o que
poderia, posteriormente, levar ao amarelecimento
de brcolis.

DISCUSSO

Verificou-se que a atividade de POD em brcolis


tratados com 6-BA foi menor do que no controle.
Estes resultados implcitas que a reduo do
estresse oxidativo em botes florais de brcolis
pode ser um motivo de tratamento de 6-BA foi
eficaz em retardar a senescncia.

O nvel de antioxidantes desempenha um papel


crtico na manuteno da sade humana, a
preveno de danos oxidativos a molculas e
clulas. Tratamento de 6-BA pode aumentar a
capacidade
antioxidante,
enquanto
que
a
atividade de radical DPPH diminuiu em flores de
brcolis de controle.

DISCUSSO

No presente estudo, os nveis mais elevados de


fenis totais foram detectados em amostras
tratadas com 6-BA.

Uma das enzimas-chave na sntese de compostos


fenlicos fenilalanina amnia-liase (PAL), cuja
atividade pode ser diretamente relacionado com
o teor de compostos fenlicos.

Trabalhos
anteriores
mostraram
que
os
tratamentos de calor pode reduzir a atividade da
PAL em morango e a induzida por sacarose em
brotos de brcolis.

DISCUSSO

O presente estudo mostrou que o tratamento com


6-BA leva a uma melhor reteno do contedo
total de glicosinolatos , em comparao com o
controle durante o armazenamento.

Sulforafano , um isotiocianato de brcolis , um


dos mais potentes anticancergenos derivados de
alimentos.

Tem sido relatado que a formao de isotiocianatos


de brcolis pode ser promovida por alta presso e
que o teor em sulforafano brcolis tambm foi
afetado por diferentes mtodos de cozimento .

DISCUSSO

Tratamentos de sacarose e manitol, tambm tm


sido mostrados para aumentar o teor de
sulforafano em brcolis.

O teor de sulforafano em brcolis tratados com 6BA foi significativamente aumentada. provvel
que o tratamento com 6-BA pode melhorar o
substrato (glicorafanina) em flores de brcolis.

Mais estudos so necessrios para explorar o


mecanismo de formao de sulforafano em
brcolis tratados com 6-BA.

CONCLUSO

O estudo mostrou que o tratamento com 6-BA no s


manteve a qualidade visual e retardou a degradao
da clorofila em floretes de brcolis, mas tambm
melhorou a capacidade antioxidante e as atividades
das enzimas antioxidantes, incluindo CAT, SOD e APX.

Os
teores
de
compostos
fenlicos
totais,
glicosinolatos e sulforafanos em brcolis foram
significativamente melhorada atravs de tratamento
6-BA.

Estes resultados implicaram que o tratamento com 6BA pode produzir mais compostos de promoo da
sade e melhorar o valor nutricional de brcolis.
Entretanto, o mecanismo completo ainda
desconhecido.