HEMOGRAMA

MANUAL
Dr JOSE F LUNA HIDALGO

Definicin
ES EL ESTUDIO CUALI Y
CUANTITATIVO DE LOS ELEMENTOS
CORPUSCULARES DE LA SANGRE
CUANTITATIVO : Recuento de GR, GB
Dosaje de Hb
ndices Hematimtricos ( VCM, HCM, CHCM )
Frmula Leucocitaria
CUALITATIVO
Estudio Morfolgico de la Serie Roja, Serie Blanca y Pq

Determinaciones Adicionales
RECUENTO DE Pq

Reticulocitos
VSG

ETAPA Pre-ANALTICA

Condiciones del Paciente

Tipo y Toma de Muestra

Condiciones del Paciente

NO NECESITA ESTAR
ESTRICTAMENTE EN AYUNAS (se
sugiere al menos 2 h).
NO HABER REALIZADO ACTIVIDAD
FSICA INTENSA
PERMANECER PREFERENTEMENTE
SENTADO DURANTE LA EXTRACCION

DATOS A TENER EN CUENTA

EDAD

DX. PRESUNTIVO
SEXO

REFERENTE A LA MUESTRA
TIPO DE MUESTRA
-VENOSA

-CAPILAR
-ARTERIAL??

PUNCION VENOSA

VENTAJAS
-Tcnica rpida y segura
-Permite obtener volmenes
adecuados para las dems
determinaciones.
-Permite repetir el anlisis en
caso de dudas.
-Reduce los posibles errores
de la puncin capilar.

DESVENTAJAS
-Resultados errneos por hemoconcentracin (torniquete prolongado)
-Hematomas y dolor (extraccin
dificultosa)
-No se recomienda en neonatos
o pacientes quemados.
-Paciente Oncolgicos

PUNCION CAPILAR

VENTAJAS
-Resulta sencillo para neonatos y
nios
-Se puede realizar ms de una
vez en pacientes especiales (quemados, oncolgicos, etc)
-til en pacientes con patologas
Hemorrgicas.

DESVENTAJAS
-Recuentos errneos por hemoconcentracin o hemodilucin
-Dificultad para obtener flujo
continuo.
-Recuentos de Pq disminuidos,
coagulacin.
-Errores por contaminacin
-Paciente Oncolgicos

ANTICOAGULANTES

SALES DE EDTA :(Na2 o K3) Forman complejos con el Ca++,

efectivo en pequeas cc, no necesita ser evaporado (Posible
error por dilucin a tener en cuenta) 0.01mL (10 L) sirven para
anticoagular hasta 2,5 mL de sangre LA RELACION
NORMALMENTE USADA ES 10 L ms 1 mL (990 L) de sangre
(1/100)
PERMITE CONSERVAR EN HELADERA LAS MUESTRAS
HASTA 48h SIN ALTERAR LOS VALORES

MEZCLAS DE OXALATOS DE AMONIO Y POTASIO

( MEZCLA DE WINTROBE) Acta precipitando el Ca+
Proporcin 1/10 (0.5 mL ACG EVAPORADO a 37 + 5 mL sangre)

HEPARINA: Acta neutralizando la trombina. Proporcin 10-50

UI/mL sangre. (COLORACIN)

ACTIVIDAD
TENIENDO EN CUENTA
PROPORCIONES CALCULE:
- volumen de EDTA-Na2 para anticoagular
3 mL de sangre
-volumen de EDTANa2 para anticoagular
2 mL de sangre

Obtenida la muestra

HOMOGENEIZAR !!!!! LENTA Y

REPETIDAS VECES

ANTES DE PROCESAR :
HOMOGENEIZAR LENTA Y
REPETIDAS VECES!!!

ETAPA ANALTICA
RECUENTOS DE GB , GR y Plq
Hematocrito
Dosaje de Hb
Frmula Leucocitaria

RECUENTO DE GB
DILUYENTE: LIQUIDO DE TURK
-Acido actico glacial (20 mL)
-Cristal Violeta 1% (10 mL)
-Levar a 1000 mL con agua destilada
Dilucin : 1/20
380 L + 20 L muestra

Muestra
Secar con papel
el dispositivo de
cargado

Homogeneizar
Por agitacin

RECUENTO DE GB
CAMARA DE
NEUBAUER

PIPETAS

CAMARA DE NEUBAUER
Se trata de un portaobjetos con una

depresin en el centro, en el fondo

de la cual se ha marcado con la ayuda
de un diamante una cuadrcula.
Es un cuadrado de 3 x 3 mm, con una
separacin entre dos lneas
consecutivas de 0.25 mm. As pues el
rea sombreada y marcada L
corresponde a 1 mm. La depresin
central del cubreobjetos est
hundida 0.1 mm respecto a la
superficie, de forma que cuando se
cubre con un cubreobjetos ste dista
de la superficie marcada 0.1 mm, y el
volumen comprendido entre la
superficie L y el cubreobjetos es de
0.1 mm.

Aumento 10X

Aumento 10x

Consideraciones prcticas

PARA CARGAR LA CAMARA : SE COLOCA EL CUBRE

OBJETO Y ACERCANDO LA PUNTA DE LA PIPETA O
EL CAPILAR SE LLENA POR CAPILARIDAD
EL LLENADO DEBE HACERCE DE UNA SOLA VEZ SIN
QUE QUEDEN BURBUJAS, NI LQUIDOS
EXEDENTES ALREDEDOR DEL CAMPO
NO BALANCEARLA AL ACERCAR AL MO
PARA DISTINGUIR DE BASURAS MOVER EL
TORNILLO MICROMETRICO.
NO DEMORARSE

Elementos contados
4 mm
X
1mm
X
N/4
Dado que el espesor de la cmara es 0.1 mm, para expresar el
nmero de elementos por mm deberemos multiplicar el valor X por
10.
X= (N/4) X 10
Como se ha efectuado una dilucin de 1/20, debemos multiplicar por
la dilucin, es decir:
X= Nx10x20= N x 50= N de GB/mm
4
Segn el ICSH, debe expresarse este resultado en N de GB. 10x9/l

Clculos

Valores de Referencia
ADULTOS : 5000 a 10.000 GB / mm
NIOS
- RN : 12.000 a 25.000 GB / mm
- Hasta 1 ao : 6000 a 18.000 GB / mm
- 3 a 6 aos : 5000 a 15.000 GB / mm
- 6 a 12 aos: 4500 a 13.500 GB / mm

ACTIVIDAD

EXPRESAR 6500 GB/mm3

En: cel / dL
cel / L (notacin cientfica)
cel / L (notacin cientfica)

CAUSAS DE ERROR

DEL MATERIAL
CUBREOBJETOS MAL COLOCADO
SUCIEDAD ,LEVADURAS EN EL LIQUDO DE DILUCION
RESTOS DE G.R.
APELOTAMIENTO DE LEUCOCITOS
DESGASTE
DE TECNICA
EXTRACCION DE SANGRE
DILUCION (PIPETA MAL ENRASADA)
LLENADO DE CAMARA EN FORMA DESIGUAL
AUTOAGLUTINACION
DEL OPERADOR
DIFERENCIAS DE UN INDIVIDUO A OTRO
FATIGA OCULAR

LEUCOCITOSIS

FISIOLGICAS
Embarazo, Lactancia, Puerperio, Perodo
menstrual
Ejercicio violento, Stress.

LEUCOCITOSIS PATOLOGICAS
CAUSAS INFECCIOSAS
-Bacterias pigenas : Strepto,
Staphylo , Meningo y gonococo.
-Tos convulsa (Bordetella)
Leucocitosis con Linfocitosis
-Sarampin (Inc)
-Cuadros septicos : Peritonitis,
Neumona

CAUSAS NO INFECCIOSAS
-Cuadros inflamatorios
-Post hemorragias
-Vmitos, convulsiones, crisis eclmpsicas, epilepsia, taquicardias
-Hipertemias no infecciosas
-Quemaduras extensas
-Sock traumtico
-IMC, necrosis de tejido tumoral, pancreatitis.
-Leucemias
-Enfermedades metablicas : DBT,
Coma diabtico, Acidosis
-IRC
-Endcrinopatias : Cushing
- Corticoterapia

Leucopenias
-Constitucional

(Rara) tener presente resultados previos

-Digestiva (post prandial)
-Infecciosa: fiebre tifoidea y paratifoidea
-Sepsis de mala evolucin
-Casi todas las virosis (Sarampin, Varicela, Gripe, Neumona )
-Intoxicacin por benzoles o sulfas
-Hemopatas: Leucemias leucopnicas, aplasia medular, etc
-Afecciones hepatoesplnicas
-Cirrosis heptica, trombosis de la vena porta o esplnica
-Leucopenias alrgicas, shock anafilctico
-Afecciones reumticas
-Quimioterapia
-Leucopenias carenciales
-Colagenopatas: LES, Esclerodermia
-AINES

DOSAJE DE Hb
Mtodo de la Cianmetahemoglobina
Fue recomendado por el Comit
Internacional para la Estandarizacin de
Hematologa (ICSH) en 1966,
modificado en 1977 y sigue siendo hasta
hoy el ms recomendado.

REACTIVO DE DRABKIN

Fe(CN)6K3---------------200 mg
KCN---------------------------- 50 mg
K3HPO3--------------------140 mg
Sterox Se o Triton X-100-------1 mL
Llevar a 1L con agua destilada y ajustar el pH
a 7,2 con H3PO4 0.1 N o con KOH 0.1N.
Guardar en frasco color caramelo, a T amb,
estable 6 meses.

Fundamento del Mtodo

Hb ( Fe II )
Fe(CN)6K3
Meta Hb ( Fe III)

KCN

CIANMETAHEMOGLOBINA

MAXIMO DE ABS
A 540 nm

Tcnica
5 mL Rvo Drabkin + 20 L sangre entera anticoagulada

5 minutos

Leer a 540 nm en espectrofotmetro o en fotocolormetro con

filtro verde

Curva de calibracin
Se realiza cada vez que se prepara o
adquiere reactivo.
Kits comerciales : 3 niveles ( bajo,
normal, alto )
Muestra testigo de cc conocida
(trabajo con dilucin al y con el doble )

Curva de Calibracin
Abs

A=.b.C
y=ax+b

g/dL

ACTIVIDAD

A= b C despejar C y especificar
Unidades (g/dL)

Idem desde la pendiente del grfico

VENTAJAS DE LOS METODOS

KIT COMERCIAL
-Controla

la
linealidad del equipo
-Estado del rvo

MUESTRA TESTIGO
-Controla la linealidad del equipo
-Controla la manipulacin del
material de medicin volumtrico
(en forma indirecta) pues el
patrn se procesa
como si fuese una muestra
-Posible deterioro del reactivo
-Variaciones de tensin, Int de la
-Lampara,etc.

Para tener en cuenta

La determinacin de un patrn diario nos
permite:
-Controlar que el reactivo no ha sufrido
deterioro
-Controlar el factor humano
-Cambios en la tensin elctrica o
funcionamiento del equipo de lectura.

VALORES DE REFERENCIA
Bibliografa

Laboratorio

Mujeres

11,5 - 14 g%

12 15 g%

Varones

13,5 17 g%

13 17 g%

HEMATOCRITO O
VOLUMEN GLOBULAR

Definicin
ES

EL VOLUMEN DE MASA
GLOBULAR EXPRESADO COMO
UN % EN EL VOLUMEN DE
SANGRE TOTAL

Tcnica
1-SE CARGAN TUBOS CAPILARES:
Sangre venosa : Sin heparina
Puncin digital: Con heparina
2-LLENAR HASTA 2/3 EL CAPILAR Y CERRAR
EN UN EXTREMO CON PLASTILINA
3-CENTRIFUGAR EN CENTRIFUGA ESPECIAL:
15000 rpm 5 a 6 min
4-LEER EN ABACO ESPECIAL

MICROCENTRFUGA

VENTAJAS

RPIDO
< VOLMEN DE SANGRE
TUBOS CAPILARES DESCARTABLES
MAS EXACTO YA QUE AL CENTRIFUGAR
LA SANGRE A MAYOR VELOCIDAD EL
VOLUMEN DE PLASMA ATRAPADO POR LOS
G.R. EN DICHA CAPA ES <

Valores de referencia
Recin Nacido 52 65 %
Varones 40 48 %
Mujeres 37 47 %

VALORES ALTOS

VALORES BAJOS

POLIGLOBULIA REAL

-ANEMIAS

HEMOCONCENTRACION :
QUEMADURAS , ECLAMPSIAS,
SHOCK QUIRURGICO
O TRAUMATICO

-FASE DE
RECUPERACIN
DE PERDIDA DE
SANGRE
-EMBARAZADAS

ESTADOS DE
DESHHIDRATACION (VOM.
DIARREAS, DIABETICOS)
HIPOXIA DE LAS ALTURAS
FUMADORES

RECUENTO DE GLBULOS
ROJOS

EL CONTAJE HA ADQUIRIDO MUCHA

PRESICION CON LOS METODOS
AUTOMATIZADOS
EL RECUENTO EN CAMARA ES OBSOLETO
Y SUJETO AGRAVES ERRORES TANTO QUE
CUANDO NO SE DISPONE DE VALORES
POR AUTOMATIZACION ES MEJOR
PRESCINDIR DE ESTE DATO Y GUIARSE
POR LOS VALORES DE HTO Y HB.

VALORES DE REFERENCIA
Mujeres 4 4.8 millones/mm
Varones : 4.5 -5.5 millones / mm
RN : 5.6 millones / mm
4 semanas: 4 millones/ mm
6 semanas: 3.6 millones/ mm
12 semanas : 3.8 millones/mm
6 a 12 aos : 4.5 millones / mm

INDICES HEMATIMTRICOS
VCM
Expresa el
volumen medio
del GR

HCM
CHCM
Cantidad de Hb % de Hb
contenida en un contenida en la
masa globular
hematie
total

90 5 fL

29 3 pg

Hto x 10
GR

Hb x 10
GR

30 34 %
Hb x 100
Hto

ACTIVIDAD
EXPRESAR CON UNIDADES
VCM (fL)
HCM (pg)

ANLISIS DE FROTIS
SANGUNEOS

Coloracin May Grwald - Giemsa

May Grwald
-Eosinato Azul de Metileno
-Metanol
Giemsa
-Eosinato de Azur II
-Azur II
-Glicerina y Metanol

TCNICA
1-Realizar el extendido Dejar secar- Rotular
2- Cubrir 3 minutos con MG (FIJACIN)
3-Agregar en igual proporcin al colorante
buffer o agua comn : agua destilada (1:1) con
movimientos sin eliminar todo el colorante
anterior (ACTIVACION)
4-Volcar la mezcla anterior y (enjuagar) cubrir
con Giemsa al 10% durante 15 minutos.
PREPARAR EN EL MOMENTO
5-Dejar secar Observar con Aceite de
Inmersin

MG

Metanol : Agente Fijador

Eosinato : colorea partes bsicas del
citoplasma (rosado) : hemates, grnulos de
Eos, citoplasma de granulocitos.
Azul de Metileno: granulaciones especficas de
granulocitos, nucleolos, citoplasmas basfilos,
hemates policromatfilos, colorea levemente
el ncleo.

Giemsa
Colorea fuertemente las granulaciones
inespecficas (azurfilas), colorea
adems fuertemente los ncleos
diferenciando la cromatina.
Tie tambin cuerpos de Howell Jolly,
anillos de Cabot y Bastones de Auer

RESUMIENDO

NCLEOS: En violeta rojizo

CITOPLASMA DE LAS CELULAS
LINFOIDEAS :en azul -celeste luminoso. Los
grnulos linfoideos en rojo purpreo
LOS GRANULOS NEUTRFILOS .en rosado
pardusco
LOS GRANULOS EOSINFILOS: en naranja
pardo o rojo ladrillo
LOS GRANULOS BASFILOS: En azul marino
con tonalidad violcea
ERITROCITOS en rosado rojizo

BASOFILO

NEUTROFILO
LINFOCITO

EOSINOFILO

MONOCITO

Frmula Leucocitaria
Cayados0 - 2%
Neutrfilos.50 - 70%
Eosinfilos.0 8 %
Basfilos0 1%
Linfocitos20- 40 %
Monocitos.. 4 6 %

OCULARES

OBJETIVOS

MACRO

PLATINA
CONDENSADOR

MICRO

PARA LOS TRABAJOS

PRCTICOS
GUARDAPOLVO O CHAQUETILLA
2 PARES* DE GUANTES POR PERSONA
MATERIAL DE EXTRACION (AGUJAS,
JERINGAS, LAZO, ALGODN
ALCOHOL, CINTA DE PAPEL)
MARCADOR PARA ROTULAR

POR GRUPO DE LABORATORIO

1 ROLLO DE COCINA X 3

1 LITRO DE LAVANDINA (MARCA)

1 BOTELLA DE ALCOHOL 250 CC

PAUTAS DE TRABAJO

ORDEN Y ORGANIZACIN

CONCEPTOS TERICOS LLEVADOS A

LA PRCTICA (COLOQUIO)

LIMPIEZA (ROTULADO)

FIN