INMUNOHISTOQUMICA

LIC. T.M. GINA TELLO

HISTORIA

INMUNOHISTOQUMICA
La IHQ consiste en una serie de mtodos que sirven para localizar

antgenos especficos en tejidos o clulas basados en una reaccin

antgeno anticuerpo.
El Ac. debe ser previamente marcado mediante un enlace qumico con

una Ez, sin afectar la capacidad del Ac. para formar un complejo con el
Ag.

INMUNOHISTOQUMICA

Esta tcnica tiene sus bases en tres disciplinas: la histologa,

la inmunologa y la qumica

La inmunohistoqumica es esencial en el diagnstico

anatomopatolgico de las enfermedades, (neoplsicas).

La realizacin de la fijacin de los tejidos es muy

importante,

las indicaciones de uso, las tcnicas, la lectura y

valoracin
de los resultados deben seguir las especificaciones
adecuadas
as como los controles de calidad especficos.

IMHQ

La inmunohistoqumica se puede realizar en tejidos de:

Biopsia y autopsia,

Los tejidos son generalmente fijados en formol e incluidos

en parafina, as como en material de citologa.

La fase de fijacin del material para inmunohistoqumica es

esencial. Una fijacin inadecuada impide cualquier

resultado fiable.

UTILIDAD

ETAPAS
Obtencin de clulas o tejido
Fijacin
Unin con anticuerpo
Deteccin de la reaccin Ag- Ac

TIPOS DE MUESTRAS
Cultivos celulares que crecen en un soporte de vidrio

(cubreobjetos)
Centrifugado de clulas en suspensin colocadas

en
un portaobjetos
Frotis de tejido
Cortes de tejido

FORMALDEHDO

El formaldehdo al 4% tamponado a pH 7,4 (formalina).

Lo ideal para la piezas mayores es mantenerlas en el frigorfico a 4

C si se van a dejar toda la noche antes de tallarlas.

El material autpsico ofrece generalmente malos resultados debido

a los fenmenos postmorten que sufren los tejidos.

La inmunohistoqumica con vimentina permite observar el

deterioro sufrido durante la fijacin.

Las piezas que vayan a procesarse

el fin de semana iniciarn dicho

procesamiento el mismo viernes para evitar que permanezcan
excesivo tiempo en el formol; en caso de no ser posible, es preferible
iniciar el procesamiento por alcohol de 70.

PROCESADOR AUTOMATIZADO

TINCIN DE LOS CORTES

Tiene el objeto de hacer visibles al microscopio todas las estructuras

tisulares, as como tambin poder diferenciarlas.

Aunque existen mltiples tcnicas de tincin, en los laboratorios se

utiliza rutinariamente la hematoxilina-eosina.

Por la riqueza de matices rosados y rojos que da la eosina y la excelente
definicin nuclear de la hematoxilina.
sta es la mejor tcnica de tincin para diferenciar las estructuras
celulares y
tisulares

Proceso de Tincin

MONTAJE
Consiste en la adherencia de un cubreobjetos de cristal, mediante una

sustancia que tenga la propiedad de proteger de la desecacin, del

arrugamiento, de la oxidacin, etc.
El medio utilizado para la adhesin del cubreobjetos debe ser, adems,

soluble en el aclarante y tener un punto de refraccin que coincida con

la muestra y con el cubreobjetos, logrando una imagen lo ms
translcida posible, adems de un pH neutro.
Habitualmente esta sustancia es un tipo de resina sinttica por su

menor costo, comparado con el de las cintas plsticas adhesivas que se

utilizan en los aparatos automatizados

ALGUNOS MARCADORES

P.S.A

Prstata

TTF1*

Pulmn

GCDFP -15*

Colon
Mama

CK20
E.R.
Precis
in

CDX2 o
Colon

Estmago o pncreas

diagnstica

88%

Ovario
Mama CA125
*GCDFP

Pncreas

gross cystic disease fluid protein

Resultados
Se seguir en general la siguiente pauta, aunque hay frecuentes

casos especficos en los que los porcentajes y su significado

pueden variar:

Negativo (-): total negatividad o menos del 50% de las clulas diana con menor
intensidad que el control.
Positividad dbil (+/-): ms del 50% de las clulas diana con menor intensidad
que el control.
Positivo (+): ms del 50% de las clulas diana con igual o mayor intensidad que
el control.

El lmite de intensidades entre negativo y positividad dbil o

positivo se hace por comparacin con un control interno

existente u otro externo ad hoc.