DISEO DE UN

MEDIO DE CULTIVO
PARA LA
ELABORACION DE
BIOMASA PARTIR DE
JUGO DE NARANJAS

INTRODUCCION
El proceso biotecnolgico para obtener
biomasa de un microorganismo con el
fin de ser usado como inculo
industrial, se basa en la optimizacin
del rendimiento de clulas viables con
una actividad biolgica definida y con
buenas
caractersticas
de
supervivencia. Para ello es esencial no
slo disear un buen caldo de cultivo,
sino conocer las vas metablicas

OBJETIVO
El objetivo en esta investigacin, se
centrara en desarrollar un medio de
cultivo adecuado para el crecimiento
microbiano de la biomasa proteica de
la levadura Saccharomyces Cerevisiae
producida a partir de jugo de naranja.

JUGO DE NARANJA
Elzumo (o jugo) de naranjaes unzumo de
frutasen forma de lquido obtenido de exprimir
el interior de lanaranjas(Citrus sinensis),
generalmente
con
un
instrumento
denominadoexprimidor.
El zumo de naranja es un producto alimenticio
complejo compuesto de diversos ingredientes,
hoy en da puede adquirirse exprimido en
envases
de
tetra
bricken
casi
cualquiersupermercado.

CIDO ASCRBICO
Las
cantidades
de
cido
ascrbico
encontradas en todos los jugos de naranja
son substancialmente mayores que las
presentes
en
otros
mostos.
Estas
concentraciones podran contribuir a la
inhibicin de procesos de oxidacin en
colaboracin con el SO2. Adems, la cantidad
residual de cido ascrbico despus de la
fermentacin podra inhibir a las reacciones
de pardeamiento del producto final.

NITRGENO
En muchos casos los mostos deben
ser suplementados con fuentes de
nitrgeno
extras,
usualmente
(NH4)2HPO4 (fosfato diamnico), a
los efectos de alcanzar adecuados
niveles de biomasa de levadura
durante la fermentacin.

SACCHAROMYCES CEREVISIAE
SACCHAROMYCES
Es la especie de levaduras utilizada por excelencia para
la obtencin de protena Unicelular (SCP) y etanol a
nivel industrial, debido a que es un microorganismo de
fcil manipulacin y recuperacin, no es exigente en
cuanto a su cultivo, no presentan alto costo, tolera altas
concentraciones de etanol, en la fermentacin produce
bajo niveles de subproductos, es osmotolerante, capaz
de utilizar altas concentraciones de azcares.

CARACTERSTICAS GENERALES DE
LAS LEVADURA
Caractersticas
Dimensiones (micras)
Tiempo de duplicacin
(horas)
pH (rango optimo)
Nitrgeno (%)
Protena (%)
cidos Nucleicos (%)
Carbohidratos

Levaduras
4-8
1-3
4,5- 5,5
7,5- 8,5
35- 45
6-12
30 - 45

Fuente : Fajardo, et al
(2007).

Saccharomyces cerevisiae requiere ciertos nutrientes y

condiciones ambientales para su propio crecimiento y
reproduccin.
necesarios

Algunos

como

por

elementos
ejemplo

son

bsicamente

carbono,

hidrgeno,

oxgeno, nitrgeno y fsforo. El crecimiento se favorece

a pH entre 4.0-5.0 y no se desarrollan bien en medios
alcalinos a menos que se hayan adaptado al mismo,
Fajardo, et al. (2007).

COMPOSICIN ELEMENTAL DE BIOMASA

PARA DIFERENTES ESPECIES
Microorganismo
Candida utilis
Klebsiella aerogenes
Saccharomyces

Composicin elemental
CH1.83O0.46N0.19
CH1.75O0.43N0.22
CH1.82O0.58N0.16

cerevisiae
Escherichia coli
Pseudomonas

CH1.94O0.52N0.25P0.025
CH1.93O0.55N0.25P0.021

fluorescens
Aerobacter aerogenes
Penicillium

CH 1.83O0.55N0.26P0.024
CH 1.64O0.52N0.16

chrysogemun
Aspergillus niger

CH 1.72 O0.55N0.17

Los componentes bsicos para la

nutricin de las levaduras son:
Agua.
Elementos biognicos (O, H, P y Mg).
Elementos oligobiognicos.
Vitaminas y factores de crecimiento.

ESTEQUIOMETRIA DE
CRECIMIENTO
Los tres sustratos analizados tienen nutrientes
orgnicos factibles de ser utilizados para el
metabolismo microbiano pero en cantidades
insuficientes

para

asegurar

una

buena

productividad. Por ello, se formul un medio

agregando los nutrientes necesarios en las
concentraciones

adecuadas

segn

la

estequiometra de crecimiento de la levadura

sin formacin asociada de producto, la cual
responde a la siguiente ecuacin:

ESTEQUIOMETRIA DE
CRECIMIENTO

Donde:

es la frmula del c-mol para

sacarosa (fuentes de carbono y energa
seleccionada para ser adicionada al jugo), a y
b son los coeficientes estequiomtricos para
el NH3 , el O2 , yX/S , yCO2/S son los
rendimientos en biomasa y CO2, w es el
coeficiente estequiomtrico para el agua
formada y es el calor liberado por c-mol de
sacarosa consumida.

ESTEQUIOMETRIA DE
CRECIMIENTO
En la anterior ecuacin CH1,79O0,5N0,2
representa a la frmula mnima de la
biomasa estndar de levadura. En la
misma no aparecen los elementos
menores como P, S, Mg, K, Ca, Fe, etc.,
los cuales forman un 5% de la
composicin y que por lo tanto deben
ser suministrados externamente (Pirt,
1975).

ESTEQUIOMETRIA DE
CRECIMIENTO
Tomando como base 70 g/L de FCE (fuente
carbono y energia) se realiz un balance de la FN
(fuente de nitrgeno) , urea, y de los
micronutrientes; de lo cual resulta la formulacin
que se muestra en la siguiente tabla:
Tabla.3Componente
Composicin del
medio de cultivo
Cantidad
base
Urea
KH2PO4
CaCl2
MgSO4. 7H2O
FeCl3. 6H2O
Extracto de
levadura
Sacarosa
Jugo de naranja

6 gr
1.7 g
0.1 g
0.5 g
0.06 g
1g
c.s.p 70 g*
c.s.p. 1000 ml

ESTEQUIOMETRIA DE
CRECIMIENTO
La

urea

se

determino

para

aumentar

la

fuente

nitrogenada, activando el crecimiento de las levaduras.

Esta forma de nitrgeno es fcilmente asimilable por
aminacin del cido -cetoglutrico con produccin de
cido glutmico y posterior transaminacin para la
biosntesis de otros aminocidos de la clula.

ESTEQUIOMETRIA DE
CRECIMIENTO
El fosfato de potasio KH2PO4 se agrega a fin de obtener
un exceso de fosfatos para que se activen las dos
fosforilaciones iniciales de la gliclisis hasta la produccin
de piruvato.
Las otras sales minerales tienen un claro efecto
multiplicador en la concentracin de levaduras en el
mosto.