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Modificando o alfabeto
molecular
Prof. Dr. Francisco Prosdocimi
Traduo em eukarya e
prokarya
Eventos ps-transcricionai
Processo de sntese de
protenas
RNAm contm o cdigo do gene
RNAt o adaptor que liga o mundo do
cido nuclico ao mundo das protenas
RNAr faz parte do ribossomo e
contm a enzima que catalisa a
ligao entre aminocidos adjacentes
tRNA o adaptador de
Crick
~60-90bp
Transcrio e
processament
o do RNAt
transcrito de um gene
presente no DNA
... E ento processado
Contm o cdigo do
adaptador
O cdigo gentico
Traduo in vitro de
sequncias de polinucleotdeos
conhecidos
Diferenas nas cadeias
laterais dos
aminocidos
Ribozimas X Enzimas
O cdigo gentico
redundante
Gamow: 20 aminocidos devem ser
codificados por, pelo menos 3 bases
UUA
CCU
AUU
AAA
CGG
Leu
Pro
Ile
Lis
Arg
CUG
CCG
AUA
AAG
CGA
Cdigo no-sobreposto
Pareamento cdonanticdon
Pareamento de bases Watson-Crick
nas duas primeiras bases do cdon
3-5 to 5-3
paralelo)
(pareamento anti-
Bases oscilantes
(wooble)
A base 3 do cdon
oscilante
O contato qumico
no perfeito (3D)
Inosina, derivado
de Adenina
tRNA-aminoacil
sintetases
Ligam o tRNA e o
aminocido
Reconhecem o
anticdon e
carregam o
aminocido
correto
Aminocidos ativados
Ativao do triptofano
Quantas tRNA-aminoacil
transferases?
Uma por
aminocido?
Ou uma por
cdon?
Uma nica
amino acil
tRNA sintetase
liga um
aminocido a
todos os seus
tRNAs
Controle da
traduo I
Afinidade da enzima
pelo tRNA disposto no
cdigo
tRNA errado liga-se
lentamente e desliga-se
rapidamente
A adio do
aminocido ao tRNA
incorreto muito lenta
Controle da traduo II
O aminocido
deve se encaixar
no stio sinttico
da tRNAaminoacil
-sintetase
... e no ao
stio de edio
Mecanismo de
peneira dupla
(des)Controle da
traduo III
No acontece
verificao do
aminocido
na traduo
O controle,
portanto,
feito apenas
no momento
da
aminoacila
o do tRNA
O congelamento do cdigo
gentico
Conservado em
praticamente
todos os organismos vivos
Maquinaria altamente complexa e
eficiente
Surgiu uma nica vez e todos os
organismos vivos hoje so
descendentes do organismo onde o
cdigo surgiu adaptao!
Ribossomos
Estrutura 2D e 3D do RNAr
Ribossomos de E. coli
Ribossomos eucariticos
O peso do ribossomo
se deve mais ao
componente de RNA
do que ao
componente protico
Ribosomal components
Reciclagem ribossomal
Stios ribossomais
utilizados na traduo
Quatro stios:
um para mRNA e
trs (stio A, P e
E)
para tRNA
Prokarya X Eukarya
RNA policistrnico
Operon
RNA monocistrnico
interao entre protenas
que se ligam a cauda
poliA e protenas do
Complexo de Iniciao
Iniciao da traduo
Procariotos: Shine-delgarno
Binding Site)
Consenso de Kosak
(Ribosome
GCCRCCAUGG
Start codon
Normalmente codifica metionina
Iniciao da
Traduo
Fatores de iniciao
da traduo
IF-1 e IF-3
tRNA carregado
formil-metionina
Seleo do tRNA
correto
Somente se pareia
o anti-cdon
que...
Liga-se tambm ao
rRNA
Complexo de
iniciao da
traduo
mRNA liga
subunidade menor do
ribossomo
tRNA contendo
metionina (formilada)
liga-se ao complexo
Fatores de iniciao da
traduo ajudam
Subunidade maior
reune-se ao complexo
Stios peptidil e
aminoacil
N-terminal
H H
H
-OOC C N - COH
-OOC C - NH2
R
R
Ribossomo
UAC
AA
A
AUG UUU
GUU
CUU
GAC
CCC
UGA
GGC
3
RNA
mensageiro
-O
OC H
-C H
-N
R -CO
-O
O
C- H
C- ..
N
R H
Formao da
ligao peptdica
U A CA A A
AUG
GUU
UUU
CUU
GAC
CCC
UGA
GGC
H
-CO
N
H
C R
C
H N
O
C
R
OC
O
-
Translocao
Requer GTP
H..
-OOC C - NH2
R
G
C
A
A
U
A
AAA
AUG
GUU
UUU
CUU
GAC
CCC
UGA
GGC
N
C R
H C
O
C
- R
-O
H
..
-OOC C - NH2
R
AAAGAA
AUG UUU
GUU
CUU
GAC
CCC
UGA
GGC
AUG
AG
AAAGAA
UUU
CUU
GAC
CCC
- -
H
O H H
H H
-OOC C N C C N C- C N -COH
R H
R
O R
UGA
GGC
Stios peptidil e
aminoacil
O ribossomo possui 3
stios onde cabem
molculas de tRNA
O alongamento da
traduo
Protenas so geradas
do N ao C terminal
Ordem de ligao de
aminocidos
Ligao peptdica
Alongamento da
traduo
Alongamento ainda...
O
alongamento
continua at o
aparecimento
de um cdon
de parada
(stop codon)
UAA
UAG
UGA
Terminao da
Traduo
Fator de
terminao
liga-se ao stop
codon
UAA, UGA,
UAG
Protena
liberada
Complexo
desfeito
Releasing factor
Traduo em procariotos
http://www.biostudio.com/demo_freeman_protein_synthesis.htm
http://highered.mcgraw-hill.com/sites/0072437316/student_view0/chapter15/animations
.html
#
Traduo em eucariotos
http://207.207.4.198/pub/flash/26/transmenu_s.swf
Tempo de execuo do
processo
Possveis
erros no
processo
Erro na traduo
Protena
incorretamente
produzida
Dano metablico
Frameshift
Alterao da fase
de leitura (frame)
tRNAs especficos
passam pelo stopcodon
4 bases lidas como 3
Ultrapassa um
cdon de
terminao
Produo de
protenas fundidas
Chaperonas I
Chaperonas II
Modificaes pstraducionais
Formao de ligaes
dissulfeto/dobramento
Clivagem da cadeia
Regula
Fosforilao
Glicosilao
o da
Metilao/Acetilao
funo
Adio de ncoras lipdicas
protica
Protena
Pronta!
E agora?
Destinos
possveis...
Endereamento de
protenas I - Co-
traducional (vias
de secreo):
ER
Golgi
Membrana
plasmtica
Meio
extracelular
II- postraducional:
ncleo
mitocndria
cloroplasto
Lisossomos/pe
roxissomos
Protenas organelares
Produzidas com
sinal de exportao
Sinal clivado
quando a protena
alcana seu destino
celular
Protenas
transmembrana
Domnios
hidrofbicos so
capazes de
invadir as regies
lipdicas (tambm
hidrofbicas) da
membrana
plasmtica
Inibidores de sntese
protica
Antibiticos inibem a
sntese de protenas
bacteriana
Tetraciclina
Liga no RNA 16S (sub 30S)
Inibe a ligao do aminoacyl tRNA no stio A
Cloranfenicol
Liga na subunidade 50S
Concluses
Traduo o processo de produo de protenas
A regulao ocorre principalmente na transcrio
Modificaes ps-traducionais so importantes para regular a
funo protica