ENZIMAS Y

COFACTORES

1. Definicin, clasificacin y nomenclatura de enzimas.

Especificidad.
2. Sitio activo y complejo enzima-sustrato.
3. Cintica y regulacin enzimtica. Coenzimas y grupos
prostticos.
4. Inhibicin enzimtica. Clasificacin.
5. Factores que afectan la actividad de las enzimas.
6. Clasificacin y funcin de las vitaminas.

Definicin, clasificacin y nomenclatura

de enzimas. Especificidad.
QUE ES UNA ENZIMA?
Las enzimas son protenas de alto PM,
sintetizados por los organismos vivos.
Catalizadores biolgicos.

Aumentan la velocidad de reaccin: 108 -109

veces.

Eficiencia
Especificidad
Regulacin

CATALISIS
Ej: Oxidacin de azcares
CATALIZADOR: Cualquier sustancia que aumenta la

velocidad de una reaccin

consumida en la reaccin.
37o C y pH 7.0

qumica

sin

ser

SUSTRATO: Compuesto sobre el cual la enzima

acta. Ej: Protenas, lpidos, carbohidratos.

sustrato

enzima

Productos de la reaccin

Estructu
ra
globular

Actividad
biolgica

HCl \
Enzimas
pH extremo
Temperatura

Inactiva

TEMPERATURA OPTIMA
ENZIMA

TEMPERATURA
OPTIMA

MAMIFEROS

37 C

BACTERIAS Y
ALGAS

Aprox. 100 C

BACTERIAS
ARTICAS

Aprox. 0 C

Bacterias en una muestra

de hielo.

NOMENCLATURA
La

mayora
se
denominan
con
la
terminacin asa, basndose en el tipo de
reaccin que catalizan y la identidad de los
sustratos implicados.

Ej:

Histidina
descarboxilasa,
deshidrogenasa

alcohol

ureasa, oxidasas, quinasas, fosforilasas,

fosfatasas.

CLASIFICACION

No.

Clase

Tipo de reaccin que

catalizan

Ejemplo
Deshidrogenasas
Peroxidasa Oxidasas
Oxigenasas
Reductasas

Oxidorreductasas

De xido reduccin (transferencia de e-)

Transferasas

Transferencia de un grupo intacto de

tomos desde una molcula donadora a
una receptora.

Kinasas
Transaminasas

Hidrolasas

Ruptura hidroltica de enlaces (participa

el H2O )

Pirofosfatasa
Tripsina
Aldolasa

Liasas

Lisis de un substrato, generando un

doble enlace, o
Adicin de un substrato a un doble
enlace de un 2o. substrato
(Sintasa)

(Sintasas)
Descarboxilasa pirvica

Isomerasas

Interconversin
ismeros.

Ligasas

Formacin de enlaces C-C,

C-S, C-O y C-N. Mediante Sintetasas
reacciones de condensacin,
acopladas a la ruptura del ATP

de

diversos Mutasas
Epimerasas
Racemasas

Oxidorreductasas: Catalizan reacciones de

oxidacin-reduccin.

Transferasas: Catalizan la transferencia de grupos que

contienen C, N o P.

Hidrolasas: Catalizan la ruptura de enlaces por la adicin de una

molcula de agua.

Liasas: Catalizan la ruptura de enlaces C-C,

C-S y C-N.

Isomerasas: Transforman un ismero de un compuesto

qumico en otro.

Ligasas: Catalizan la formacin de enlaces C-C, C-S y

C-N.

Que tipo de enzima cataliza cada una de las siguientes

reacciones?
isomera
sa
transamina
sa

Lactato
deshidrogenas
a

hidrolas
a

isomera
sa

transferas
a

Malato
deshidrogenas
a

Descarboxila
sa
liasas

Sintetas
a
ligasas

Medicina

Transaminasas

Industria
Qumica

Penicilina

Transformaci
n de
Alimentos
Agricultura

Fermentacio
nes
Quesos
Vinos
Rhyzobium

CARACTERISTICAS DE LAS ENZIMAS

Todas las enzimas son protenas globulares.
Son inestables: Se desnaturalizan por temperaturas
Proenzimas o zimgenos: Se activan cuando es necesario.
Ej:
enzimas
digestivas
(pepsina,
carboxipeptidasa,

tripsina).

Activacin por
hidrlisis de enlaces
peptdicos especficos

Activacin del Pepsingeno

GRUPO PROSTETICO
COFACTOR:
Componente

no proteico (ion metlico o

molcula
orgnica)
necesario
para
el
funcionamiento adecuado de la enzima.

COENZIMAS: Cofactores orgnicos

Baja actividad

Mxima

COENZIMAS

Adenosine Triphosphate (ATP)

Coenzyme A (CoA)

Nicotinamide Adenine
Dinucleotide (NAD+)

Nicotinamide Adenine
Dinucleotide Phosphate

Flavin Adenine Dinucleotide

ESPECIFICIDAD DE LAS ENZIMAS

Una enzima puede actuar sobre un sustrato

o un grupo de sustratos relacionados pero

no sobre otros. Cada enzima reconoce un
SUSTRATO.
Ej: Sacarasa: hidroliza la sacarosa.

Lipasas: Hidrolizan los enlaces ster en los lpidos.

ESPECIFICIDAD ABSOLUTA
ureasa

urea

tiourea

biuret

ESPECIFICIDAD ESTEREOQUIMCA

Las enzimas son molculas quirales.

ESPECIFICIDAD
ESTEREOQUIMCA
Las enzimas son molculas quirales.

Ismero cis

ESPECIFICIDAD

GRUPAL:
Son
menos
selectivas. Actan sobre molculas que
tienen los mismos grupos funcionales.

quimotripsin
a

carboxipeptid
asa

Especificidad
de la tripsina

Especificidad de la
trombina, un factor de
coagulacin.

SITIO ACTIVO Y
COMPLEJO ENZIMASUSTRATO.

Las reacciones enzimticas ocurren en dos etapas:

1.

S+E

E-S

E-S

P+E

2.

DIAGRAMA DE ENERGIA PARA EL PROGRESO DE UNA REACCION QUIMICA

A- - - -B

A+B

Sin enzima

Con enzima

AB

MECANISMO DE ACCION ENZIMATICA

MODELO DE LA LLAVE Y CERRADURA

La conformacin espacial de la parte proteica es

la responsable de la funcin que realiza la enzima.

Las sustancias que van a reaccionar se unen al

CENTRO ACTIVO, gracias a:

Uniones electrostticas
Enlaces de H
Interacciones de Van der Waals.

enzima

sustrat
o

CARACTERISTICAS DE LOS
CENTROS ACTIVOS
1. El
2.
3.
4.
5.

centro
activo
es
una
porcin
relativamente pequea de la enzima.
El
centro
activo
es
una
entidad
tridimensional.
Los sustratos se unen a los enzimas por
fuerzas relativamente dbiles.
Los
centros
activos
son
hoyos
o
hendiduras.
La especificidad del enlace depende de la
disposicin de los tomos del centro
activo.

PRINCIPIOS DE
CINETICA ENZIMATICA
A
C

Kd
Kr

V =Kd [A]
V = Kr [B]

B +

MODELO DE MICHAELIS-MENTEN
Propusieron

un modelo para definir la relacin

cuantitativa entre la velocidad de una reaccin
enzimtica
y
la
concentracin
de
sustrato
(caractersticas cinticas).

(1)
(2)
(3)
La Vmax se lograr cuando ES sea
mximo:

(4)

Reagrupando
(1)

(5)
Sustituyendo Km,

(6)

Sustituyendo (6) en (3)

queda:

(7)

Segn (2)

(8
)

Reordenando y resolviendo para Vo:

ECUACIN
CINTICA DE
MICHAELISMENTEN

Cintica y regulacin enzimtica.

[E] cte.

Representacin de la velocidad de reaccin, V, en funcin de la concentracin

de sustrato [S] para un enzima que obedece la cintica de Michaelis-Menten

GRAFICA DE LINEWEAVER-BURK

REPRESENTACION GRAFICA DE 1/V FRENTE A 1/[S]

Significado de los valores de K M y Vmax

KM = 10-1 - 10-6 M.
KM tiene dos significados:
1. Concentracin de sustrato a la cual la

mitad de los centros activos estn

ocupados.
2. Se relaciona con la constante de velocidad
de las etapas individuales en el sistema
cataltico representado por:

Si K 2 >> K 3,

La constante de
disociacin del complejo
[ES] es:

Entonces
Km = KES

KM es la medida de la estabilidad
de complejo enzima sustrato
(ES):
Una KM alta indica una unin

Km de algunas enzimas
ENZIMA

SUSTRATO

Catalasa

H2O2

Hexoquinasa

25.0

ATP

0.4

D-Glucosa

0.05

D-Fructosa

1.5

Anhidrasa carbnica
Quimotripsina

K m (mM)

HCO3

9.0

Gliciltirosinilglicina 108.0
N-Benzoiltirosinamida

2.5

-Galactosidasa

D-Lactosa

4.0

Treonina deshidrogenasa

L-Treonina

5.0

Vmax.
Es

la expresin de la eficiencia del

funcionamiento
enzimtico.
Cuando
la
enzima esta completamente saturada por el
sustrato.

Revela

el nmero de recambio de una

enzima: Moles de sustrato transformados
en producto por mol de enzima por unidad
de tiempo (min o seg.).

K3 = Constante de catlisis o
Kcat

Nmeros de recambio mximos de algunos

enzimas.

Fuente: Stryer,

ENZIMAS
REGULADORAS
Controlan la velocidad de flujo de una va
metablica determinada, catalizando una etapa
crucial dentro de ella.
Enzimas alostricas
Enzimas moduladas covalentemente
Zimgenos
Isoenzimas

ENZIMAS ALOSTERICAS
Un centro activo en una

molcula
enzimtica
puede afectar a otro
centro
activo
de
la
misma
molcula
enzimtica
(sitio
alostrico).
Su

actividad
puede
alterarse
por
la
presencia de molculas
reguladoras (activadores
o inhibidores) que estn
ligadas
a
centros

ENZIMAS MODULADAS
COVALENTEMENTE
Su actividad puede regularse a travs de la

unin covalente de ciertas molculas (grupos

fosfato).
Irreversible
Catalizada por enzimas
Hormonas

fosforilacin

ZIMOGENOS
Macromolculas

proteicas o enzimas
inactivas que por hidrlisis de enlaces
peptdicos especficos se convierten en
enzimas catalticamente activas.
Ej: Enzimas proteolticas se sintetizan en
el pncreas como zimgenos y se activan
en el tracto digestivo.

AGA Institute.
Copyright
2010

ISOENZIMAS
Son enzimas que difieren en la secuencia

de aminocidos pero que catalizan la

misma reaccin qumica.
Suelen mostrar diferentes parmetros
cinticos o propiedades de regulacin
diferente.
Ej: lactato deshidrogenasa en el msculo

esqueltico y cardaco.

Inhibicin enzimtica.

Inhibidor

Sustancia que impide la actividad de una

enzima.
Desnaturalizan las enzimas.
No son especficos.
Agentes qumicos: Hg+2, Pb+2, Ag+.
Mecanismo de control en los sistemas
biolgicos. Ej: Medicamentos y agentes
txicos.

CLASIFICACIN
REVERSIBLE
No destruye la enzima.
Competitiva:
Puede
revertirse aumentando
la [S].
No
competitiva:
No
puede ser revertida por
altas [S]
Drogas
sulfa usadas
para
combatir
infecciones microbianas.

IRREVERSIBLE
El
inhibidor
queda
unido covalentemente a
la enzima.
Hg+2, Pb+2, AsO4-3,

CN-.
Penicilina
Aspirina

INHIBICION COMPETITIVA
El inhibidor competitivo se asemeja al
sustrato.
Sustrat
o

Enzima
Sin inhibidor

Inhibidor

Enzima
Con inhibidor

Inhibicin competitiva

En la grafica con inhibicin la Km aumenta, lo que disminuye la

afinidad de la enzima por el sustrato.

INHIBICION NO COMPETITIVA
El inhibidor y el sustrato pueden unirse

simultneamente a una molcula de

enzima. Sus sitios de unin no se solapan.
Se forma un complejo [EIS], no productivo.
Acta

disminuyendo
el
nmero
de
recambio del enzima en vez de disminuir la
proporcin de molculas enzimticas que
se han ligado al sustrato.

Se presenta por la unin reversible del inhibidor a un sitio de la enzima libre

o con sustrato, diferente del sitio activo. Esta unin provoca cambios en la
conformacin de la enzima alterando as el sitio activo e impidiendo por
consiguiente la transformacin del sustrato.

sustrato
inhibido
r

Inhibicin no competitiva

Inhibicin competitiva

Inhibicin no competitiva

INHIBICION ACOMPETITIVA
Ocurre cuando un inhibidor se combina reversiblemente solo con
[ES] para formar [ESI], lo que no forma producto.
Se da en reacciones enzimticas con dos o ms sustratos.

Vmax y Km
se
alteran
en la misma
proporcin.

INHIBICION IRREVERSIBLE
El inhibidor queda unido covalentemente a la enzima

o ligado tan fuertemente que su disociacin de la

enzima es lenta.
Ej: Venenos: Cianuro, fluoruro, sulfuros, arsenatos.

ANTIMETABOLITOS
Sustancia que reemplaza, inhibe o compite

con un metabolito especfico.

Similares estructuralmente a las sustancias
biolgicamente activas.
Inhibe la enzima.
tiles para tratamiento de enfermedades
(sulfonamidas, fluorouracil)

INHIBIDORES REVERSIBLES
COMPETITIVOS

Bloquea la sntesis de cido flico en clulas

bacterianas.

INHIBIDORES IRREVERSIBLES
In cianuro, CN-: Se fija con gran afinidad a
la sexta posicin de coordinacin del Fe
hemnico del complejo citocromo oxidasa.
Penicilinas. Inhiben enzimas sernicas que

participan
en la formacin de la pared bacteriana.

Factores que afectan la

actividad de las enzimas.
Temperatura
pH
Concentracin de enzima
Concentracin de sustrato

TEMPERATURA

pH

Pepsina: 1.5-2.5
Tripsina: 8-11

CONCENTRACION DE LA
ENZIMA

CONCENTRACION DEL
SUSTRATO
ENZIMA
SATURADA