Dra. M.

Carolina Ceriani

COMPOSICION QUIMICA
Los cidos nucleicos estn compuestos por una reducida variedad de
molculas ms pequeas llamadas nucletidos.
Los nucletidos estn constituidos por:

1- un azcar de 5 carbonos: la ribosa o desoxirribosa

2 - Una base nitrogenada, que puede ser una purina o pirimidina.

3- Un compuesto de fsforo, el cido fosfrico.

Repasemos lo que es el ADN y el ARN

El AZUCAR
Siempre es un azcar de 5 carbonos. Dependiendo del
grupo que tenga en posicin 2 puede ser desoxirribosa o
ribosa. Por lo tanto hay dos tipos de cidos nucleicos
segn tengan una u otra azcar:
Los cidos ribonucleicos o ARN: que
tienen como azcar a la ribosa.

Los cidos desoxirribonucleicos o ADN:

tienen como azcar a la desoxirribosa.

BASE NITROGENADA
Son compuestos organicos ciclicos que tienen 2 o mas N.
Se asocian al carbono en posicin 1 del azcar.
Presentan uno o dos anillos de C y N, y puede actuar como
una base aceptando iones de H.
Las bases con un solo anillo son las
pirimidinas y las que tienen dos anillos purinas.

Nucleosido y Nucleotido
La unin del azcar con una
base constituye un nuclesido.

La unin entre el nuclesido y

el cido fosfrico, da lugar al
nucletido

Los 4 nucleotidos que componen elADN:

Deoxy TTP
(deoxythymidine
Triphosphate)

Las cadenas de nucletidos

que lo forman se enrollan
formando, una en torno a
otra, una estructura
especial que se conoce como
doble hlice ( -hlice ). Son
cadenas complementarias
con direccin opuesta
antiparalela.

Como es la relacion entre las bases?

guanina

adenina

citocina

timina

ESQUEMA DE UNA DOBLE HEBRA DE DNA

Las uniones
entre las bases
se dan siempre:

A=T
CG
Son uniones
relativamente
dbiles, de tipo
puente de H

La molecula de ADN esta formada por dos hebras de nucleotidos

antiparalelas que forman una doble helice, que se mantienen
unidas por puentes de hidrogeno.

En cambio, las uniones entre el

grupo fosfato de un
nucletido, y el OH del
nucletido siguiente, son de
tipo COVALENTE, uniones
fuertes, que se pueden romper
nicamente por mtodos
bioqumicos.

Veamos rapidamente el ciclo celular

Fase G1: Fase de crecimiento
celular.
Fase G2: la celula ya duplic su
material genetico, y se
prepara para la mitosis.
Fase M: fase de divisin
propiamente dicha.

Fase S: fase de sntesis

Duplicacion del ADN

Cuando hablamos de replicacin del ADN, se

mencionan tres caractersticas:

Semiconservativa
Bidireccional
Discontinua o Asimetrica

La replicacion es Semiconservativa

Significa que como resultado de la

Duplicacion, se obtienen
dos molculas de ADN-dos dobles
hlices- ambas compuestas
por una hebra parental, y una
recientemente sintetizada.

Bidireccional
Origenes de
replicacion

Como la molecula de ADN es muy larga, existen multiples

Origenes de replicacion para hacer la duplicacion mas rapida
( si lo hiciera a partir de un extremo, tardara 30 das!!!!)

Discontinua o Asimetrica
Por que? Si yo miro el resultado de la duplicacin, me
encuentro con dos hebras perfectamente formadas,
y sin ningun hueco.
Pero, si analizo el proceso en forma ms detallada, y
paso a paso, ver que la duplicacin no es tan sencilla
como parece.

El problema surge a partir del modo de accin de la enzima

Encargada de agregar los nucleotidos a la cadena en crecimiento
La ADN polimerasa es la encargada de copiar la doble hebra
a partir del ORI, en una de las cadenas.

ESQUEMA DE LA DNA POLIMERASA

La ADN polimerasa solamente puede agregar

nucletidos a un cadena polinucleotidica que ya
esta apareada con una cadena complementaria,
o, mejor an: necesita un extremo 3libre para
poder comenzar a polimerizar.
No puede INICIAR la sintesis de una cadena
de novo.
Quien le va a dar ese extremo 3libre? Otra
enzima que recibe el nombre de PRIMASA o
ADN primasa. Sintetiza una pequena porcion de
ARN que recibe el nombre de cebador o primer,
de unos 10 nucleotidos de longitud.

Como hace la ADN polimerasa para

sintetizar las cadenas en
ambos sentidos?

La DNA polimerasa solamente es

capaz de agregar nucletidos
a partir de un extremo 3libre, y
haciendo crecer la cadena
en sentido 5-3.
NUNCA lo hace en sentido opuesto.

3 5

Cmo se logra que ambas se cadenas se copien?

En esa hebra problema, otra ADN polimerasa (la ADN
polimerasa ), se adelanta un poco, y sintetiza un fragmento
pequeo.
A medida que la burbuja crece, este ciclo se repite nuevamente.
Estos fragmentos reciben el nombre de
FRAGMENTOS DE OKAZAKI, en honor a su descubridor.

Finalmente, esos cebadores de ARN son removidos o sacados

Por una nucleasa reparadora, y el espacio que queda es
Rellenado por una tercera ADN polimerasa especial, la ADN
Polimerasa
Sintesis de la cadena adelantada

Sintesis de la cadena atrasada

Crece la horquilla
de replicacion

Cadena de ADN
recien sintetizada

Polimerasas de mamiferos
ENZIMA

FUNCIN

ADN Pol

Sntesis Hlice retardada. Sntesis del cebador: 10 bases de

ADN y 25 de ARN.

ADN Pol

Sntesis de la Hlice conductora.

ADN Pol

Unin de los fragmentos de Okazaki ( de aproximadamente

250 pb).

ADN Pol

Sntesis ADN mitocondrial.

Proteinas que ayudan a desestabilizar la doble helice

5
3
5
3

5
3

Topoisomerasas I y II
o Girasa y Topo II

Cual es la funcin de las

topoisomerasas?

Actualmente, los conocimientos acerca de la duplicacin del

ADN se han incrementado notablemente. Todo el proceso se
divide, para su estudio, en dos fases: fase de iniciacin y fase
de elongacin

Para explicar el proceso , vamos a utilizar el

siguiente esquema para representar al ADN.
5
3

3
5

Las dos hebras del ADN son complementarias y

antiparalelas

FASE DE INICIACIN
A partir de los puntos de iniciacin se originan las denominadas
burbujas de replicacin, las cuales presentan dos zonas con forma
de Y llamadas horquillas de replicacin que se van abriendo
gradualmente a medida que se sintetiza nuevas hebras
complementarias de ADN
Burbujas de
replicacin

5
3

Horquillas de
replicacin

FASE DE INICIACIN
Para que el proceso se lleve a cabo con la mxima celeridad, la
duplicacin comienza simultneamente en muchos puntos de la doble
cadena, puntos de iniciacin (oriC) en los que abundan las secuencias
GATC.

...ACGTGATCGGGCTA....ACCGATCACATCGG.....AGGCGATCTTACG...
...TGCACTAGCCCGAT....TGGCTAGTGTAGCC .... TCCGCTAGAATGC...

Los puntos de iniciacin son reconocidos por protenas especficas,

entre las que caben citar a las helicasas, que rompen los puentes
de hidrgeno entre las bases nitrogenadas, las girasas, las
topoisomerasas, y las protenas SSB (single Strand Binding-DNA)
o protenas estabilizadoras de las dos hebras de ADN cuando
estn separadas.

FASE DE ELONGACIN
Es la fase en la que tiene lugar la sntesis de nuevas hebras de
ADN complementarias a cada una de las dos hebras de ADN
originales. En esta fase intervienen varios tipos de ADN
polimerasas que se nombran como , y . La actividad de estos
enzimas es por una parte polimerasa, es decir que seleccionan y
unen entre s los nucletidos que corresponden a los
complementarios de la hebra molde a medida que la van
recorriendo, y actividad exonucleasa, por la cual se eliminan
nucletidos errneos o mal apareados y fragmentos de ARN
colocados provisionalmente, como se ver posteriormente.
Para entender el proceso, vamos a centrar la atencin en una sla
horquilla de replicacin, y para un mejor entendimiento se ver
independientemente lo que sucede en cada hebra, sabiendo que el
proceso transcurre casi simultneamente en las dos hebras.

FASE DE ELONGACIN
Se inicia con la enzima PRIMASA, que coloca en cada horquilla unas hebras
cortas de ARN complementarias llamadas CEBADORES en el sentido 5 a 3
. Posteriormente, la ADN polimerasa comienza la sntesis aadiendo
nucletidos en el extremo 3
3
5

PRIMASA
5
3

ADN polimerasa

CEBADOR
ADN COMPLEMENTARIO

La hebra que vemos arriba crece de forma continua, mientras

que la otra lo va a hacer de forma discontinua

3
5

FASE DE ELONGACIN
Vamos seguidamente a ver como a medida que la horquilla de replicacin se va
abriendo y se produce el avance en la sntesis de las nuevas hebras
complementarias.
Para
que siga creciendo la otraSeguidamente las ADN polimerasas
hebra se ha de formar un nuevo
continuan en esta hebra colocando
cebador alejado del primero. desoxirribonucletidos, llegando hasta
sustituir al primer cebador. A esta hebra
En la hebra que vemos arriba lase le llama retardada o de crecimiento
ADN polimerasa sigue avanzando
discontinuo.
ininterrumpidamente, por ello se
llama de crecimiento continuo

3
5

5
3
ARN
Fragmento de OKAZAKI
Hemos visto que las ADN polimerasas colocan desoxirribonucletidos
complementarios de la hebras moldes (3a 5) y que tambin sustituye los
ribonucletidos de las cadenas cortas de ARN (5a 3), pero no une los
nucleotidos vecinos de la misma hebra.

3
5

FASE DE ELONGACIN
Para que los nucletidos de la hebra de crecimiento discontinuo tengan
continuidad hace falta la accin de un enzima llamado LIGASA.

3
Ligasa

5
3

3
5

FASE DE ELONGACIN
El proceso visto se repite en las dos horquillas de replicacin de cada
burbuja hasta que se llegan a encontrar las nuevas hebras que se han
formado en horquillas vecinas y con sentido opuesto.
3
5

5
3

3
5

FASE DE ELONGACIN
El avance en la hebra superior es continuo. En la inferior se forma
otro nuevo cebador y un fragmento de ADN (OKAZAKI)
3
5

5
3
3
5

FASE DE ELONGACIN
Ha desaparecido un cebador. Ahora queda que la ligasa una
los desoxirribonucletidos de la hebra de crecimiento
discontinuo.

3
5

5
3
3
5
Ligasa

FASE DE ELONGACIN
Ya hay continuidad en la hebra inferior.
3
5

5
3
3
5
Supongamos que slo queda un fragmento de ADN por copiar.

FASE DE ELONGACIN
Aqu vemos que se ha colocado el ltimo cebador en la
cadena inferior y que la ADN polimerasa an no ha
terminado su trabajo sustituyendo al penltimo cebador,

3
5

5
3
5
3

3
5

FASE DE ELONGACIN
Ya ha sido sustituido el penltimo cebador, pero falta unir los
desoxirribonucletidos mediante la ligasa.
3
5
5
3
5
3
3
5

FASE DE ELONGACIN
Finalmente, vemos total continuidad en las dos hebras, pero
observamos que en las copias hijas hay fragmentos de ARN.
3
5

5
3
5
3
3
5

FASE DE ELONGACIN
En sta imagen vemos, nuevamente, al resultado de la duplicacin todava
con las cadenas cortas de ARN o cebadores que le hicieron falta a la
ADN polimerasa para llevar a cabo el proceso.

5
3

3
5

5
3
Para concluir la duplicacin, esos dos cebadores colocados en los extremos
han de ser eliminados mediante la actividad exonucleasa de el enzima ADN
polimerasa I.

FASE DE ELONGACIN
Apreciamos como el resultado final son dos molculas de ADN a las
que le falta en una de sus hebras un pequeo fragmento final.

5
3

5
3

3
5

3
5

CONCLUSIN
La replicacin es un proceso clave en el ciclo celular y necesario para que
se lleve a cabo la divisin celular.
Las ADN polimerasas necesitan siempre un fragmento corto de ARN,
cebador, con un extremo hidroxilo 3 libre para aadir nucletidos. Las
ADN polimerasas siempre recorren la hebra molde en el sentido 3- 5.
Las hebras que se sintetizan en cada divisin celular siempre son
ligeramente ms cortas que las parentales, debido al hueco dejado por
los ARN cebadores.
Como es fcil de adivinar, con las sucesivas divisiones celulares se irn
acortando progresivamente las copias de las nuevas hebras que se
sinteticen. Estos dficits son los causantes de los acortamientos de los
TELMEROS. La prdida de los telmeros trae consecuencias fatales
para las clulas.

Telomeros
Los telmeros son estructuras
nucleoproteicas especializadas
que constituyen las
extremidades de los
cromosomas.

Son regiones de ADN no codificante, altamente

repetitivas, cuya funcion principal es brindar
estabilidad estructural a los cromosomas de las
clulas eucariotas durante:
la divisin celular.
en el tiempo de vida de las estirpes celulares.

Telomerasas
la enzima que sintetiza el ADN telomrico
y, por tanto, controla la sntesis de los
telmeros, jugara un papel importante en el
proceso de inmortalizacin de las clulas.
Es una transcriptasa inversa que sintetiza
ADN a partir de un molde de ARN. Se trata
de una ribonucleoprotena que contiene en
su molcula la secuencia AAUCCC capaz
de crear e insertar los fragmentos TTAGGG
que se pierden en cada divisin.

Telomerasas
Cuando la DNA polimerasa llega al
extremo de la cadena de DNA, se
encuentra con otro problema ms, ya
que no tiene molde para copiar.

 Como lo solucionan las clulas?

Daos en el ADN
La reparacin del ADN es un proceso constante en la clula,
esencial para La SUPERVIVENCIA.
Se producen unas 500.000 lesiones/molecula/dia.

Cuando la clula no puede mantener la tasa de reparacin

SENESCENCIA
APOPTOSIS
CARCINOGENESIS
La tasa es de 500.000 lesiones/molecula: aun as algunos
factores pueden hacer que esta tasa sea mayor.

ORIGEN DE LOS DAOS

ENDOGENO

ATAQUE POR RADICALES REACTIVOS DEL OXIGENO.

EXOGENO

RADIACION UV
RADIACION X Y RADIACION GAMMA
HIDRLISIS O RUPTURAS TERMICAS
PRODUCTOS QUIMICOS MUTAGENICOS
SINTETIZADOS POR EL HOMBRE
TRATAMIENTO DE QUIMIOTERAPIA Y
RADIOTERAPIA

Tipos de dao
OXIDACION DE BASES
ALQUILACION DE BASES (normalmente
metilacion)

HIDRLISIS DE BASES
depirimidizacion.)

(depurinacion y

ERRORES EN EL APAREAMIENTO DE BASES.

MUTACIONES

Los errores en la molcula de DNA completa son muy pocos,

de hecho encontramos 1 cada 109 bases.
Sin embargo, durante el proceso de duplicacin la tasa de error
es bastante mas alta, 1 / 100.000 (1x105) bases puede estar mal.
Como se logra esto?
Hay diversos mecanismos, veremos los mas importantes.

Mecanismo de reparacion general:

Lectura de prueba La lleva a cabo la misma ADN pol, con su act. Exonucleasa 3-5)

Sistema por nucleasa reparadora, ADN polimerasa y ADN ligasa

Sistema de escicion- reparacin

Se desenrolla la doble helice, y las dos hebras

simple cadena se exponen como molde
(helicasas, SSBP y topoisomerasas I y II)
Sintesis de la cadena
adelantada:
Iniciacion: Primasa
Elongacion: DNA
polimerasa
Reemplazo del
iniciador o primer de
RNA por DNA: DNA
polimerasa

Sintesis de la cadena
atrasada
Iniciacion del fragmento
de Okazaki: primasa
Elongacion del
fragmento:
DNA polimerasa
Reemplazo del iniciador
o primer de RNA por
DNA: DNA polimerasa.
Union de los
fragmentos: ligasa