Las separaciones analticas sirven para

separar,
identificar
y
medir
cuantitativamente
uno
o
ms
componentes de una mezcla compleja.

Fundamento
Se denomina separacin analtica a cualquier
procedimiento o tcnica que permite aislar
los componentes de una mezcla
Objetivos
Mediante una tcnica de separacin se puede
conseguir:
1.Pre-concentrar analitos
2. Eliminar interferencias
3. Formar especies detectables

Extraccin
proceso de pasar un soluto
de una fase a otra.

Caso ms frecuente
disolvente orgnico

Extraccin con un

Disolventes inmiscibles con el agua y menos

densos que sta (apolares)
- ter dietlico
- Tolueno
- Hexano

Clorofilas.- compuestos no polares

Disolventes ms densos que el agua

(polares)
- Cloroformo
- Diclorometano
- Tetracloruro de carbono
- Metanol

En una mezcla de 2 fases, una es

predominante (acuosa) y la otra es
predominante (orgnica)

Igual principio de la extraccin

Aqu se mantiene una fase fija (FE)y la otra

se mueve a travs de ella (FM)

La fase mvil (el disolvente que desciende a

travs de la columna) es un lquido o un gas

Las fase estacionaria es la que se encuentra

fija en el interior de la columna

Eluyente
fluido que entra por la
columna (disolvente)

Eluato
fluido que sale por el
extremo de la columna (fraccin de
componente)

Elucin
Proceso de paso de un
lquido o un gas a travs de la columna
cromatogrfica

Las columnas pueden ser:

Caudal
Volumen de disolvente que
pasa por la columna en una unidad de
tiempo

Velocidad lineal de flujo

Distancia
recorrida por el disolvente en la unidad
de tiempo

Los solutos eluidos de una columna cromatogrfica se

observan
detectores

Representacin de la respuesta del detector en funcin

del tiempo de elucin

Tiempo de retencin, tr
tiempo que transcurre
desde la inyeccin de una mezcla en la columna hasta
que el componente llega al detector

Carece de sensibilidad a niveles bajos

Volumen de retencin, Vr
es el
volumen de FM necesaria para eluir un
soluto determinado de la columna

Tiempo de retencin ajustado, tm

diferencia que tarda un soluto en atravesar
toda la columna y el que emplea un
disolvente no retenido

Retencin relativa,
es independiente
del caudal. Ayuda a identificar los picos.
Cuanto mayor es la , mayor es la
separacin entre los 2 componentes

Factor de capacidad k
cuanto ms
tiempo permanece un componente en la
columna, mayor es k

Las cromatografa se hacen con fines:

Dos factores inciden

eficacia de separacin:

en

la

1. Diferencia de tiempos de
elucin de los respectivos picos
2. Anchura de los picos

Cuanto mayor es la resolucin, mejor

es la separacin entre 2 picos
Dimetro y longitud de la columna
Composicin de la fase estacionaria
Uniformidad del empaquetamiento
Composicin y flujo de la fase mvil
Temperatura de trabajo
Volumen de inyeccin

1.

Incrementar la separacin de las

bandas.- Aunque se mejora la separacin
ocasiona ensanchamiento de banda por lo
que requiere tiempos de elucin mayores.

2.

Disminuir ensanchamiento de los

picos.- Es una forma ideal y el
ensanchamiento de las bandas slo
pueden ser disminuidas hasta cierto grado
debido a restricciones tcnicas.

Las
bandas
se
ensanchan
durante la inyeccin y la
deteccin, as como durante el
paso por la columna.
Cada ensanchamiento produce
una desviacin estndar y la
suma de stas nos da la
varianza