a

f
a
r
g
o
t
a
m
o
r
c
Profe. Silva Torres Rafael

Tswett
1903-1906

1948, premio nobel

Electroforesis
1950, G.A. Howard
C.liquida fase
inversa

1931
E. Leder
Separacin de
carotenoides

Cromatografa
historia

1940, Tiselius
desarrolla el
revelado
1941, J.P. Martin
C.reparto L-L

1936
L. Zechmeister
publica el libro
sobre la
cromatografa
1938
N.A. Izmailou
cromatografa en
capa fina
T.L. Taylor
C.intercambio
inico

1951, S.Moore
separacin de
aminocidos
usando resinas
sintticas I.io

2001-
Investigacin de
HPLC mejorando los
dispositivos (bombas
detectores) mejorar la
sensibilidad,
resolucin, etc.

1952, A. J. P.
Martin premio
nobel desarrolla
la cromatografa
gas-liquido

Cromatografa
historia
Extensin de
HPLC a todos
los campos

1965- a nuestros
das
HPLC

1961, L.R.Snyler
cromatografa de
absorcin

1956, J.J. Van

Deemter
Teora de
separacin
cromatografa

Importancia

Instrumentacin

Clasificacin de los mtodos

de separacion-adsorcion
a) Fase normal
b) Fase inversa
Particin
I. inico

Mtodos de
separacin
e
I. Analtica
Cromatografa
a) Capa fina
b) Columna
c) Papel

Cromatografa de
gases

HPLC

Mtodo de
separacin en el que
intervienen
procesos
fisicoqumicos que
permiten separar
los compuestos de
una mezcla
Fenmeno de
separacin
Intervienen fuerzas
de naturaleza
electrosttica
fuertes como
dbiles como:
fuerzas inicas, Van
der Waals
hidrofobicas,
hidrofilicas

Separacin
Separacin
Se basa en las
diferencias
diferencias de
de
velocidades
velocidades de
de
migracin de los
componentes de la
mezcla
mezcla en
en las
las fase
fase
mvil.
mvil. Parmetro
Parmetro que
que
depende de sus
afinidades en ambas
fases.
fases.

En el proceso de
separacin, el
soluto se efecta
entre dos fases
(solido, liquido o
gas)

Cromatografa

Fases
Movil- lquidos o
gas
Estacionaria- solido
o liquido soportado
por un solido

El propsito del
S.S. provee una
amplia superficie
para que se
distribuya la fase
liquida
Propiedades
-inerte
-rea con una
ampla superficie
-forma regular y
tamao uniforme

El disolvente
debe tener una
presin de vapor
adecuada a la
temperatura de
operacin

Soportes
slidos
S.S.
El liquido
apropiado para
hacer usado como
fase estacionaria
es muy
importante

Las muestras
deben tener una
solubilidad
razonable en el
disolvente
Las muestras
deben presentar
diferentes
coeficientes de
distribucin

Cromatografa

Clasificacin:
-Naturaleza fsica de las fases
involucradas
-Mecanismo de separacin
-Polaridad de las fases
-Composicin fase mvil
-Cantidad de muestra

Absorcin

Particin
Distribucin de un
soluto entre dos fases
inmiscibles L-L o S-L

Naturaleza fsica
Gases:
a) gas-liquido
b) gas-solido
Lquidos:
a) liquidos-liquidos
b) liquidos-solidos

Mecanismos de separacin
-absorcin
-particin
-intercambio inico: anionico,
cationico, par inico
-exclusin: premiacin, filtracin

Cromatografa papel
(papel celulosa)

Cromatografa liquida
clsica

Cromatografa
tcnica

Cromatografa lquidos
Fase mvil liquido.
Fase estacionaria puede
ser un liquido soportado
por un solido o un solido
(HPCL)

Cromatografa capa
delgada
(silica gel)

Cromatografa gases
Fase mvil gas inerte
helio, nitrgeno.
Fase estacionaria puede
ser solida o liquida de
alto punto de ebullicin
soportado por un solido

POLARIDAD DE LAS FASES

Cromatografa
liquida

Fase normal

Fase inversa
Cromatografa

Fase inversa
La fase
estacionaria es no
polar y la fase
mvil es polar

Fase normal
La fase estacionaria
es polar y la fase
mvil es no polar

Composicin de la fase
mvil
Cromatografa liquida

Eleccin isocratica
Se mantiene constante la
composicin de la fase
mvil

Eleccin gradiente
Varia la composicin (%)
de la fase mvil con
respecto al tiempo

cromatografa

Cantidad de muestra por

separar
Cromatografa liquida

Preparativa

Analtica